Práctica experimental

1. Práctica experimental Detección de Compentes de ADN modificados generalmente en alimentos por polimerasa-reacción-cadena (PCR) Introducción

2. Objetivos del experimento • Detección cualitativa de una modificación genética en alimentos. • Detección de modificaciones causadas por- El incio del virus del mosaico de la coliflor (CaMV) - La terminación de la nopalina sintasa (NOS) en agrobacterium tumefaciens Ambas secuencias son muy usadas para regulación de genes extraños a soja y maiz en ingeniería genética

3. Procedimiento paso a paso • Paso: Aislar ADN - Extracción de Soja controlada sin componentes genéticamente modificados (-GMO) - Extracción de examen de alimentos (T)

4. Procedimiento paso a paso 2. Paso: PCR Como control para material vegetal existente en alimentos y para una exitosa PCR: Amplificación de un código genético para una proteina en el fotosistema II con longitud de 455 Bp Como dos secuencias de ADN caraterísticos para una modificación genética en alimentos: Ampliación de un gen a) de CaMV-Iniciación con 203 Bp b) de NOS-terminación con 225 Bp

5. 60``, 94 °C Desnaturalización 60``, 59 °C Recocido 120``, 94 °C Desnaturalización 40 Ciclos 120``, 72 °C Elongación 10`, 72 °C Completar Programa de tiempo de la cicladora

6. Precedimiento paso a paso • paso: Electroforesis y evaluación Detección de productos de PCR por electroforesis en gel de agarosa Tinción de ADN y evaluación del gel ¿Contiene tu examen de alimentos ADN extraño?

7. Resultado esperados PS II secuencia genética(455 Bp) Secuencia NOs (225 Bp) Secuencia CaMV(203 Bp) 1 2 1 2