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LA GALERIE API 20E (travail de R. FERRY CANNES). 1- Présentation de la galerie. Galerie de 20 microtubes prêts à l’emploi permettant de réaliser 23 tests biochimiques afin d’identifier des bacilles Gram – appartenant à la famille des ENTEROBACTERIACEAE . cupule.
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LA GALERIE API 20E (travail de R. FERRY CANNES) 1- Présentation de la galerie Galerie de 20 microtubes prêts à l’emploi permettant de réaliser 23 tests biochimiques afin d’identifier des bacilles Gram – appartenant à la famille des ENTEROBACTERIACEAE. cupule microtube contenant le milieu déshydraté La suspension bactérienne introduite dans le tube dissout les substrats déshydratés.
LA GALERIE API 20E 2- Préparation de l’inoculum 1 seule colonie sur GO isolement Prélèvement d’une souche pure sur GNI 5 mL d’eau distillée stérile Souche pure sur GNI
Remplir de suspension le tube et la cupule Pour les tests : CIT VP GEL LA GALERIE API 20E 3- Ensemencement de la galerie API 20 E Introduire la suspension bactérienne dans chaque tube à l’aide d’une pipette Pasteur stérile ouverte, pointe appuyée à l’intérieuret sur le côté pour éviter la formation de bulles Pour certains caractères: Remplir le tube de suspension puis recouvrir d’huile de paraffine Pour les tests : ADH, LDC, ODC, H2S, URE
LA GALERIE API 20E 4- Lecture de la galerie API 20 E Après 24h d’incubation à 37°C, dans quelles cupules doit-on rajouter des réactifs ? Chlorure de fer III Naphtyl-1-amine Napht-1-ol
+ Réactif TDA + Réactif Kovacs + Réactifs VP 1 et 2 + Réactif TDA + Réactif Kovacs + Réactifs VP 1 et 2 LA GALERIE API 20E 4- Lecture de la galerie API 20 E Les 10 premiers tests Tests négatifs Tests positifs
LA GALERIE API 20E 4- Lecture de la galerie API 20 E Les 10 derniers tests Tests négatifs Tests positifs Après ajout des réactifs Nit 1 et Nit 2 : lecture de la NR (ici NR +)
Beta galactosidase Lecture directe Arginine DihydrolaseLysine DécarboxylaseOrnithine Décarboxylase Rouge de Phénol Lecture directe Utilisation du citrate BBT Lecture directe Production d’H2S Lecture directe Rouge de Phénol Uréase Lecture directe Lecture indirecteAjouter une goutte de réactif chlorure de fer III Tryptophane désaminase Lecture indirecteAjouter une goutte de réactifKovacs Tryptophanase ou production d’indole Lecture indirecteAjouter 1 goutte de VP1 et VP2 Attendre 10 minutes production d’acétoïne (hydroxy-3-butanone gélatinase Lecture directe Utilisation de substrats carbonés (glucides) BBT Lecture directe Lecture indirecteAjouter 1 goutte de NIT1 et NIT2 et zinc éventuellement Nitrate réductase
LA GALERIE API 20E 5- Identification de la souche Résultats de la galerie : - + + + + 5 1 7 5 5 3 5 2 7 Résultats reportés sur la fiche d’identification Code n°: 5 215 773 (55) Se référer au catalogue pour identifier la souche à l’aide du code