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培養基 CULTURE MEDIA 合成或已知成分培養基 Synthetic or Defined Media 所有組成分都是已知化合物 複合培養基 Complex Media

培養基 CULTURE MEDIA 合成或已知成分培養基 Synthetic or Defined Media 所有組成分都是已知化合物 複合培養基 Complex Media 培養基含有一些化學組成不清楚的成分 蛋白胴 (peptone) 是肉、酪蛋白、大豆粉、明膠、和其他蛋白質的部分水解產物，通常作為碳源和氮源 牛肉萃取物和酵母萃取物分別是瘦牛肉和啤酒酵母的水溶性萃取物 液體培養基中加入 1.0 ～ 2.0% ( 通常為 1.5%) 的瓊脂 agar ，可製成固體培養基 瓊脂是主要由 D- 半乳糖、 D- 葡糖醛酸組成的聚物，紅藻萃取。

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培養基 CULTURE MEDIA 合成或已知成分培養基 Synthetic or Defined Media 所有組成分都是已知化合物 複合培養基 Complex Media

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Presentation Transcript

  1. 培養基CULTURE MEDIA • 合成或已知成分培養基 Synthetic or Defined Media • 所有組成分都是已知化合物 • 複合培養基Complex Media • 培養基含有一些化學組成不清楚的成分 • 蛋白胴(peptone)是肉、酪蛋白、大豆粉、明膠、和其他蛋白質的部分水解產物，通常作為碳源和氮源 • 牛肉萃取物和酵母萃取物分別是瘦牛肉和啤酒酵母的水溶性萃取物 • 液體培養基中加入1.0～2.0% (通常為1.5%)的瓊脂agar，可製成固體培養基 • 瓊脂是主要由D-半乳糖、D-葡糖醛酸組成的聚物，紅藻萃取。 • 優良的固化劑，40～42°C時凝固，凝固的瓊脂在溫度80～90 °C時可保持固體狀態 • 大多數微生物不能降解瓊脂

  2. 培養基的類型Types of Media • 選擇培養基(selective medium) • 培養基中加入特定物質，用來培養特定的微生物 • 加入膽鹽、鹼性品紅、或結晶紫等染 料可以抑制G+細菌生長，但不影響G-細菌生長EMB agar • 以纖維素當作唯一碳源，分離纖維素分解細菌 • 鑑別培養基(differential medium) • 根據微生物各自特點設計的用於區分和鑑定不同微生物的培養基 • 血瓊脂blood agar，可用於區分溶血性和非溶血性細菌，麥氏培養基……

  3. 純培養物的分離 ISOLATION OF PURE CLUTURES • 平板塗佈法和平板劃線法 The Spread Plate and Streak Plate • 當每個細胞生長於培養基，經繁殖形成單個菌落(colony) • 菌落可能是源於一個細胞 • 菌落是一群細胞在培養基上的外觀 • 每個菌落代表一個『純培養物』 • 不同種類的細菌其菌落型態會不一樣 • 觀察菌落型態即可知樣品菌種有無其它雜菌污染 • 同一種細菌在不同的培養基上菌落型態可能不一樣 • 平板塗布法Spread Plate • 稀釋程度以最終在每個平板上長出的菌落數約30～300為宜 • 將樣品加在平板中央，用無菌玻棒將樣品均勻塗在培養基表面 • 可用來對樣品中微生物數量進行計數

  4. 平板塗布技術(Spread-Plate Technique) • 1. 將少量的菌液用微量吸管滴在平板中央 • 2. 將玻棒侵入酒精中

  5. 3.將沾附酒精的玻棒稍用火燒並放置使其『冷卻』3.將沾附酒精的玻棒稍用火燒並放置使其『冷卻』 • 4.用玻棒把菌液均勻塗佈於平板表面上培養

  6. 平板劃線法Streak Plate • 將沾有菌種的接種環在培養基表面劃線 • 在劃線過程中，細胞逐漸分散，培養後 可形成單個菌落 • 成功獲得純培養物需依賴樣品中混合在一起的細胞是否有效地分開 • 平板傾倒法The Pour Plate • 應用於細菌和真菌的單菌落分離過程 • 先對樣品進行系列稀 釋，使樣品中微生物密度降低，有利於在平板上形成單一菌落 • 然後將少量系列稀釋樣品分別與冷卻至45℃的液態、瓊脂培養基混合均勻，立即倒入『無菌』平板培養血中 • 大多數細菌和真菌短暫處於45℃下不會被殺死 • 當瓊脂凝固後，每個細胞都被固定在培養基中一定位置

  7. 平板劃線技術(Streak-Plate Technique)

  8. II區 III區 I區 IV區

  9. 平板培養血 (Petri dish) • 發明者Julius Richard Petri的名字命名的 • Petri是柯赫實驗室的一名成員， 於1887年發明 • 菌落的形態和生長Colony Morphology and Growth • 當多種微生物混雜在一起時，根據它們在平板上形成菌落的形態特徵，可初步將所需分 離的微生物與其他微生物區別 • 菌落周圍細胞生長最快，菌落中央的細胞生長慢，而且中央部位的老細胞會自我裂解

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