Méthode

1. Les cellules hématopoïétiques ne sont pas des éléments majeursde la régulation de l’inflammation intestinale 1 • Méthode • Souris SAMP1/Yit développant une colite spontanée et souris conventionnelles ne déclenchant pas de lésions intestinales (souris AKR) • Irradiation des souris SAMP1/Yit et greffe de moelle osseuse (MO)de souris AKR • Irradiation des souris AKR et greffe de MO de souris SAMP1/Yit • Résultats • L’irradiation des souris SAMP1/Yit greffées avec de la MO de souris AKRne modifie pas la survenue de la colite • L’irradiation des souris AKR et la greffe de MO de souris SAMP1/Yitne perturbe pas l’homéostasie intestinale Ces résultats montrent que, dans ce modèle, les cellules périphériques sanguinesjouent un rôle mineur dans la physiopathologie des colites et que le systèmeimmunitaire muqueux intestinal est localement à l’origine des lésions inflammatoires AGA 2004 - Olson TS et al. Gastroenterology 2004;126(suppl 2):A3.

2. PPARg et régulation de l’inflammation intestinale :un rôle particulier des cellules épithéliales 2 9 8 7 • Méthode • Le PPARg est un récepteur nucléaire exprimé essentiellement dans le côlon qui possèdedes fonctions anti-inflammatoireset antinéoplasiques • L’expression de PPARg est diminuée au coursde la RCH • Les souris SAMP1/Yit développent des lésions iléales spontanées • Les souris SAMP1/Yit sont traitées pendant4 semaines avec un activateur de PPARgà la dose de 60 mg/kg/j • Comparaison de l’efficacité du traitementpar rapport aux corticoïdes • Résultats • Le traitement des souris SAMP1/Yit diminue significativement les lésions inflammatoires intestinales via l’expression de PPARgpar les cellules épithéliales • Dans ce modèle, le traitement ciblé sur PPARg est aussi efficace que les corticoïdes 6 5 Score total d’inflammation 4 3 2 1 0 Rosiglitazone 60 mg Rosiglitazone 10 mg Véhicule Dexaméthasone 100 g AGA 2004 - Sugawara K et al. Gastroenterology 2004;126(suppl 2):A281.

3. L’inflammation est un facteur favorisant la survenue de cancer colorectal Sans Sans 1,0 1,0 Légère 0,8 0,8 Légère Modérée Probabilité(libération de cancer) Probabilité(libération de dysplasie) 0,6 0,6 Sévère 0,4 0,4 Modérée 0,2 0,2 Sévère p = 0,0001 0,0 p = 0,0001 0,0 Âge (jours) Âge (jours) 0 100 200 300 400 500 600 0 200 300 400 500 100 600 3 • Méthode • Induction d’une inflammation chez la souris par administration d’anti-CD3 • Étude des taux de -cathénine nucléaire chez des souris exprimant ou n’exprimantpas le TNF ou les récepteurs du TNF (TNFR1 et TNFR2) • Étude de la survenue de cancer colique ou de dysplasie en fonction de l’intensitédes lésions inflammatoires dans le modèle de colite expérimentale spontanéechez la souris invalidée pour l’IL-10 • Croisement de souris développant des adénomes intestinaux spontanés (souris Min)et de souris invalidées pour l’IL-10 • Résultats • Le TNF et ses deux récepteurs TNFR1 et TNFR2 exprimés par les cellules épithélialessont impliqués dans la régulation du taux de -cathénine nucléaire, puissant régulateurde la différenciation et de la prolifération des cellules • L’inflammation augmente les dysplasies et les cancers • Augmentation des tumeurs intestinales chez les animaux Min+/-/IL-10-/- AGA 2004 - Tang Y et al. Gastroenterology 2004;126(suppl 2):A3. AGA 2004 - Huang EHN et al. Gastroenterology 2004;126(suppl 2):A421.

4. Les mutations de Nod2 régulent l’expression des défensines produitespar les cellules de Paneth 4 • Méthode • 68 maladies de Crohn (MC) et 12 témoins non inflammatoires ont été inclus dans l’étude • Biopsies iléales et coliques • Génotypage des 3 principales mutations de Nod2 (21 MC avec mutation) • Quantification par PCR en temps réel de l’ARNm des défensines HD-5et HD-6 et des médiateurs de l’inflammation TNF et IL-8 • Résultats • Les concentrations de HD-5 et HD-6 sont très faibles dans le côlon • Dans l’iléon, les quantités d’ARNm de HD-5 et HD-6 sont plus faiblesau cours de l’inflammation et chez les patients présentant des mutationsde Nod2 • En revanche, les mutations de Nod2 ne sont pas associées à des variations de la production de cytokines inflammatoires AGA 2004 - Wenkamp J et al. Gastroenterology 2004;126(suppl 2):A157.

5. Régulation de la douleur et de l’inflammation intestinale :nouvelles pistes thérapeutiques Souris SCID (n = 11) Souris SCID reconstituée (n = 5) * 3,5 Réponse à 8 semaines après reconstitution 2,5 * AUC 1,5 * * p < 0,05versus souris SCID reconstituée 0,5 Pression mmHg 0 30 60 5 • Méthode • Étude, au cours de la maladie de Crohn (MC) et de la RCH, de l’expressiondes récepteurs  pour les opioïdes (MOR) • Étude dans les modèles de colite expérimentale de l’expression et du rôle anti-inflammatoire du récepteur pour le cannabinoïde B2 (CB2) chez la souris • Étude par barostat du rôle analgésique des cellules sanguines périphériquesau cours des colites expérimentales chez la souris immunodéficiente, avantet après reconstitution avec des cellules sanguines • Résultats • Les cellules sanguines expriment MOR et CB2. Cette expression augmenteau cours de l’inflammation • MOR et CB2 ont une fonction anti-inflammatoire • La perception de la douleur est réduite par le transfert de cellules sanguineschez la souris AGA 2004 - Philippe D et al. Gastroenterology 2004;126(suppl 2):A152. AGA 2004 - Verma-Gandhu M et al. Gastroenterology 2004;126(suppl 2):A161.

6. Le PPARg est le récepteur fonctionnel du 5-ASA 6 • Méthode • Étude de liaison entre le PPARg et le 5-ASA • Étude moléculaire des interactions entre le PPARg et le 5-ASA • Comparaison de l’efficacité du 5-ASA dans des modèles de colite expérimentale chez des souris exprimant ou n’exprimant pas le PPARg • Étude des fonctions antinéoplasiques du 5-ASA en présenced’un antagoniste de PPARg • Résultats • Le 5-ASA est un nouveau ligand de PPARg • Le 5-ASA interagit directement avec PPARg avec une bonne affinitéà des concentrations thérapeutiques • En l’absence d’expression de PPARg, le 5-ASA n’a pas d’effetanti-inflammatoire colique • En présence d’antagonistes de PPARg, l’effet antinéoplasique du 5-ASAest aboli AGA 2004 - Rousseaux C et al. Gastroenterology 2004;126(suppl 2):A129.

7. 0,003 0,0025 0,002 hGR ARNm 0,0015 0,001 0,0005 0 Corticosensibilité Maladie inactive Corticorésistance Maladie inactive Corticosensibilité Maladie active Corticorésistance Maladie active Contrôle L’augmentation de l’expression du récepteur b pour les glucocorticoïdes (GRb)est associée à la corticorésistance des patients atteints de la maladie de Crohn (MC) 7 • Rationnel • Le GR bloque l’action des corticoïdes en empêchant la liaison du GR activéà l’élévation de réponse aux glucocorticoïdes • Méthode • 42 patients atteints de MC et 17 témoins sains • Quantification par PCR en temps réel de l’ARNm de GR et GRdans les cellules mononucléées sanguines (PBMC) • Analyse en fonction de la réponse ou de la résistance au traitement et en fonctionde l’intensité de l’inflammation évaluée par la production d’IL-18 • Résultats • La corticorésistance est associée à des taux de GR dans les PBMC significativement plus élevés par rapport aux patients corticosensibles • Les taux de GR sont significativement plus hauts lorsque la maladieest active, avec une corrélation entre les taux d’ARNm de GR et d’IL-18 AGA 2004 - Towers R et al. Gastroenterology 2004;126(suppl 2):A214.

8. Smad7 : une nouvelle cible thérapeutique pour les MICI 8 • Méthode • Induction d’une colite chez la souris par administration intrarectale de trinitrobenzène sulfonyle (TNBS) • Traitement des animaux 2 jours plus tard par l’administration par gavage d’antisens de Smad7 • Évaluation des lésions inflammatoires à J7 et quantification des cytokines • Résultats • Amélioration des lésions inflammatoires coliques chez les animaux traités • Diminution de la production de cytokines impliquées dans l’inflammation IFN et IL-12 • Smad7 est une nouvelle cible thérapeutique dont le but est de rétablirla régulation physiologique de la réponse immunitaire intestinale AGA 2004 - Boirivant M et al. Gastroenterology 2004;126(suppl 2):A279.

9. Le curcuma : un puissant anti-inflammatoire dans les colites expérimentales 9 • Méthode • Le curcuma est un composé isolé de la plante curcuma longa L. • Essai thérapeutique en lavement pendant 7 jours dans le modèle de colite induite par l’administration intrarectale de TNBS • Évaluation sur la mortalité, la sévérité de l’inflammation et la productionde médiateurs de l’inflammation • Résultats • Le curcuma diminue la mortalité et prévient la survenue de lésions inflammatoires • Cette action anti-inflammatoire est médiée par une diminutionde la production de cytokines inflammatoires TNF et IL-1et de chimiokines MIP-2 100 80 60 2 % de curcuma Régime normal Jours 40 0 1 2 3 4 5 6 7 AGA 2004 - Kiela PR et al. Gastroenterology 2004;126(suppl 2):A287.

10. OPC-6535 : de la paillasse au lit du patient 10 • Méthode • OPC-6535 est un nouvel anti-inflammatoire oral dérivé d’une thiazole • Évaluation anti-inflammatoire in vivo dans des modèles de colite expérimentale chez l’animal : administration intrarectale de TNBSchez la souris et prise orale de DSS chez le rat • Résultats • Dans ces 2 modèles expérimentaux, OPC-6535 a une action thérapeutique importante diminuant de plus de 50 % les lésions coliques et permettant de limiter l’incidence de la diarrhée • Ces résultats encourageants sontà l’origine d’essais thérapeutiques en cours chez les patients atteints de MC et de RCH Surface des ulcérations 5 * p < 0,01 4 * 3 Surface des ulcérations (cm2) * * 2 1 0 Véhicule (n = 23) 0,3 (n = 24) 1,0 (n = 24) 3,0 (n = 24) OPC-6535 (mg/kg/j) AGA 2004 - Nagamoto H et al. Gastroenterology 2004;126(suppl 2):A285&A286.