Myélogramme et Hémogramme Normal

1. Myélogramme et Hémogramme Normal C.Roumier, oct 2011

2. COMPTE RENDU MINIMUM D’UN HÉMOGRAMME (ANDEM 1998) Analyse biologique la plus prescrite en france 2 : Formule Leucocytaire 1 : Numération Globulaire Leucocytes Ht GR VGM CCMH TCMH NP Granulocytes neutrophiles Granulocytes éosinophiles Granulocytes basophiles Lymphocytes Monocytes Autres types cellulaires +/- morphologie des éléments nucléés

3. Hémogramme : analyse biologique comprenant 3 groupes de données • La numération des GR associée à la détermination de la concentration en Hb et des constantes erythrocytaires VGM, IDR, CCMH, TCMH. • La numération et la formule leucocytaire • La numération plaquettaire • Un prélèvement unique de sang • un automate “compteur automatique de cellules ” : • hémogramme automatisé. • Très bonne reproductibilité • Rapidité d’obtention des résultats • Abaissement du coût de l’analyse Vérification manuelle au microscope : Présence d’ anomalies réalisation d’un frottis sanguin Interprétation au microscope, après coloration MGG Renseignements qualitatifs : établissement d’une formule « manuelle », Description d’anomalies morphologiques des cellules normales ( hématies, leucocytes, plaquettes),et identification de cellules anormales.

4. Granulocytes Lymphocyte Monocyte Plaquette Blastes Hématie

5. Anisocytose : hétérogénéité de taille des GR (défini par un IDC >15%), anisocytose plaquettaire • Hypochromie : GR pâles. S’accompagne d’un TCMH <27 et un CCMH <32 • Polychromasie : présence d'hématies de couleur variable (anémies régénératives, dysérythropoïèses, nouveaux-nés) • Poïkilocytose : hématies de forme et de taille très variée • Schizocytes : Présence de globules rouges fragmentés provenant d'un obstacle sur le parcours sanguin (SHU), demande spécifique recherche de schizocytes. • Hématies en cible : Hématies au contenu clair avec renforcement central : aspect de cible • Hématies en rouleaux : dysglobulinémie , anomalie de viscosité sanguine • Corps de Howell-Jolly : résidu nucléaire de taille variable qui se voit sous la forme d’une inclusion de taille variable rouge foncée (normalement éliminé par la rate splénectomie (ou asplénie fonctionnelle) • Sphérocytes: globule rouge de petite taille apparente avec disparition de la zone claire centrale. (sphérocytose héréditaire, AHAI) • Dacryocytes: hématies en forme de larme, ou de poire. fibroses médullaires • Drépanocytes : hématies allongées en forme de faux, accès drépanocytaires • Hématies ponctuées : contenant de nombreuses petites ponctuations sombres, basophiles (témoin d'une anomalie de synthèse de l'hémoglobine)

6. Schizocytes Anisochromie CHJ Plasmodium

7. INDICATIONS DE L'HÉMOGRAMME (1) 1) Signes généraux évoquant une diminution d'une ou plusieurs lignées sanguines : • Syndrome anémique : pâleur et/ou signes d'anoxie (palpitations, dyspnée…) • Syndrome hémorragique aigu, purpura, ecchymoses ou hématomesanormaux… • Syndrome infectieux inexpliqué, persistant, récidivant ou grave. • Une atteinte de l'état général : asthénie, anorexie, amaigrissement, fièvre au long • cours, douleurs osseuses…

8. 2) Des signes évoquant une augmentation d'une ou plusieurs lignées sanguines : • Érythrose cutanée ou prurit à l'eau chaude • Thromboses artérielles ou veineuses, • Syndrome tumoral : adénopathies, splénomégalie. 3) Certaines situations systématiques ou bilans : • Grossesse • Médecine du travail • Médecine de dépistage • Bilans pré-opératoires • Bilans pré-thérapeutiques • Suivis thérapeutiques

9. 4) Urgence • Un état de choc • Une pâleur intense • Une angine ulcéro-nécrotique ou résistante aux antibiotiques • Une fièvre élevée après prise de médicament, surtout après chimiothérapie • Traitement antimitotique • Une fièvre résistante aux antibiotiques • Un purpura pétéchial avec syndrome hémorragique

10. Production / j (en milliard) Nombre total (en milliard) Production / sec Durée de vie GR PN PLQ 20 000 500 1 000 120 j 24 h 7 j 200 50 100 2 500 000 625 000 1 250 000 HEMOGRAMME NORMAL  Cellules sanguines : -> terminales -> éléments fonctionnels de lignées -> nombre très élevé et durée de vie courte => nécessité de production importante et continue

11.  Volume sanguin : de 250 ml chez le Nné à 5 l chez l ’adulte  Étude des éléments fonctionnels des lignées hémato : -> leucocytes : formule sanguine -> hématies : Hb, Ht, VGM, TCMH, CCMH -> plaquettes : taux, VPM  Valeurs normales variables en fonction de l’age et du sexe

12. Le temps préanalytique : de l’acte de prescription de l’analyse jusqu’à la réalisation • pratique de cette même analyse. • La prescription : 2 cas • Bilan systématique : pas d’information cliniques • Bilan d’exploration sur un patient ayant une situation clinique connue. • Réalisation du geste • Sujet au repos assis ou couché, à distance de tous stress, effort physique, repas. • Tenir compte du cycle nycthéméral,. • Eviter les ponctions pendant perfusion , nutrition parentérale… • microméthode au talon chez le nouveau-né, • au bout du doigt chez les patients diffciles à prélever

14. Anomalies majeures de l’hémogramme • Anémie = hypoxie des organes vitaux • Agranulocytose, lymphopénies extrêmes = infections • Thrombopénies = hémorragies • Polyglobulies et hyperleucocytoses massives = hyperviscosité • Polyglobulies, hyperplaquettoses = thromboses veineuses et artérielles • Hyperéosinophilies essentielles = lésions tissulaires  Dangers sérieux, aspects cliniques multiples  Urgence biologique annonce une urgence clinique  L ’hémogramme apporte des repères chiffrés essentiels dans la démarche du diagnostic médical  Des logigrammes d’investigations cliniques et paracliniques précieux et expérimentés Diagnostic du mécanisme, de la “maladie”, de l’agent étiologique causal

15. HÉMOGRAMME ET VALEURS DE RÉFÉRENCE • Préalables • Méthodologiques : • standardisation : • des condition de prélèvement (ponction veineuse franche, tube EDTA) • des méthodes de mesure des paramètres (automate) • du mode d ’expression des résultats • Physiologiques • Nyctémère, alimentation, tabagisme, alcool, effort physique, altitude, prise de médicaments, stress, grossesse • Groupe de population: age, sexe,ethnie • Groupes physiologiquement homogènes

16.  Valeurs ref : GR, GB, NP

17. Numération des Globules Rouges Les paramètres calculés • Ht = Hématocrite Ht = (GR x VGM)/10 • TCMH = Teneur cellulaire moyenne en hémoglogine. Hb g/100 ml x 10 TCMH = Nb GR 10 6/mm3 • CCMH = Concentration cellulaire moyenne en hémoglobine. Hb en g/100 ml CCMH = x 100 Ht

18.  Valeurs ref : constantes érythrocytaires

19. Valeurs de référence : numération globulaire et paramètres erythrocytaires

20.  Valeurs ref : formule sanguine

21. Valeurs de référence :formule leucocytaire

22. Numération des Globules Rouges Les paramètres calculés • L'IDC ou RDW • L'IDC est une valeur statistique correspondant au CV % calculé sur la distribution des rouges = coefficient d'anisocytose. 200 200 200 100 100 100 50 50 50 IDC Normal < 15,5% IDC Elevé 18 % IDC très Elevé 35 %

23. Numération des Plaquettes Les paramètres calculés • Le Thrombocrite • Tct = VMP x Nb de Plaquettes • L'IDP ou PDW • Indice de distribution plaquettaire

24. Réticulocytes La numération des réticulocytes ne fait pas partie de l’hémogramme Analyse spécifique Valeurs normales des réticulocytes : 25 à 100 (Giga/L)

25. Interprétation- deux temps • Paramètres de la numération ligne par ligne : variation quantitative • Paramètres de la formule (valeur absolue) • Variation qualitative (commentaire morphologie des cellules) • Confronter résultats à • La population de référence • aux conditions cliniques • Evaluer éventuelle hémodilution

26. Certaines anomalies doivent faire suspecter une hémopathie maligne. • anémies non microcytaires arégénératives • bicytopénies et pancytopénies • myélémie • hyperlymphocytose en dehors du syndrome mononucléosique, • monocytose en dehors d’un syndrome inflammatoire, • présence de cellules anormales Examens complémentaires • Reticulocyte • Myélogramme • Bilan d’anémie etc

27. Myélogramme 1. DEFINITION • Le myélogramme correspond à une analyse quantitative et qualitative de frottis médullaires réalisés après ponction- aspiration de moelle osseuse généralement au niveau du sternum. • Examen est réalisé dans un but diagnostic (suspicion d’hémopathie maligne, de métastases médullaires, de leishmanioses viscérales…) ou de suivi de la pathologie préalablement diagnostiquée.

28. Myélogramme • Le prélèvement : • Adulte : ponction au niveau sternal ou dans l’os iliaque (épines iliaques • antéro-supérieures, crête). • Enfant : os iliaques • Nouveau-né: plateau tibial face antéro-interne. • Trocart de Mallarmé et pour faible quantité de moelle (quelques frottis) on • utilise une aiguille plus fine (aiguille pour PL pédiatrique avec mandrin) • Aspiration mélange de moelle et de sang  • Suc médullaire en grumeaux étalé sur les lames de verre  • La ponction de MO n’a pas de véritable contre-indication • (éviter de prélever lors des coagulopathies sévères).

29. Prescription : associer • Un hémogramme • Un minimum de renseignements cliniques indispensables à une bonne lecture et interprétation du myélogramme. Lecture • Celle-ci comporte 3 temps successifs, tous 3 indispensables : • appréciation générale des frottis médullaires • appréciation cytologique et morphologique • décompte des éléments cellulaires

30. Coloration des étalements May Grunwald Giemsa • Lecture des frottis médullaire au microscope • Etude cytologique fine et rapide • (résultat disponible en quelques heures) • Apprecier • la richesse (grossissement 10X) • (Un prélèvement pauvre peut traduire une aplasie médullaire, une myélofibrose, • ou une dilution du matériel prélevé par du sang ) • la présence de MK, les pourcentages des différentes lignées • la présence éventuelle de cellules non hématopoiètique (métastases) • Etablir : • la répartition de cellules des différentes lignées cellulaires. • (Une formule est réalisée sur tous les éléments nucléés autres que les mégacaryocytes )

31. Explorations complémentaires éventuelles : • coloration spécifique du fer (Perls) • colorations cytochimiques utiles à la classification des leucémies aiguës (myéloperoxydase, estérases) • études immunocyto-chimiques (mise en évidence de marqueurs par l‘utilisation d'anticorps monoclonaux spécifiques: ICC ou CMF) • analyse cytogénétique avec établissement du caryotype des cellules médullaires • Analyse des marqueurs en biologie moléculaire