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GÉNERO Clostridium. INTRODUCCIÓN. ORGANISMOS ANAEROBIOS, G + FERMENTADORES, ESPORULADOS MÁS DE 100 ESPECIES, 20 PATÓ-GENAS (ANIMALES Y HOMBRE) CLASIFICACIÓN TRADICIONAL: BIOQUÍMICA, TOXIGENICIDAD, ENFERMEDAD, SEROLOGÍA, etc. . INTRODUCCIÓN.
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INTRODUCCIÓN • ORGANISMOS ANAEROBIOS, G + FERMENTADORES, ESPORULADOS • MÁS DE 100 ESPECIES, 20 PATÓ-GENAS (ANIMALES Y HOMBRE) • CLASIFICACIÓN TRADICIONAL: BIOQUÍMICA, TOXIGENICIDAD, ENFERMEDAD, SEROLOGÍA, etc.
INTRODUCCIÓN • CLASIFICACIÓN: SECUENCIA ADN, TIPIFICACIÓN ARN RIBOSÓMICO 16 S • DIVERSIDAD EN % DE MOLES DE G+C (¿2 GÉNEROS DISTINTOS?) • TAMBIÉN IMPORTANCIA A NIVEL INDUSTRIAL
INTRODUCCIÓN • HÁBITAT: SUELO Y TRACTO G.I. DE ANIMALES Y HOMBRE • INVASORES Y NO INVASORES DE TEJIDOS ANIMALES • TOLERANCIA AL OXÍGENO VARIABLE (DESDE 0,5 AL 8%) • TEMPERATURA DE CRECIMIENTO DESDE 4ºC HASTA 69ºC
CULTIVO • JARRA DE ANAEROBIOS • REDUCCIÓN CATALÍTICA DEL O2 POR H2 GENERADO JUNTO CON CO2 • MEDIOS COMPLEJOS, pH NEUTRO • POSIBLE “SWARMING” • MEDIOS REDUCTORES: AGAR TIOGLICOLATO, CALDO TAROZZI
PODER PATÓGENO • TOXINAS: HISTOLÍTICAS, ENTEROTOXINAS, NEUROTOXINAS • TOXINAS: ENTRE 22 y 600 KDa • DENOMINACIÓN: LETRAS GRIE-GAS (ESPECÍFICAS PARA CADA ESPECIE DE Clostridium)
Clostridium NO INVASIVOS Cl. tetani, Cl. botulinum
Clostridium tetani • ESPOROS, UBICUOS PRESENTES EN SUELO, MATERIA FECAL, etc. • BACILO DE 0,5-1,7 X 2,1-18 µm • ESPORO TERMINAL DEFORMANTE • ANAEROBIO ESTRICTO, COLONIAS DE 4-6 mm, ESTRECHA HEMÓLISIS
PODER PATÓGENO • TETANOSPASMINA: RESPONSABLE DE CUADRO DE TÉTANOS (TIPO ANTIGÉNICO ÚNICO) • TOXINA TIPO A+B • CODIFICADA POR PLÁSMIDO • TETANOLISINA: HEMOLISINA
TOXINA TETÁNICA • PROTOXINA (150 KDa), TOXINA FORMADA POR DOS CADENAS • CADENA PESADA SE UNE A GT1 DE MEMBRANA NEURONAL • LOCALIZACIÓN EN VESÍCULAS DE TERMINALES NERVIOSOS PRESI-NÁPTICOS
TOXINA TETÁNICA • HIDROLIZA PROTEÍNAS DE ANCLAJE (SINAPTOBREVINAS) DE NEUROTRANSMISORES INHIBI-TORIOS (GLICINA, GABA) • FALTA DE RELAJACIÓN MUSCULAR • CAUSA ESPASMOS MUSCULARES
ENFERMEDAD • TÉTANOS EN HOMBRES (PREVALENTE EL NEONATAL) Y ANIMALES (EQUINOS, RUMIANTES, CERDOS) • DIAGNÓSTICO POR SIGNOS CLÍNICOS • VACUNACIÓN EN BASE A TOXOIDE TETÁNICO
Clostridium botulinum • CAUSA INTOXICACIÓN ALIMENTA-RIA EN HOMBRE Y ANIMALES • ANAEROBIO ESTRICTO, MÓVIL, ESPORAS SUBTERMINALES • ESPORAS ALTAMENTE RESISTEN-TES (CALOR HÚMEDO 30´) • CLASIFICACIÓN EN BASE A PRODUCCIÓN DE TOXINAS: A, B, C, D, E, F y G
Clostridium botulinum • TIPO G (Cl. argentinense) • BACILOS 0,5 A 2 X 1,6 A 22 µm • DIVISIÓN EN GRUPOS POR CA-RACTERÍSTICAS BIOQUÍMICAS • TEMPERATURA ÓPTIMA ENTRE 30 A 37ºC (TIPO E 3,3ºC)
Clostridium botulinum • ORGANISMO PRESENTE EN SUELOS • INGESTIÓN DE ALIMENTOS CONTAMINADOS CON TOXINA • TOXINA PRESENTE EN CADÁVERES EN DESCOMPOSICIÓN (ingestión o contaminación de alimento)
TOXINA BOTULÍNICA • TIPOS: ACCIÓN SIMILAR, DISTINTA POTENCIA Y PROPIEDADES ANTIGÉNICAS • ALGUNOS TIPOS CODIFICADOS POR PLÁSMIDOS O FAGOS • PRODUCIDA COMO PROTOXINA • SEMEJANTE A TOXINA TETÁNICA (ZINC ENDOPEPTIDASAS)
TOXINA BOTULÍNICA • ACCIÓN: UNIÓN NEUROMUSCULAR • SEMEJANTE A TOXINA TETÁNICA (DISTINTOS RECEPTORES) • INHIBE LIBERACIÓN DE ACETILCOLINA • CAUSA PARÁLISIS FLÁCCIDA
ENFERMEDAD Y DIAGNÓSTICO • A, B, E, F: EN SERES HUMANOS • BOVINOS: TIPO D • DEMOSTRACIÓN DE TOXINA EN SUERO, CONTENIDO INTESTINAL Y ALIMENTO SOSPECHOSO • INOCULACIÓN DE MACERADOS A RATONES (PRUEBA DE PROTECCIÓN)
INVADEN Y MULTIPLICAN EN TEJIDOS, PRODUCEN TOXINAS MENOS POTENTES • CONTAMINACIÓN DE HERIDAS, INGESTIÓN DE ESPORAS • Clostridium chauvoei, C. septicum, C. perfringens, C. novyi, etc.
SITIOS DE INFECCIÓN M.O. MÚSCULO HÍGADO INTESTINO C. chauvoei + C. septicum + C. sordelli + C. novyi B + C. novyi D + C. perfringens B + C. perfringens C + C. perfringens D +
Clostridium chauvoei • BACILO GRAM +, LEVEMENTE HEMOLÍTICO, MÓVIL • PRODUCTOS DE FERMENTACIÓN: ác. acético, propiónico y butanol, OLOR CARACTERÍSTICO, ESPORA SUBTERMINAL, MUY RESISTENTE • ANAEROBIO ESTRICTO
Clostridium Chauvoei • REQUIERE CISTEÍNA Y VITAMINAS HIDROSOLUBLES • CARBÓN SINTOMÁTICO, MANCHA • AGUDA, AFECTA A TERNEROS Y OVINOS DE TODA EDAD • DAÑO TISULAR Y MENOR PRODUCCIÓN TOXINA
Cl. chauvoei • ANTÍGENOS: SOMÁTICOS, FLAGELARES Y ESPORAS (3:f:A) • TOXINA : HEMOLÍTICA Y NECROSANTE, DNAsa, FACTOR EDEMATIZANTE, HIALURONIDASA • ANTICUERPOS CONTRA TOXINAS Y COMPONENTES CELULARES
Cl. chauvoei • ORGANISMO EN: CORAZÓN, SANGRE, HÍGADO Y FLUÍDO PERITONEAL • CULTIVO É INDENTIFICACIÓN, TINCIÓN CON AC FLUORESCENTES, INMUNOHISTOQUÍMICA (IHQ)
Clostridium novyi • BACILO GRAM +, ESPORAS OVALES SUBTERMINALES, MÓVIL, NO CAPSULADO • ANAEROBIO ESTRICTO, LICÚA GELATINA, PRODUCE ÁCIDO Y GAS DE VARIOS CARBOHIDRATOS (da ác. propiónico, acético y butírico)
Clostridium novyi • TIPOS TOXIGÉNICOS: A (, , ); B (, ), C (?), D (ß) • TIPOS: DIFERENCIAS BIOQUÍMICAS, PATOGÉNICAS, EPIDEMIOLÓGICAS • TOXINA LETAL Y NECROTIZANTE • HEMOLISINAS, LIPASA, MIOSINASA (ROL INCIERTO)
Clostridium novyi • TIPO A: GANGRENA GASEOSA, “CABEZA HINCHADA” (CARNEROS) • TIPO B: HEPATITIS NECRÓTICA EN OVINOS Y BOVINOS (ENF. NEGRA) • TIPO D (Cl. haemolyticum): HEMOGLOBINURIA BACILAR
Clostridium novyi • CULTIVO Y AISLAMIENTO, TINCIÓN FLUORESCENTE, IHQ, HISTOPATOLOGÍA, etc. • PRESENTE EN HÍGADO DE ANIMALES SANOS
Clostridium perfringens • BACILOS GRUESOS, RECTOS, INMÓVILES, ESPORAS OVALES LEVEMENTE DEFORMANTES • RELATIVAMENTE AEROTOLERANTE • FORMA CÁPSULA EN TEJIDOS Y ALGUNOS MEDIOS, HEMOLÍTICOS, GASÓGENOS, LICÚAN GELATINA
Cl. perfringes • ÁCIDO Y GAS DE CARBOHIDRATOS • HEMÓLISIS CALOR-FRÍO • FERMENTACIÓN “TORMENTOSA DE LA LECHE” (COAGULACIÓN Y DISRUPCIÓN)
Cl. perfringes • CUATRO TOXINAS MAYORES: , , Y : PROTEÍNAS, TERMOLÁBILES, ACCIÓN ENZIMÁTICA, ANTIGÉNICAS, DAN TOXOIDES • HIALURONIDASA, DNAsa, etc.
TIPOS TOXIGÉNICOS TIPO ENFERMEDAD A ENTEROTOXEMIA (corderos, terneros () B DISENTERÍA (corderos) ENTERITIS HEMORRÁGICA (ovejas y cabras) (, , ) C ENTERITIS NECRÓTICA (corderos, lechones, terneros, pollos) STRUCK (ovejas) (, )
TIPOS TOXIGÉNICOS TIPO ENFERMEDAD D ENTEROTOXEMIA (ovinos) “riñón pulposo” (, ) E ENTEROTOXEMIA (corderos y terneros) (, )
TOXINAS MAYORES • α: lecitinasa • β: letal, necrotizante • ε: aumenta permeabilidad intestinal y capilar, letal • : letal • Enterotoxina: citotóxica (en tipos A y C)
DIAGNÓSTICO • CULTIVO É IDENTIFICACIÓN (?), RECUENTO DE M.O. (?) • DETECCIÓN DE TOXINAS: (1) PRUEBA BIOLÓGICA (2) INMUNOENSAYO (ELISA) (3) SONDAS MOLECULARES