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Tema 5. Replicación. contenido. • La replicaci ón: semiconservativa y bidireccional • Mecanismo y enzimología de la replicación • La iniciaci ón y la horquilla de replicación • Análisis de la frecuencia del vecino más próximo • Replicaci ón del cromosoma de E. coli
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contenido • La replicación: semiconservativa y bidireccional • Mecanismo y enzimología de la replicación • La iniciación y la horquilla de replicación • Análisis de la frecuencia del vecino más próximo • Replicación del cromosoma de E. coli • Replicación de otros genomas circulares • Replicación eucariótica: orígenes y telómeros
generaciones 0 1 1,9 3 P H L P H L Meselson y Stahl, 1958 0 1 2 3
Taylor, Woods y Hughes, 1957
Cairns, 1963
el genoma bacteriano es un DNA circular la replicación mantiene la integridad del círculo
complementariedad y antiparalelismo
actividad correctora de pruebas de la DNA polimerasa III
cadenas continua y discontinua leading: continua lagging: discontinua
PolIII PolI fragmentos de Okazaki primasa ligasa
horquilla de replicación
Análisis de la frecuencia del vecino más próximo (Kornberg, 1957) fidelidad de la replicación
Bidirectional replication of the E. coli chromosome El cromosoma de E. coli es un único replicón (unidad de replicación)
cromosoma de E. coli y detallles de su origen de replicación, oriC
secuencia de oriC 1 50 100 GGATCCTGGGTATTAAAAAGAAGATCTATTTATTTAGAGATCTGTTCTATTGTGATCTCTTATTAGGATCGCACTGCCCTGTGGATAACAAGGATCCGGC R1 AT L M R 13mero 13mero 13mero 101 150 200 TTTTAAGATCAACAACCTGGAAAGGATCATTAACTGTGAATGATCGGTGATCCTGGACCGTATAAGCTGGGATCAGAATGAGGGGTTATACACAACTCAA IHF R2 M 201 250 300 AAACTGAACAACAGTTGTTCTTTGGATAACTACCGGTTGATCCAAGCTTCCTGACAGAGTTATCCACAGTAGATCGCACGATCTGTATACTTATTTGAGT R4 FIS R3
iniciación de la replicación en E. coli DnaA reconoce oriC abre los 13meros entra helicasa DnaB
cambio de la topología del cromosoma durante la replicación