1.12k likes | 5.28k Views
REKAYASA GENETIKA. BLOK 1.1 DR.ETI YERIZEL,MS BIOKIMIA DAN BIOLOGIMOLEKULER. REKAYASA GENETIKA. Kemajuan teknik dan konsep dari disiplin ilmu biologi molekuler dalam tiga dasarwarsa terakhir ini telah membawa pengaruh luarbiasa di dalam penguasaan bioteknologi.
E N D
REKAYASA GENETIKA BLOK 1.1 DR.ETI YERIZEL,MS BIOKIMIA DAN BIOLOGIMOLEKULER
REKAYASA GENETIKA Kemajuan teknik dan konsep dari disiplin ilmu biologi molekuler dalam tiga dasarwarsa terakhir ini telah membawa pengaruh luarbiasa di dalam penguasaan bioteknologi. Tidak ketinggalan pula disiplin ilmu genetika turut serta menikmati kemajuan tersebut. Rekayasa Genetika: Semakin banyak bukti penelitian dengan pendekatan genetika berhasil menerangkan patogenesis sebuah penyakit yang sebelumnya tidak pernah didiskusikan dengan tinjauan genetika. Oleh karena itu cukup beralasan apabila saat ini genetika menjadi sebuah ilmu yang banyak dipakai di dalam biomedis.
REKAYASA GENETIKA Pemahaman tentang konsep dasar DNA sebagai pembawa informasi genetik, pada akhirnya melahirkan sub disiplin ilmu baru dari disiplin ilmu genetika, genetika molekuler. Kehadirannya melengkapi sub disiplin yang lainnya seperti: genetika formal, genetika populasi, genetika klinik, dan pelayanan konsultasi genetika. Genetika molekuler berbicara banyak tentang: DNA sebagai pembawa informasi genetik; Struktur DNA, replikasi, dan reparasi; Konsep dasar transkripsi dan translasi; Konsep dasar kode genetik, gena, dan mutasi; serta rekayasa genetika.
REKAYASA GENETIKA PenerapanteknikBiologimolekuleruntukmengubahsusunangenetikdalamkromosomataumengubahsistemekspresigenetik yang diarahkanpadakemanfaatantertentu
GEN PEMBAWA INFORMASI GENETIK • Gena merupakan komponen operasional pembawa informasi genetik. • Gena dapat didefinisikan sebagai sebuah segmen molekul DNA yang memiliki informasi biologis/genetis, merupakan cetak biru untuk pembentukan RNA dan molekul polipeptida. Sepertikitaketahuibahwaurutannukleotidadidalam genome merupakanpenentuurutanasam amino penyusunpolipeptida yang dikodeolehnya.
DNA PEMBAWA INFORMASI GENETIK Denganbeberapastudilanjutanakhirnyadiyakinibahwa DNA merupakankomponenekstrak yang mempunyaikemampuanmentransformasiini. Hal inisejalandenganteori yang hinggakinimasihdiyakinikebenarannya, bahwabakterimempunyaikemampuanuntukmenerimasegmen DNA asing yang selanjutnyadigabungkandengangenomenyasendiri. Inilah yang bisamenerangkanperubahantersebut.
DNA PEMBAWA INFORMASI GENETIK . Buktilangsungtentang DNA sebagaipembawainformasigenetikpertama kali diajukanoleh A.D Hersleydan M. Chase padatahun 1952 Merekamenggunakanbakteriofagauntukpercobaanini. Komponen protein kapsulardaribakteriofagadiberi label radioaktif (35S) yang berbedadengan DNA (32P). Padasaatbakteriofagainimenginfeksibakteri, dibuktikanbahwahanya DNA yang masukkedalambakteri, sementarakomponenkapsularnyatetapberadadiluarselbakteri. Namun, sepertihalnyadiyakinihinggakini, meskipunhanya DNA yang masukkedalamselbakteri, padaakhirnyasetelah DNA bakteriofagainimemperbanyakdiri, terbentukbakteriofagasempurnadengankapsulnya. Terlihatdenganjelasbahwa DNA merupakanpembawainformasigenetik
KLONING • Kloning DNA • Sebuahsegmen DNA bisadiperbanyakdengancara cloning. Hal inisangatmembantukarenadengancarademikiandapatdidapatkan kopi segmen DNA dalamjumlah yang besar. • Untukselanjutnyahasilperbanyakaninibisadipakaisebagaibahandasaruntukanalisislebihlanjut. Untuktujuan cloning ini, diperlukansebuah plasmid pembawasebuahsegmen DNA yang diinginkanuntukdimasukkankedalamselbakteri (misalnya: E. coli).
KLONING • Olehkarenasifatwaktu yang cepat, plasmid yang kitatransfromasikankedalamselbakteritersebutikut pula diperbanyak. • Padaakhirnya, kitaakanmendapatkan plasmid yang mengandungsegmen DNA yang diinginkansetelahmengekstraksinyadaridalamselbakteri.
DNA REKOMBINAN • Rekombinasiseringdiartikansebagaipengaturankembalikomposisimolekul DNA. • Dalambentuknyatanyarekombinasiadalahsebuahproses yang berakibatsebuahsegmen DNA terputusdarisegmen DNA yang biasanyamenjadilanjutannya, danbersambungdengansegmen DNA yang lainnya. Sebagaihasil
DNA REKOMBINAN Akhirnyaadalahkomposisidanurutannukleotidamenjadiberubah. • Lain denganmutasi, rekombinasidapatmenyebabkanperubahanurutannukleotida DNA yang signifikandanmeliputi locus yang panjang • Hal initerjadikarenadenganrekombinasiperubahanurutannukleotidadidalam genome dapatberubahsecaradrastisdandalamjumlah yang besar.
DNA REKOMBINAN • Padaprinsipnyaadalah, sebuahsegmen DNA tertentudidalam genome eukaryotes maupun prokaryotes, transposons, memilikikemampuanuntukberpindahdarisatutempatketempatlainnya. • Perpindahaninibisa (a) disertaipengkopian, segmen DNA aslinyamasihadaditempatsemulasementara yang berpidahadalahkopinya. (b) Tanpaprosespengkopiansepertilayaknyamekanismecut and paste.
TRANSFORMASI • Memperkenalkan DNA kedalam host sel lain sedemikianrupa, sehingga gen tersebutdapatdiekspresikan • Gen pada DNA yang ditransformasikanharusmampu: • Transkripsidantranslasiuntukmembentukmolekul protein • Replikasidandapatditurunkankegenerasiberikutnya
TRANSFORMASI • Untukmengontrolreplikasidanekspresi DNA asing yang telahdisisipkankedalamnyadapatdigunakanVektor ,plasmid maupun virus • Transformasidapatdidefinisikan: Perubahankeadaan/sifatsatu strain oleh DNA asing • Dapatdilakukandenganmemasukan DNA donor kedalamselinang • DNA donor bisautuhataupunrekombinan
TRANSFORMASI • TEKNIK TRANSFORMASI: • Induksi Kimia • Biolistikataumikroinjeksi • Elektroporasi (Elektropermeabilisasi)