Photometrische Methoden: UV/VIS Photometer, Atomabsorptionsspektrometrie Grundlagen 1:

1. Photometrische Methoden: UV/VIS Photometer, Atomabsorptionsspektrometrie Grundlagen 1: - Lichtmessung - spezifische Lichtabsorption, Monochromasie -Zusammenhang: Konzentration und Lichtschwächung das Lambert- Beersche Gesetz Grundlagen 2: -Atomabsorption und Emission - Thermische Dissoziation und Ionisation Messpraxis: -Konzentrationsmessung (Mikroplatte), Kalibration - Absorptionsspektrum (Diondenarray) - Enzymkinetik (Zweistrahlphotometer) - AAS, Interferenzen bei der AAS

2. Lichtmessung Sekundärelektronenvervielfacher - photomultiplier

3. Monochromatisches Licht Interferenzverlauffilter

4. tR - tM t‘R tM tM Wiederholung Der Peak • tR ... Retentionszeit • t‘R ... Netto-Retentionszeit • tM ... Totzeit • w ... BasisbreiteKapazitätsfaktor • k‘ = = tR2 tR1 tM h Detektorsignal wh w tR2 tR1 tM Zeit

5. Konzentration und Lichtschwächung

7. Mikroplattenphotometer Vollproben Blindproben Reagenzienleerwerte Kalibrationsreihen Reines Lösungsmittel (A.demin.) V = konstant!

8. Auswertung (Rechnung) über Kalibrationskurve Position Sample ID Abs Conc y´ = kx + d y' A 1 Kalibrationspunkt 1 1 2 k = 1,80 1,6 linear calibration curve B 1 d = Kalibrationspunkt 2 2 3 -0,2 10 3,4 C 1 8 Kalibrationspunkt 3 3 5 r = 0,9938837 5,2 6 D 1 Factor Abs Conc Kalibrationspunkt 4 4 7 7 4 E 1 Kalibrationspunkt 5 5 9 1 1 1,6 8,8 2 F 1 Copy this formula to column D -0,2 0 G 1 y´ to calculate the values! 0 2 4 6 -0,2 H 1 -0,2

9. DIODENARRAY- SPEKTRALPHOTOMETER Strahlenvereiniger Gitter Linse Linse Wolfram- Probe Lichtquelle Spalt Spalt Verschluß Diodenarray- Deuterium- Detector Lichtquelle (512 Dioden 1,25 nm pro Diode)

10. Wiederholung Flüssigkeitschromatographie Derivatisierung Trennsäule Pumpe Detektor - elektrochemisch - photometrisch Eluent Einspritzventil Derivatisierung

11. Zweistrahlphotometer: Referenzstrahlengang Probenstrahlengang

12. Sichtbares Licht Sonnenspektrum „Fraunhofersche Linien“ Absorptionslinien Emissionslinien

13. Temperatur und Licht

14. Flammenphotometrie, Atomabsorption

15. AAS - Meßbedingungen nicht mehr! Thermische Ionisation Temperatur Thermische Dissoziation noch nicht ... Entropie

16. Flammen, Gasgemische

17. AAS - Atomabsorptionsspektroskopie Brenner

18. DCP und ICP/ICPMS

19. Atomabsorption: Interferenzen Art Abhilfe Chemische I. Flammenwahl, Fällungen Ionisations-I. Strahlungspuffer (CsCl) Spektrale I. Andere Wellenlänge Physikalische I. Nullpunktabgleich, Matrix- abgleich (Viskosität !) Additionsmethode - Spiken