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RNA Interference(RNAi). RNA Interference(RNAi). 通过双链 RNA 的介导特异性地降解相应序列的 mRNA, 从而导致转录后水平的基因沉默。. 1990, Jorgensen et al, 材料:牵牛花 目的:得到紫色更深的花 方法:构建强启动子的苯基苯乙烯酮合酶表达载 体,导入牵牛花 结果:花变得更白。 分析:内源和外源的苯基苯乙烯酮合酶基因的表 达都被抑制。称之为共抑制( co-suppression ).
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RNA Interference(RNAi) • 通过双链RNA的介导特异性地降解相应序列的mRNA, 从而导致转录后水平的基因沉默。
1990, Jorgensen et al, • 材料:牵牛花 • 目的:得到紫色更深的花 • 方法:构建强启动子的苯基苯乙烯酮合酶表达载 体,导入牵牛花 • 结果:花变得更白。 • 分析:内源和外源的苯基苯乙烯酮合酶基因的表 达都被抑制。称之为共抑制(co-suppression)
1995, Guo Su et al • 材料:线虫 • 目的:消除线虫第一次分裂的不对称性 • 方法:利用反义技术抑制par-l的表达。同时也注入顺义RNA。 • 结果:两种方法都抑制par-l基因。 • 分析:无法解释。
1998,Fire et al • 材料:线虫 • 目的:同上 • 方法:注射经过纯化的由T4和T7 RNA聚合酶体外转录得到的ss-RNA; 注射经过纯化后的ds-RNA • 结果:前者只引起微弱的抑制作用;后者却得到比前者高两个数量级的抑制效果。 • 分析:RNA Interference(RNAi), Nature, 1998, 391:806-811
重要特征: • RNAi是转录后水平的基因沉默机 (PTGS,posttranscriptional gene silencing)。 只对exon有效,对intron和promoter无效;尚 未发现对染色体DNA有影响。 • RNAi具有很高的特异性。
RNAi具有很高的效率,表型可以达到缺失突变体的效果。可能有一信号放大体制。类似PCR。 RNAi具有很高的效率,表型可以达到缺失突变体的效果。可能有一信号放大体制。类似PCR。 • RNAi的效应可以穿过细胞界限,在不同细胞间长距离传递和维持。
RNAi是生物体最原始的免疫机制?nc RNAs对于人类是非编码mRNA,但有可能是病源微生物的mRNA? • 45%的人类基因组由入侵的转座子/病毒残留基因组成,这一整合过程到底有多长?如何传播和稳定? • 目前究竟能在人类基因组中找到哪些病源微生物的残留同源区域?是不是容易医治的病源微生物其基因组已被人类兼收并蓄? • HIV、HBV等的基因组没被人体人类基因组接纳之前所有努力都是不费? • 寻找整合了HIV基因组的个体。