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Technique d’antibiogramme des Staphylocoques ( Staphylococcus aureus). Dr H.TALI-MAAMAR – EHS MAOUCHE INSP – 12 AVRIL 2006. Principaux caractères bactériologiques. Espèce type: S.aureus Cocci à Gram positif Aéro anaérobie facultatif, non exigeant Catalase +, oxydase –, O129 R
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Technique d’antibiogrammedes Staphylocoques(Staphylococcus aureus) Dr H.TALI-MAAMAR – EHS MAOUCHE INSP – 12 AVRIL 2006
Principaux caractères bactériologiques • Espèce type: S.aureus • Cocci à Gram positif • Aéro anaérobie facultatif, non exigeant • Catalase +, oxydase –, O129 R • Coagulase, dégradation du mannitol, production d’hémolyse, novobiocine. • Milieux sélectifs: Chapman, Baird Parker
Infections communautaires et nosocomiales Infections cutanéo-muqueuses (folliculite, furoncule, anthrax) Septicémies Intoxications alimentaires Infections urinaires Pus divers Hémoculture Prélèvements nasaux Prélèvements cutanés Urines LCR Aliments Pouvoir pathogène - Prélèvements
Sensibilité aux antibiotiques • 194…: apparition des premières souches de S.aureus résistantes à la pénicilline • 196…: apparition des souches résistantes à la méthicilline • 199… : Souches de sensibilité intermeédiaire à la vancomycine • SARM et résistances associées aux aminosides, macrolides, fluoroquinolones. • 200… :Plus récemment caractériseation de souches de SARM, virulentes, responsables d’infections communautaires.
Antibiotiques à tester (Liste standardisée, spectre d’activité, disponibilité, indication clinique) • Bêtalactamines: • Pénicilline G • Oxacilline • Aminosides: • Amikacine (H) • Gentamicine • Macrolides: • Erythromycine • Clindamycine • Pristinamycine • Glycopeptides • Vancomycine (H) • Autres: • Ofloxacine • Acide fusidique • Chloramphénicol • Tétracyclines • Cotrimoxazole • Fosfomycine (H) • Rifampicine • Cefoxitine: pour rechercher la résistance à l’oxacilline • Novobiocine: diagnostic • Composé vibriostatique O129: diagnostic
Test de sensibilité aux antibiotiques (Technique standardisée – normes NCCLS) Antibiogramme ppt dit Tests complémentaires • Milieu: Mueller Hinton • Inoculum: 0,5 Mc Farland • Disques d’antibiotiques (cf liste) • Interprétation: valeurs critiques • Contrôle de qualité: S.aureus ATCC 25923 • Screening test à l’oxacilline • Recherche de la PLP2a • Détermination de la CMI • Recherche de la pénicillinase: en cas de problème d’interprétation à l’ATBgramme • Recherche de la résistance aux glycopeptides.
Recherche des MRSA screening test Souche à tester S.aureus ATCC 43866 S.aureus ATCC 29213 S.aureus ATCC 43300 Screening test
Recherche des MRSA Recherche de la PLP2a Souche MRSA + Souche MRSA -
Règles générales d’interprétation de l’antibiogramme *: Si phénotype L,résistance à la Lincomycine avec diminution de l’activité de la Clindamycine.