1 / 21

UPC II – Microbiologia

UPC II – Microbiologia. Aula prática laboratorial 1. 2013/2014. Maria José Correia mariacorrei@gmail.com. 16-09-2013. Sumário L1:. Apresentação sucinta do programa das aulas laboratoriais; Segurança no Laboratório Noções de desinfeção, assepsia e esterilização Introdução à microscopia.

anka
Download Presentation

UPC II – Microbiologia

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. UPC II – Microbiologia Aula prática laboratorial 1 2013/2014 Maria José Correia mariacorrei@gmail.com 16-09-2013

  2. Sumário L1: • Apresentação sucinta do programa das aulas laboratoriais; • Segurança no Laboratório • Noções de desinfeção, assepsia e esterilização • Introdução à microscopia UPC II - Microbiologia 2013/2014

  3. Programa: UPC II - Microbiologia 2013/2014

  4. Segurança no laboratório: • Atitudes: • Usar o senso comum (a maioria dos acidentes de laboratório começa com algo simples); • Estar consciente – conhecer os reagentes antes de os usar (ler os rótulos tomar as medidas necessárias); • Estar protegido – conhecer as práticas e equipamentos que podem aumentar a proteção (máscaras, luvas, etc.). UPC II - Microbiologia 2013/2014

  5. Segurança no laboratório: • Regras gerais: • Nunca COMER, BEBER, FUMAR, aplicar lentes de contacto ou cosméticos! • Nunca cheirar soluções ou reagentes • Nunca pipetar com a boca • Lavar imediatamente a pele após contacto com culturas/químicos UPC II - Microbiologia 2013/2014

  6. Segurança no laboratório: É especialmente perigoso correr ou brincar em ambientes laboratoriais UPC II - Microbiologia 2013/2014

  7. Segurança no laboratório: • Bancada: • As bancadas de trabalho devem ser mantidas organizadas e limpas • Identificar todo o material utilizando para isso marcadores de vidro apropriados • Manter os bicos de Bunsen e as lamparinas acesas apenas enquanto são necessários • Os lixos devem ser perfeitamente identificados (contaminado e limpo) • O material de vidro estalado ou partido deve ser imediatamente rejeitado • Colocar as pipetas de vidro sujas em contentores de plástico devidamente identificados para esse fim UPC II - Microbiologia 2013/2014

  8. Segurança no laboratório: • Proteção pessoal: • Usar bata e manter os cabelos compridos apanhados; • Não usar sapatos abertos, chinelos, sandálias; • Usar a hotte e a CSB sempre que necessário; • Quando abandonar o laboratório retirar a bata e lavar todas as zonas de pele que possam ter estado expostas a substâncias tóxicas/patogénicas. UPC II - Microbiologia 2013/2014

  9. Instruções gerais: • Ler os protocolos antes de cada aula prática • Desinfetar as mãos e a bancada • No início da aula examinar/registar os resultados das experiências realizadas na aula anterior • Seguir atentamente as instruções fornecidas pelo docente antes de executar o trabalho proposto • Depois de terminar o trabalho de cada aula arrumar a bancada onde trabalhou. Colocar o lixo e o material inoculado nos locais apropriados • Desinfetar a bancada (álcool) e lavar as mãos com sabonete antes de deixar o laboratório UPC II - Microbiologia 2013/2014

  10. Assepsiaausência de microrganismos • Manutenção das condições de assepsia: • limpar e desinfetar a bancada de trabalho • lavar e desinfetar as mãos no início e fim da aula • usar bata limpa (sempre) • esterilizar o material a utilizar • trabalhar à chama ou na câmara de fluxo laminar UPC II - Microbiologia 2013/2014

  11. Técnicas de esterilização • Principais agentes anti-microbianos • Métodos físicos • Calor • Radiações • Filtros • Métodos químicos • desinfetante • antisséticos UPC II - Microbiologia 2013/2014

  12. Esterilização pelo calor • Calor seco • Oxidação e desnaturação das proteínas • Combustão da matéria orgânica • Aplicações: • Materiais resistentes a altas temperaturas (ansas, vidros não calibrados, etc.) • Equipamento • Estufas a 160-180ºC (2 horas) • Equipamento de incineração ou queima direta UPC II - Microbiologia 2013/2014

  13. Esterilização pelo calor • Calor húmido • Coagulação das proteínas; destruição de células vegetativas e esporos • Aplicações: • Meios de cultura e soluções aquosas • Materiais pouco resistentes ao calor (plásticos resistentes, etc.) • Equipamento/técnicas: • Autoclave (atmosfera de vapor de água sob pressão) • Pasteurização (aquecimento do produto por um período de tempo que varia com produto a pasteurizar e a temperatura utilizada) • Tindalização (aquecimento a 65-100ºC durante 30-60 min, intercalado com incubação a 35ºC – ciclos que podem repetir-se até 3 dias) UPC II - Microbiologia 2013/2014

  14. Esterilização por filtração Prescott, Microbiology, 5th edition • Remoção de microrganismos em membranas filtrantes com poro nominal inferior às dimensões bacterianas (0,2 µm) • Aplicações: • Produtos termo lábeis, voláteis ou sensíveis a altas pressões (ex: antibióticos e vitaminas) • Equipamento/técnicas: • Filtração com funil (grandes volumes) • Filtração com seringa (pequenos volumes) • Filtração de ar em câmaras de fluxo laminar UPC II - Microbiologia 2013/2014

  15. Esterilização por radiações • Raios X e : • Poder ionizante e elevado poder de penetração - para objectos volumosos • Raios UV: • Menor energia, radiação pouco penetrante usada para esterilização de superfícies • Ultra-sons (radiação de alta frequência) • Destruição mecânica de células • Raios catódicos (feixes de electrões de intensidade e velocidade elevadas): • Esterilização de material cirúrgico UPC II - Microbiologia 2013/2014

  16. Esterilização por agentes químicos • Agentes bactericidas ou bacteriostáticos (só eliminam as formas vegetativas e não as formas esporuladas) • Sabões, sais biliares e fenóis (alteração da tensão superficial) • Cloro (oxidação de compostos celulares) • Álcoois (desnaturação de proteínas e solubilização de lípidos) Detergentes germicidas: misturas comerciais de vários agentes bactericidas e bacteriostáticos UPC II - Microbiologia 2013/2014

  17. Ocular Tubo Revólver Objetiva Coluna Platina Diafragma Condensador Fonte de luz Pé Parafuso Micrométrico Parafuso Macrométrico Introdução à microscopia Prescott, Microbiology, 5th edition • Microscópio ótico • instrumento usado para ampliar • constituído por uma parte mecânica e uma parte ótica UPC II - Microbiologia 2013/2014

  18. Microscópio ótico - Parte mecânica • Pé ou Base – suporta/estabiliza o microscópio • Braço ou Coluna – peça fixa à base, serve de suporte a outros constituintes do microscópio. • Tubo ou Canhão –suporta os sistemas de lentes da extremidade superior • Platina – peça paralela à base, onde é colocada a preparação a observar, possuindo no centro um orifício que permite a passagem dos raios luminosos concentrados pelo condensador. • Parafuso Macrométrico – engrenagem indispensável para fazer a focagem. • Parafuso Micrométrico – elemento que permite movimentos de amplitude reduzida para completar a focagem. • Revólver – peça giratória adaptada à zona inferior do tubo que suporta as objetivas de diferentes ampliações (ex: 10x, 40x, 100x) UPC II - Microbiologia 2013/2014

  19. Microscópio ótico - Parte ótica • Sistema de Oculares e Sistema de Objetivas – o conjunto de lentes que permitem a ampliação do objecto (a ampliação dada ao microscópio é igual ao produto da ampliação da objetiva pela ampliação da ocular) • Fonte Luminosa • lâmpada (iluminação artificial), • espelho que reflita a luz solar (iluminação natural). • Condensador – conjunto de lentes convergentes que distribui regularmente, sobre o campo visual do microscópio, a luz emitida pela fonte luminosa. • Diafragma –regula a intensidade luminosa no campo visual do microscópio UPC II - Microbiologia 2013/2014

  20. Utilização do microscópio • Ligar a lâmpada • Ajustar distância interpupilar (oculares) • Colocar a lâmina na platina e focar em objetiva 10x • Ampliar a imagem, retificar focagem e observar • Utilizar óleo de imersão (1 gota) apenas para a objetiva 100x • Limpar a objetiva com solução apropriada • Quando terminar observação: • Regular a luz para o mínimo e desligar a lâmpada • Voltar sempre para a objetiva de menor ampliação • Cobrir o microscópio UPC II - Microbiologia 2013/2014

  21. Objetivos L1: • O aluno deve ser capaz de: • seguir todas as regras de segurança referidas; • definir desinfeção, assepsia e esterilização; • enumerar os principais processos de esterilização de material e meios de cultura; • descrever as situações específicas em que deve ser utilizado um determinado método de esterilização; • descrever o modo de atuação dos métodos de esterilização; • utilizar o microscópio da forma mais correta. UPC II - Microbiologia 2013/2014

More Related