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HPLC 原理及基本操作. 淋洗液. Temporal course. 色谱分离. 慢 中等 快. 定义:利用物质的物理化学性质建立的 分离、分析 方法 目的: 定性 分析或 定量 分析. 1 . 1906 年由俄国植物学家 Tsweet 创立 ( 命名 ) 植物色素分离 2 .现在:一种重要的分离、分析技术 固定相 (Stationary phase) —— 固体或是液体 流动相 (Mobile phase) —— 液体或气体 色谱柱 (Column) —— 各种材质和尺寸 被分离组分 —— 不再仅局限于有色物质.
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淋洗液 Temporal course 色谱分离 慢 中等 快
定义:利用物质的物理化学性质建立的分离、分析方法定义:利用物质的物理化学性质建立的分离、分析方法 • 目的:定性分析或定量分析 1.1906年由俄国植物学家Tsweet创立(命名) 植物色素分离 2.现在:一种重要的分离、分析技术 固定相(Stationary phase)——固体或是液体 流动相(Mobile phase)——液体或气体 色谱柱(Column)——各种材质和尺寸 被分离组分——不再仅局限于有色物质
色谱法简单分类 • 按溶质在分离过程中的原理: • 吸附色谱 • 分配色谱 • 离子交换色谱 • 体积排阻色谱 • 亲和色谱
高选择性 高效能 高灵敏度 分析速度快 应用范围广 对未知物分析的定性专属性差 需要与其他分析方法联用(GC-MS,LC-MS) 高效液相色谱(HPLC) High Performance Liquid Chromatogrphy
储存和输送液体设备 • 进样系统 • 柱系统 • 检测器 • 控制和数据处理系统
1. 保留时间 tR(retention time) 2. 死时间t0: 3.调整保留时间tR’
HPLC的应用 • 1、在生物化学和生物工程中的应用 • 2、在医药研究中的应用 • 3、食品分析 • 4、环境分析 • 5、精细化工
发展趋势 • 1.新型固定相: 如手性固定相. • 2.新型检测器(Detector): 如PFPD(GC), ELSD(PHLC). • 3.色谱新方法: 如SFC, HPCE, • 4.色谱联用技术: 如GC-MS, GC-FTIR, PHLC-MS, SFC- MS, GC-ICPAES. • 5.色谱专家系统: 优化样品处理,分离条件,定量及结果分析