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CHLAMIDIA. Familia de bacterias intracelulares obligadas. Afinidad por células epiteliales de las mucosas. Inmóviles. Poseen proyecciones cilíndricas que se unen a receptores de su célula blanco . Chlamidias. Durante mucho tiempo se pensó que eran virus, esto no es así debido a:
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CHLAMIDIA • Familia de bacterias intracelulares obligadas. • Afinidad por células epiteliales de las mucosas. • Inmóviles. Poseen proyecciones cilíndricas que se unen a receptores de su célula blanco.
Chlamidias • Durante mucho tiempo se pensó que eran virus, esto no es así debido a: -Poseen envoltura celular similar a Gram negativas -Contienen ADN y ARN. -Poseen ribosomas procarióticos. -Son susceptibles a una amplia gama de antibióticos.
Clasificación La familia se divide en dos géneros: • Chlamydia • Chlamydophila
Chlamydia agrupa 3 especies: Trachomatis Suis Muridarum
Chlamydophila incluye 6 especies: • Psitacci (aves-hombre) • Abortus (bovinos-hombre) • Felis (felinos) • Pneumoniae (hombre-cobayos-koalas) • Pecorum (cerdos-rumiantes) • Caviae (cobayos)
Ciclo de desarrollo • Existen 2 morfologías diferentes: cuerpo elemental cuerpo reticulado
Cuerpo elemental • Cuerpo esférico, pequeño y denso de 0.2 a 0.4 micras de diámetro. • Es la forma infecciosa responsable de la fijación a la célula blanco. • Está rodeado por una doble envoltura trilaminar, una interna o membrana citoplasmática y otra externa que corresponde a la pared celular bacteriana. • Esta pared tiene una composición química similar a la de las bacterias gram negativas.
Cuerpo elemental • Tiene muy poco o nada de ácido murámico, contiene una gran cantidad de proteínas ricas en aminoácidos azufrados que forman puentes disulfuros que son los responsables de su rigidez y escasa permeabilidad lo que le permite la supervivencia en su corta vida extracelular • ADN compacto, molécula circular cerrada.
Cuerpo reticulado • Es la forma intracelular, metabólicamente activo, que se divide por fisión binaria. • Es más grande que el cuerpo elemental, 0.6 a 1 micra de diámetro, pero de pared más fina, tiene un aspecto granular por el desenrollamiento del ADN y mayor nº de ribosomas (mayor activ.biosintética)
Fases del ciclo de desarrollo • Fijación y penetración del CE • Transición del CE metabólicamente inerte en el CR metabólicamente activo • Desarrollo y división del CR que produce una progenie abundante • Maduración de los CR no infecciosos a CE infecciosos • Liberación de los CE de la célula huésped
Fijación y penetración • Adhesión a la célula blanco, participan LPS y MOMP (mayor proteína de membrana externa). • Ingestión por parte de la célula. • Fusión del fago-lisosoma con los macrófagos
Transición de CR a CE • Formación del fagosoma • Inicio de síntesis proteica. • Las momp pasan de su forma polimérica a monomérica, se forman poros por donde pasan los nucleótidos transportadores de energía.
Desarrollo y división de los CR • A las 12 horas de la infección todas las chlamidias están en forma de cuerpo reticulado. • Se dividen por fisión binaria.
Maduración de CR a CE • Cuando los nutrientes de la célula hospedadora se agotan, las MOMP vuelven a su estado polimérico formando puentes disulfuro.
Liberación de los CE • Se produce entre las 48 y 72 horas. • Puede darse por lisis celular (C.psitacci) o por exocitosis (C. trachomatis). Pueden liberarse intactos o rodeados por una membrana agrupados como una pequeña colonia.
Estructura antigénica • Todos los miembros de la familia presentan una serie de antígenos comunes, el más importante es el LPS, que posee además del lípido A, 3 moléculas de ácido 3 Keto-2 desoxioctulosónico (KDO). • Carecen del polisacárido O
Estructura antigénica • Los antígenos proteicos están constituidos por las MOMP : proteínas ricas en aa azufrados actividad de porina función adhesiva
Estructura antigénica • La proteína Omp2 es la segunda más importante de la pared celular, solo se encuentra en el CE, por poseer restos azufrados le confiere resistencia y rigidez. • La Omp3 es una lipoproteína, que sirve de enlace entre la Omp2 y los fosfolípidos de la membrana externa. • La POMP es exclusiva de la C.abortus, la cual es altamente inmunógena.
Obtención de las muestras • Eliminar secreciones y exudados. • Realizar hisopados vigorosos. • Colocar en medio de transporte. • Enviar refrigerado a 4ºC y procesar dentro de las 48 horas, caso contrario congelar a -70ºC.
Toma de muestras • Para C. tracomatis: material ocular, urogenital, rectal, nasofaríngeo. • Para C. psitacci: sangra, esputo o biopsia de tejidos. • Para C. pneumonie: hisopados de orofaringe posterior.
Diagnóstico de laboratorio • Solo pueden cultivarse y aislarse en células eucariotas (Intracelular obligado) • Proliferan en la membrana del saco vitelino del embrión de pollo (de 6 a 8 días). • Ratón y cobayo: animales más idóneos para inocular (IP-IN-IC)
Diagnóstico • Forma más práctica y de uso más frecuente: uso de líneas celulares (Mc Coy, Hela o Vero) fibroblastos de embrión de pollo
Observación • Se realizan tinciones como las de Jiménez o Giemsa. • Se observan también por Inmunofluorescencia o indirectamente por métodos serológicos como fijación de complemento o PCR.
Afecciones que causan • C. trachomatis: Afecciones en los ojos: -“tracoma”(queratatoconjuntivitis). Afecciones venéreas: -linfogranuloma venéreo -vaginitis-esterilidad
Afecciones que causan • C. psitacci: Psitacosis (ornitosis), zoonosis. Aves portadoras: loros, palomas, patos, pollos, pavos, cotorras. Puerta de entrada: aparato respiratorio por inhalación de los m.o a partir de aves infectadas o sus excrementos
Patologías que producen • Porcinos (diarrea-neumonía), felinos (neumonía-conjuntivitis), equinos (abortos-diarrea), ovinos (abortos, diarrea, neumonía), hombre (fiebre, mialgias, cefalea frontal, neumonía, conjuntivitis, rinitis, abortos, puede llevar a la muerte), bovinos (abortos, disminución en la producción de leche, vesiculitis, encefalomielitis).
RICKETSIACEAE: • Son bacterias parásitas obligadas de células eucariotas, siendo sus hospedadores vertebrados o invertebrados (garrapatas, ácaros, pulgas y piojos). • Son pleomórficos, con formas bacilares o cocoides, cuyo tamaño varía de 0.3 a 0.6 micras de ancho, por 0.8 a 2 micras de longitud.
Ricketsias • Son inmóviles y aerobias. • Producen débiles endotoxinas. Son Gram negativas aunque no se tiñen bien con este colorante. • Son inestables en estado extracelular, excepto C. burnetti que es resistente al calor y desecación gracias a estructuras similares a endoesporas
Infección: por picadura de artrópodo o ingestión de tremátodos infectados Adherencia a zonas ricas en colesterol de las membranas de las células diana “endocitosis inducida” Quedan incluidas en los fagosomas Liberación en el citosol División por fisión binaria hasta que estalla la célula
Aislamiento y observación • Se cultivan en embrión de pollo por inoculación en saco vitelino o en cultivos celulares. • Se utilizan las tinciones de Giemsa o Stamp, o Maquiavello. • También se pueden realizar Inmunofluorescencia. • Inmunohistoquímica
Inmunohistoquímica Gimenez
Estructura antigénica • Las rickettsias expresan un antígeno de grupo similar al lipopolisacárido y otros de naturaleza proteica, de los cuales los más importantes son las proteínas rOmp A y rOmpB.
Clasificación • Orden Ricketsiaceaecompuesto por 2familias: • Rickettsiaceae: con 3 géneros: • Ricketsia (sp ricketsi) • Orientia • Wolbachia
Ehrlichiaceae: con 4 géneros: • Ehrlichia (canis) • Anaplasma (marginale-centrale) • Cowdria (ruminantium) • Neoricketsia (helminthoeca)
Orden Rhizobiales: Compuesto por la familia Bartonellaceae con 1 género: Bartonella • Orden Legionellales: Compuesto por la familia Coxiellaceae con 2 géneros: *Coxiella *Ricketsiella
Ricketsia ricketssi: afecta a los caninos Vector: garrapatas. Produce la fiebre manchada de las montañas rocosas. Muchas especies afectan al hombre produciéndole Tifus el vector en este caso el piojo (R.Prowazeki). • Ehrlichia canis: transmitida por garrapatas (rhipicephalus sanguineos). Produce una enfermedad febril caracterizada por anorexia, edema hemorragias y muerte.
Anaplasma los vectores son los mosquitos, las garrapatas (bophilus microplus) y el más importante en la Argentina es el tábano, también se transmite por agujas contaminadas con sangre de animales enfermos, instrumental quirúrgico, etc. • Parasitan los GR, se observan como estructuras cocoides de 0.3 a 1 micra de diámetro. Son Gram (+)
Anaplasma centrale -centro del GR marginale –periferia del GR *Producen enfermedades anemizantes
Cowdria: su especie ruminantium afecta a bovinos y ovinos produciendo la enfermedad denominada corazón acuoso. También se transmite por garrapatas pero del género amblyoma. • Neoricketsia: con su especie helminthoeca, se encuentra en lombrices que parasitan al salmón y truchas. Afecta a los caninos que se alimentan de pescado crudo produciéndoles enteritis hemorrágica.
Coxiella: especie: burnetti. Afecta a bovinos, ovinos y hombre (zoonosis). Se transmite a los animales por vectores hematófagos como las garrapatas. En el hombre produce la enfermedad conocida como Fiebre Q, ocasionando fiebre, neumonía o hepatitis. Ingresa por vía aerógena, por piel, por ingestión de leche no pasteurizada o por manipulación de lanas o cueros.