Lignées sanguines

1. DCEM1 :Hématologie fondamentale : 2009-10 Lignées sanguines Pr Philippe NGUYEN Dr Sylvie DALIPHARD Dr Baptiste GAILLARD Faculté de Médecine et CHU de Reims

2. Les différents types cellulaires • Globules rouges ou hématies (lignée érythroblastique) • Plaquettes (lignée mégacaryocytaire) • Leucocytes : • Polynucléaires • Neutrophiles • Eosinophiles • Basophiles • Monocytes • Lymphocytes • Classification morphologique • Microscopie optique • Coloration May Grünwald Giemsa

3. Origine • Moelle osseuse : cellule souche hématopoïétique • Le processus de production (multiplication – différenciation) = hématopoïèse • Érythropoïèse (globules rouges) • Mégacaryocytopoïèse (plaquettes) • Granulopoïèse (polynucléaires) • Lymphopoïèse (lymphocytes) • Notion de renouvellement, de durée de vie limitée des cellules sanguines, de sénéscence et de mort cellulaire

4. Décrire une cellule sanguine • Observation au microscope optique : • Sang total sur EDTA • Frottis sanguin, sur lame • Coloration May Grünwald Giemsa • Méthodologie : reconnaissance de la cellule : • Forme, présence ou non d’un noyau • Description du noyau • Description du cytoplasme • Évaluation de la taille des cellules • Intérêt : • En physiologie : structure-fonction • En diagnostic : normal ou pathologique

5. MGG GB : 10-20 m GR : 7-8 mPlaquettes : 2-3 M X 100

6. Cellules anucléées Hématies Plaquettes MGG Ici, en agrégat plaquettaire Habituellement, isolées

7. Globules rouges Morphologie : petite cellule anucléée Microscopie à balayage Constituant principal : l’Hémoglobine

8. Membrane érythrocytaire Bicouche (fluide) phospholipidique LIPIDES : 42 % GLUCIDES : 8 % PROTEINES : 50 % Cytosquelette SPECTRINE, ACTINE, ANKYRINE …

9. Structure (quaternaire) de l’hémoglobine MM 64 kDa 2 paires de chaînes polypeptidiques Contenant une porphyrine contenant un atome de FER

10. Biochimie érythrocytaire • L’hémoglobine • Le 2-3 Di PhosphoGlycérate = 2,3 DPG • Métabolisme énergétique : • Glycolyse anaérobie (90 %) : • pyruvate kinase… • Glycolyse aérobie : • glucose 6 phosphate déshydrogénase (G6PD) • 6 phosphogluconate déshydrogénase • Système d’oxydoréduction : • Système de maintien du glutathion à l’état réduit (glutathion réductase) • Système de réduction de la méthémoglobine (methémoglobine réductase à NADH)

11. Définitions • Hémolyse : destruction des hématies • Hémolyse physiologique • Sénescence des hématies • 120 jours

12. Plaquettes Microscopie électronique à balayage Microscopie optique Plaquette au repos Plaquettes activées Pseudopodes Agrégats Agrégat plaquettaire

13. Plaquettes Morphologie : petite cellule anucléée Granulations Granules denses (ME) : Granules a : Hémostase : primaire, interaction Plaquette-vaisseaux, surface Procoagulante- Inflammation

14. Plaquettes Morphologie : petite cellule anucléée Granulations • Granules denses (ME) : • Sérotonine • Calcium++ • Adénosine Di phosphate ADP • Granules a : • FWillebrand, fibrinogène • Facteurs de croissance, fibronectine Hémostase : primaire, interaction Plaquette-vaisseaux, surface Procoagulante- Inflammation

15. Plaquettes Morphologie : petite cellule anucléée Granulations • Granules denses (ME) : • Sérotonine • Calcium • ADP • Granules a : • FWillebrand, fibrinogène • PDGF, TGFa/b,, fibronectine • Expression de récepteurs • membranaires : • -GPIb-V-IX (CD42) : F Willebrand • -GPIIb-IIIa (CD41) : Fibrinogène • P-sélectine (CD62P) Hémostase : primaire, interaction Plaquette-vaisseaux, surface Procoagulante- Inflammation

16. Schéma de la plaquette

17. FIBRINOGENE

18. Polynucléaires neutrophiles • Morphologie : • 10-12 µm • Cytoplasme abondant : granulations • Noyau réniforme (cellule immature) ; • Noyau segmenté (cellule mature) • Granulations azurophiles • Myéloperoxydase • Phosphatase acide • Estérase • Cathepsines D, G

19. Polynucléaires neutrophiles Demi-vie courte : 4-10H • Propriétés : • Migration • Chimiotactisme • Adhérence • Phagocytose • Production de radicaux oxygénés • Granulations azurophiles • Myéloperoxydase • Phosphatase acide • Estérase • Cathepsines D, G Antigènes de membrane : CD45 CD11/CD18 (b2 intégrines) L-sélectine (CD62L)

20. Adhésion leucocytaire (microscopie électronique) Noyau Granulations Endothélium Pseudopodes

21. Polynucléaires éosinophiles • Morphologie : • 9-12 µm • Cytoplasme abondant : granulations • Noyau bilobé, réniforme • Granulations éosinophiles • Protéine basique majeure • Peroxydase spécifique • Protéine cationique de l’Eo • Cristaux Charcot-Leyden • lysophospholipase

22. Polynucléaires basophile • Morphologie : • 8-10 µm • Noyau rond Granulations basophiles histamine héparine Récepteurs de haute affinité pour IgE Mastocytes = tissus

23. Monocytes • Morphologie : • 9-15 µm • Noyau arrondi, indenté • Cytoplasme granuleux : • Lysosomes, mitochondrie • - Peroxydase +++

24. Monocytes Macrophages = tissus Antigènes de membrane : CD45 CD11/CD18 (b2 intégrines) L-sélectine (CD62L) • Propriétés : • Migration • Chimiotactisme • Adhérence • Phagocytose • Production de radicaux oxygénés Fonctions immunologiques Antigènes de membrane : CD14 : Récepteur du Lipopolysaccharide (LPS) des bactéries+++ CD32, CD64 : récepteur des immunoglobulines (FcgR ) • Présentation antigénique • Production de cytokines

25. MACROPHAGES : cellule non circulante

26. Lymphocytes • Morphologie : G0 • 7-9 µm • Noyau volumineux, • à chromatine dense • Cytoplasme mince Pas de différence morphologique entre les lymphocytes T et B

27. Plasmocyte : cellule non circulante

28. Questions d’examen • Décrire succinctement la morphologie plaquettaire, d’un polynucléaire neurophile, d’une hématie (septembre 2008) • Décrire succinctement la morphologie d’un lymphocyte normal, non activé (juin 2008) • Décrire succinctement la morphologie d’un plasmocyte, en indiquant la relation entre l’aspect morphologique et la fonction principale de la cellule (juin 2008) • Décrire succinctement la morphologie plaquettaire en indiquant ses principaux constituants