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REPUBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA UNIVERSIDAD CENTRO OCCIDENTAL “LISANDRO ALVARADO” DECANATO DE CIENCIAS DE LA SALUD - -PROGRAMA DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE MEDICINA PREVENTIVA Y SOCIAL SECCION MICROBIOLOGIA - -ASIGNATURA: MICROBIOLOGIA MEDICA I. TEMA # 13: Enterobacterias I. Profesores :
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REPUBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELAUNIVERSIDAD CENTRO OCCIDENTAL “LISANDRO ALVARADO”DECANATO DE CIENCIAS DE LA SALUD - -PROGRAMA DE MEDICINADEPARTAMENTO DE MEDICINA PREVENTIVA Y SOCIALSECCION MICROBIOLOGIA - -ASIGNATURA: MICROBIOLOGIA MEDICA I TEMA # 13: Enterobacterias I Profesores: Isabel Alvarez Luisa Morantes YudyAranguren Emilio Martínez Octubre - 2013
OBJETIVOS 1. Caracterizar a los géneros de importancia médica, pertenecientes a la familia Enterobacteriaceae 2. Diferenciar las características estructurales, fisiológicas, antigénicas y factores de virulencia de los géneros de importancia médica de la familia Enterobacteriaceaecon la patogenicidad. 3. Diferenciar los pasos y fundamentos de las pruebas bioquímicas y serológicas para la identificación de los géneros y especies pertenecientes a la familia Enterobacteriaceae
CARACTERÍSTICAS GENERALES DE LAS ENTEROBACTERIAS 1. Morfología variable: Cocobacilos-Bastones alargados 2. Gram negativos 3. La Pared celular, Membrana celular y estructuras internas similares 4. No forman Esporas Sobreviven con facilidad en la naturaleza La mayoría son Microbiota 7. Presencia de Pili 8. Algunos poseen capsula 9.- Algunos poseen flagelos
CARACTERÍSTICAS FISIOLÓGICAS DE LAS ENTEROBACTERIAS • Crecen rápido en medios simples • Moviles o inmoviles • Anaerobios facultativos • Fermentan glucosa • Oxidasa – Negativo
ESTRUCTURA ANTIGÉNICA DE LAS ENTEROBACTERIAS • Antígeno flagelar H (Flagelina) • Antígeno Capsular K (Carbohidrato) • Antígeno Somático O (Lipopolisacárido)
FACTORES DE PATOGENICIDAD DE LAS ENTEROBACTERIAS • Cápsula: Evita Fagocitosis • Adhesinas: Facilita la adherencia a la célula huésped • Endotoxina: Lípido A • Colicinas: Bacteriocinas • Sistema de Secreción Tipo III • Exoenzimas • Hemolisinas
PASOS PARA EL DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO MUESTRA EXTRA INTESTINAL: PUS-LCR EXAMEN DIRECTO: coloración de Gram
PASOS PARA EL DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO MUESTRA INTESTINAL: HECES Medio de transporte Cary-Blair COPROCULTIVO:
PASOS PARA EL DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO MUESTRA INTESTINAL: HECES • MEDIOS DE CULTIVO: • Agar Sangre • Agar Mac Conkey • AgarLevine • Agar Salmonella-Shigella
PASOS PARA EL DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO PRUEBAS BIOQUÍMICAS • Prueba de Oxidasa • Medio de Kliger: Fermentación de Glucosa-Lactosa Producción de Gas Producción de H2S • Prueba de Movilidad • Prueba de Citrato • Prueba del indol PRUEBAS SEROLÓGICAS
PRUEBA DE LA OXIDASA • Permite conocer la presencia o ausencia del “citocromo C” en bacterias y es una característica fisiológica muy utilizada en taxonomía • Se toma una pequeña cantidad de cultivo bacteriano de 24-48 horas de edad y se transfiere a un trozo de papel filtro previamente embebido en n,n-dimetil p-fenilendiamina • Este reactivo es rápidamente transformado a un producto oxidado de color púrpura dentro de 30 segundos en presencia de citocromo oxidasa. Prueba de oxidasa
PRUEBA DE MOVILIDAD • Permite conocer si las bacterias en estudio son móviles o no, eso ayuda en el proceso de clasificación • Se realiza una siembra pinchando el medio con la aguja bacteriológica, y tras incubar 24 h, se observa si se ha producido crecimiento entorno a la zona inoculada.
PRUEBA DEL INDOL • Se cultiva la especie en estudio en un caldo rico en triptofano para que se produzca el Indol • Se agrega al cultivo tres gotas del reactivo de Kovack • (P-dimetil-aminobenzaldehido ) • Se determina la presencia de Indol a través de la formación de un • anillo rojo en la superficie del caldo - +
PRUEBA DEL CITRATO Determina si el organismo bacteriano en cuestión se desarrolla o no en un medio que contiene citrato como única fuente de carbono. - + Medio citrato de Simmons
KLIGLER: Agar triple azucar hierro En el bisel: LACTOSA - + En el Taco: GLUCOSA - +