Mohamed, Mariel Schiavo , Florencia Tissot , Mariana

1. LA DISTROFINA, SUS INTERACCIONES CON OTRAS PROTEÍNAS, Y SUS IMPLICACIONES EN LA DISTROFIA MUSCULAR Mohamed, Mariel Schiavo, Florencia Tissot, Mariana

2. 1- La distrofina • Proteína 427 kDa producto del gen defectuoso en la Distrofia Muscular de Duchenne (DMD). • 4 dominios principales. • 3 promotores regulan su expresión completa en músculo y 4 promotores internos que codifican proteínas truncadas en tejidos no musculares.

4. Localización

5. ausencia de distrofina Desorganización del costamero • Fragilidad del sarcolema • Debilidad muscular • Necrosis • (+) Inmovilización muscular • (-) Estrés mecánico

6. Fenotipos • Grave: ausencia del dominio rico en cisteína y expresión de DP71. • Leve: ausencia de los dominios amino-terminal (CH tándem) o carboxi-terminal.

7. 2- El complejo distrofina-glicoproteína • 156 kDa α-distrogligano • 88 kDa Distrobrevina • Triplete de 59 kDa Sintrofina • 50 kDa α -Sarcoglicano • Doblete de 43 kDa β-distrogligano y β -sarcoglicano • 35 kDa γy δ-sarcoglicano • 25 kDa Sarcopan

8. Distrobrevina y sintrofina: son proteínas citoplasmáticas que se unen entre sí y con el dominio carboxi-terminal de la distrofina. - Sintrofina: moduladora de canales iónicos y molécula de señalización. -α-Distrobrevina: establece un vínculo entre la distrofina y el complejo sarcoglicano. Su ausencia produce miopatía progresiva.

9. Sarcoglicanos: son proteínas transmembrana que se co-ensamblan formando un tetrámero que fortalece la interacción de β-distroglicano con α-distroglicano y distrofina. Mutaciones Distrofia muscular de cintura y extremidades en humanos. • Sarcospan:Mutaciones No miopatías. • β-distroglicano: ausencia en ratones produjo DM.

10. 3- Socios moleculares del complejo distrofina-glicoproteína • Laminina: primer ligando extracelular para α-distroglicano. • Agrinas, neurexinas y perlecan: contienen módulos homólogos al dominio de laminina de unión a α-distroglicano. • Todas se unen a α-distroglicano de manera dependiente de modificaciones de sus oligosacáridos.

11. La función de unión a actina de distrofina y utrofina se limita al dominio amino terminal (dominio tándem CH)  ABD1 • Se identificó un segundo sitio de unión a actina ABD2

12. Distrofina esta fuertemente unida al sarcolema y se co-localiza con los filamentos de γ-actina citoplasmática. • Su función es anclar los filamentos de γ-actina del citoesqueleto al sarcolema. • En su ausencia, utrofina puede compensar dicha función.

13. Desmina es una proteína intermediaria entre Sinemina y sincoilina. • Sinemina se une a α-actinina y vinculina. • Miosprina se une directamente a α-actinina. • γ-filamina contiene un dominio amino-terminal tándem CH de unión a actina. • Citoqueratinas 8 y 19 interaccionan con el dominio amino terminal de distrofina.

14. 4- Remodelación costamero en deficiencia de distrofina muscular. Deficiencia de distrofina  Programa compensatorio • γ-actina • β-actina • γ-filamina • Lectina • Talina • Vinculina • Disbindina • Sincolina • α7 β1 integrina AUMENTAN

15. 5- Distrofina versus Utrofina UTROFINA • Producto de un gen autosómico. • Homólogo a distrofina. • Distribuida por todo el sarcolema en músculo fetal y regenerativo. • En adulto se limita a las uniones miotendinosas y neuromusculares.

17. DIFERENCIAS • Utrofina difiere de la distrofina en su modo de unión a los filamentos de actina y β-distroglicano. • Utrofina carece del segundo sitio de unión a actina ABD2. • No compiten por los sitios de unión a filamentos de actina. • Las repeticiones 1-10 tipo espectrina de utrofina son importantes en la unión a los filamentos de actina, pero éstas no son importantes en distrofina.

18. 6- Misterios sin resolver • Participación en la señalización celular • α-sintrofina. • MAP quinasa. • Utrofina puede compensar funcionalmente la deficiente de distrofina in vivo. • Distintos mecanismos moleculares de unión a actina  Distintas funciones in vivo (?).

19. Repeticiones tipo espectrina pueden actuar como amortiguadoras en la contracción y relajación muscular. • Su unión no competitiva permitiría la unión simultánea de utrofina y distrofina, estabilizando los filamentos costaméricos durante downregulation de utrofina y upregulation de distrofina luego del nacimiento. • El gran tamaño y multi-dominio de estas proteínas sugieren la presencia de otras proteínas de interacción que no han sido identificadas.