Nutrición y Características de crecimiento

1. Nutrición y Características de crecimiento

2. Uso de nutrientes Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

3. Composición química de los microorganismos Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

4. 1- Fuente de energía luz • química • 2- Macronutrientes • H K • O Mg • C Na • N 95% Ca • S Fe • P • 3- Micronutrientes (elementos traza) • Co, Zn, Mo, Cu, Mn, Ni, Se, W • 4- Factores de crecimiento • Vitaminas • Purinas y pirimidinas • Aminoácidos Nutrientes Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

5. Macronutrientes Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

6. Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

7. Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

8. Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

9. Condiciones para el crecimiento microbiano agua fuente de energía fuentes de C, N, otros elementos micronutrientes, factores de crecimiento Medios de cultivo Nutrientes Crecimiento temperatura pH luz aireación actividad de agua potencial redox Condiciones de cultivo Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

10. Factores de crecimiento • Componentes celulares indispensables que no puede sintetizar el microorganismo • Aminoácidos • Síntesis de proteínas • Purinas y pirimidinas • Síntesis de ácidos nucleicos • Vitaminas • Totalidad o parte de factores coenzimaticos Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

11. Factores de crecimiento • Vitaminas • Biotina: Carboxilacion (fijación de CO2) • Piridoxina (B6): Metabolismo de los aminoácidos • Riboflavina (B2): Transporte de electrones • Tiamina: Trasferencia de grupos aldehído Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

12. Factores de crecimiento • Vitaminas • Riboflavina (B2): Clostridium, Candida • Cianocobalamina (B12): Streptomyces, Pseudomonas • Vitamina C: Gluconobacter, Corynebacterium • Vitamina D: Saccharomyces Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

13. Hierro • Casi todos los microorganismos necesitan hierro para vivir indispensable en muchos proceso enzimáticos • Poca disponibilidad de Fe • Captación de hierro por sideróforos • Sintetizan sideróforos cuando hay poco Fe en el ambiente Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

14. Aislamiento Aislar: Es separar un tipo de microorganismo a partir de una población mixta. En hábitats naturales, raramente encontramos a los microorganismos en cultivo puro Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

15. Aislamiento directo: Se logra directamente a partir de una muestra cuando el o los microorganismos están en una proporción adecuada., se realiza por estrías (agotamiento) con o sin dilución previa de la muestra (suelo, alimentos), en medio sólido Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

16. Aislamiento por enriquecimiento: Cuando el microorganismo que se desea aislar e identificar se encuentra en baja proporción en la muestra, se incluye una primera etapa que consiste en sembrar la muestra en medio líquido. Luego de varios pasajes se aísla por el método de estrías. Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

17. Medios de cultivo • Un medios de cultivo es una preparación liquida o solida utilizada para el crecimiento, transporte o mantenimiento de organismos • Imprescindibles para aislar e identificar microorganismos • Evaluar la sensibilidad antibiótica • Analizar agua y alimentos Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

18. Clasificación de los medios de cultivo Según su naturaleza física * líquidos * sólidos - solidificante: agar-agar, silico-gel *semi-sólidos Según su composición * definidos o sintéticos: composición química conocida * no definidos o complejos: composición química no definida, enriquecidos con peptonas, extracto de carne, de levadura, de suelo, sangre Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

19. Medios sintéticos o definidos • CO2 como fuente de carbono, incorporado como carbonato o bicarbonato • Nitrato o amonio, sulfato, fosfato y diversos minerales • Utilizados principalmente para autotrofosfotolitotroficos Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

20. Medios complejos • Se utilizan cuando se desconocen as necesidades nutricionales particulares de un microorganismo • Las peptonas son hidrolizados de proteínas obtenidos de carne, caseína, harina de soya • Sirven como fuente de carbono, energía y N • Caldo nutritivo • MacConkey • Triptona y soya Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

21. Según su uso en el laboratorio • Selectivos o inhibitorios: medios que contienen, además de los nutrientes, ciertas sustancias que inhiben el desarrollo de algunos microorganismos permitiendo el crecimiento de otros o cuya composición permite el desarrollo de un grupo determinado • Ej.agar-antibióticos; agua, sales, luz, para algas, medios con NaCl superior a la concentración fisiológica Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

22. Según su uso en el laboratorio • Diferenciales: medios que contienen indicadores para diferenciar los distintos tipos de microorganismos que puedan crecer en él • Mac Conkey azúcar fermentable: lactosa, indicador:rojo neutro Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

23. Agar • Originalmente los cultivos eran líquidos • Robert Koch 1881 • Polímero sufaltado extraído de algas rojas • Buen agente solidificante • La mayoría de los microorganismos no pueden degradarlo Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

24. Cultivo en medio líquido • Habitualmente se realiza en tubos o en matraces. El crecimiento se puede manifestar por enturbiamiento, por formación de velo o película, o por sedimento. • Cultivo en medio sólido • Puede ser en tubos o placas • a) Tubos con agar inclinado. Para sembrarlos, se mueve el ansa o la punta suavemente sobre la superficie del agar con un movimiento en zigzag desde el fondo hasta la parte superior, cuidando de no dañar el agar. • b) Tubos sin inclinar. Se siembran introduciendo una punta en el centro del agar. También se llama siembra por picadura. • c) Siembra en placas. Puede ser en superficie (por estrías o bañado) o incorporada (mezclando el inóculo con el agarsemifundido) Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

25. Medios de cultivo Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

26. Agar sangre Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

27. Agar sangre Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

28. Escherichiacoli en medio Luria-Bertani LB Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

29. Agar EMB Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

30. Penicillum en medio Agar dextrosa Sabouraud Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

31. Sporothrixschenckii en medio BHI Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

32. S. schenckii en agar dextrosa Sabouraud Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

33. Agar MacConkey • En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora Grampositiva. Por fermentación de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. • Esto produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorción en las colonias, y la precipitación de las sales biliares. • Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

34. Helicobacterpylori en agar Mac Conkey Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

35. Cultivo puro • Las colonias se describen por examen macroscópico en función del tamaño, la forma, el borde, la elevación, la transparencia y el color. Esto resulta a veces muy útil en la identificación • A partir de colonias aisladas en medio de cultivo se realiza un examen microscópico que debe mostrar células razonablemente semejantes respecto al Gram y a la morfología. • Las colonias aisladas deben aislarse nuevamente en medio no selectivo por el método de estrías. Esto se conoce como reaislamiento. Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

36. Método de dispersión en placa Incubación Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

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38. División celular: fisión binaria Gemación, ej. levaduras Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

39. Crecimiento de un microorganismo en medio de cultivo liquido 1- Fase de latencia 2- Fase exponencial 3- Fase estacionaria 4- Fase de muerte Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

40. Fase de latencia (lag) • Célula sintetiza nuevos componentes, proceso activo • Diferencias del nuevo medio • Esta fase varia considerablemente • Cultivo viejo • Refrigerado • Cambios en la composición química Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

41. Fase exponencial o logaritmica (log) • Los organismos crecen y se dividen hasta el máximo posible • En esta fase, la población es mas uniforme, química y fisiológicamente • El crecimiento exponencial es un crecimiento equilibrado Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

42. Fase estacionaria • Cuando la población es de aproximadamente de 1x109 • Se establece un equilibrio entre la división y la muerte de las células • Una población entra en estado estacionario por varias razones • Limitación de nutrientes • Disponibilidad de O2 • Acumulación de residuos tóxicos • Respuesta a estrés nutricional Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

43. Fase de muerte • Disminución de células viables • Al igual que el crecimiento exponencial, la muerte bacteriana es logarítmica • La muerte microbiana se define como la perdida irreversible de la capacidad de multiplicarse • La velocidad de muerte puede disminuir después de reducir drásticamente la población Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

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45. Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

46. Factores del ambiente • físicos: temperatura, gases, pH, presión osmótica • químicos: nutrientes, sustancias antimicrobianas • biológicos: otros microorganismos, vegetación, afectan las actividades microbianas • Los distintos factores actúan simultáneamente y resulta difícil el análisis integrado de los efectos. Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

47. Sicrófilos- rango: < 0-20°C, óptimo < 15oC organismosmarinos, algas: Chlamydomonasnivalis (nieverosada), bacterias: Pseudomonas, Flavobacterium membranacontiene alto % de ácidosgrasosinsaturados Sicrótrofos o Sicrófilosfacultativos - rango: 0-35°C, óptimo 20-30oC Pseudomonas - crecen en el refrigerador Mesófilos- rango: 15-45° C, óptimo: 30-40°C la mayoría de los microorganismos (del suelo, aguas, patógenos) Temperatura Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

48. Temperatura • Termófilos - rango: 40-70°C, óptimo de 55-65oC • membranacontiene alto % de ácidosgrasossaturados • enzimasestables al calor • Bacillus stearothermophilus, organismos de compostaje • Hipertermófilos- rango: 80-113°C, óptimo > 90oC • Pyrococcus, Pyrodictium(aguastermales) Bacteriologia y Micologia Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo.

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