150 likes | 2.25k Views
Tipovi sterilizacije. Sterilizacija. postupak uni š tavanja ž ivih organizama, uklju č uju ć i i bakterijske endospore, posti ž u se asepti č ni uslovi vr š i se na razne na č ine, primenom razli č itih fizi č kih i hemijskih metoda u zavisnosti od osobine predmeta koji se sterili š e
E N D
Sterilizacija • postupak uništavanja živih organizama, uključujući i bakterijske endospore, postižu se aseptični uslovi • vrši se na razne načine, primenom različitih fizičkih i hemijskih metoda u zavisnosti od osobine predmeta koji se steriliše • Tipovi sterilizacije: • fizička • mehanička • hemijska
Fizička sterilizacija • Sterilizacija toplotom • suva toplota • plamenom • toplim vazduhom • vlazna toplota • vodom (kuvanjem) • vodenom parom (strujeća vodena para ili vodena para pod pritiskom) 2. Sterilizacija zračenjem
Sterilizacija toplotom • najčešće primenjivana tehnika u mikrobiologiji • suva toplota-sterilizacija laboratorijskog pribora i posudja • plamenom (spaljivanjem)-metalni pribor koji podnosi česta zagrevanja do usijanja (eza, pinceta, skalpel, preparatorska igla) • toplim vazduhom-u suvim sterilizatorima, steriliše se laboratorijsko posudje, porcelanski i metalni pribor, t° zavisi od veličine predmeta (najcesce na 180 °C, 2h), pre sterilizacije objekti moraju biti stavljeni u metalne kutije ili zavijeni u hartiju, kako nakon sterilizacije ne bi došlo do kontaminacije
Sterilizacija toplotom • vlažna toplota • sterilizacija vodom (kuvanje)-metalni i gumeni pribor, u H2O se dodaje Na2CO3 kako bi se uništile i spore • sterilizacija strujećom vodenom parom-sterilizacija bakterioloških hranljivih podloga koje sadrže šećere (ne smeju se izlagati t° iznad 100°C), u Koch-ovom loncu (ili autoklavu bez pritiska) 3 dana uzastopce po 20min, a u medjuvremenu podloge stoje u termostatu-frakciona sterilizacija (tindalizacija)-1. sterilizacija uništava vegetativne ćel., u slučaju da postoje spore, one klijaju i unište se 2. sterilizacijom, 3. sterilizacija zbog veće sigurnosti • sterilizacija vodenom parom pod pritiskom-sterilizacija većine hranljivih podloga, lab. posudja, odbačenih kultura mo i drugo, u autoklavu
Autoklav • cilindričnog oblika • dupli metalni zidovi, na dnu izmedju zidova prostor za vodu u kome su el. grejaci, prostor za vodu u vezi sa vodomernom cevi (pokazuje dozvoljen nivo vode), manometrom, termometrom i sigurnosnim ventilom (automatski se otvara u slučaju stvaranja većeg pritiska) • voda se može dolivati preko ugradjenog levka
Autoklav • može biti vertikalan i horizontalan • masivan poklopac koji se pomoću zavrtnja • pričvršćuje za telo autoklava i sprečava izlazak pare • konstrukcija aparata omogućava postizanje visokog • pritiska tokom sterilizacije
Upotreba autoklava • u komoru se stave objekti za sterilizacijuu, pri čemu treba voditi računa da ostane dovoljno prostora za prolaz vodene pare • spusti se poklopac i pričvrsti unakrsnim zatezanjem zavrtnja • prekontrolisati nivo vode, otvoriti slavinu za ispuštanje pare i uključiti grejače • gust mlaz pare na slavini za njeno ispuštanje je znak da je iz komore istisnut vazduh, zatvoriti slavinu • računanje vremena sterilizacije počinje kada je postignuta odgovarajuca t° i pritisak • kada je završena sterilizacija isključuju se grejači, blago se otvori ventil za ispuštanje pare • kada se pritisak vrati na 0atm i para prestane da izlazi otvara se poklopac
Sterilizacija zracima • UV lampe (250nm)-sterilizacija operacionih sala, mikrobioloških laboratorija, izolovanih radnih površina, sterilizacija površina na koje zraci direktno padaju • jonizujuce zračenje (radijacija)-sterilizacijaplastičnog posudja i pribora za jednokratnu upotrebu pri njihovoj proizvodnji, nema širu primenu, jer zraci imaju dubinsko mikrobicidno dejstvo
Mehanička sterilizacija • sterilizacija filtracijom-za sterilizaciju rastvora koji se menjaju pod uticajem toplote, pomoću vakuuma tečnost koja se steriliše propušta se kroz filter čije su pore sitnije od veličine mo • tipovi filtera koji se koriste: Sajc-ov filter (azbest), Cemberlen-ov filter (porcelan), Berkfeld-ov filter (dijatomejska zemlja), membranski ultra filtri (nitroceluloza)
Hemijska sterilizacija • hemikalije mogu delovati mikrobistatično i mikrobicidno na mo u zavisnosti od koncentracije i veremena delovanja • dezinfekciona sredstva-uništavanje vegetativnih oblika ćelija (manja koncentracija, kraće vreme delovanja), ciljana sterilizacija • dezinfekcija u lab. i bolnicama (podovi, zidovi, radne površine) • hemikalije koje se najčešće koriste: etil alkohol, fenol (0,5% rastvor karbolne kiseline), lizol (3% rastvor karbolne kiseline), formalin (40% vodeni rastvor formaldehida), etilen oksid-plastika
Pasterizacija • uništavanje vegetativnih oblika mo povišenom t° • najčešće se vrši 20min na 72°C ili 5min na 62°C i naglim hladjenjem na 5-10°C • uništava se 80-90% mo • hladjenjem se usporava klijanje i razmnožavanje spora • postupak se primenjuje za produžavanje roka trajanja nekih prehrambenih proizvoda