600 likes | 850 Views
Proteinek szintézise és válogatása. Dr. habil. KŐHIDAI László egyetemi docens Semmelweis Egyetem, Genetikai, Sejt- és Immunbiológiai Intézet 2008. durvafelszínű-Endoplazmatikus Retikulum dER. Endoplamatikus = sejten belüli; retikulum = hálózat kiterjedt membrán-rendszer
E N D
Proteinek szintézise és válogatása Dr. habil. KŐHIDAI László egyetemi docensSemmelweis Egyetem, Genetikai, Sejt- és Immunbiológiai Intézet 2008. durvafelszínű-Endoplazmatikus RetikulumdER
Endoplamatikus = sejten belüli; retikulum = hálózat • kiterjedt membrán-rendszer • a sejt membránjának kb. 50%-át teszi ki • csöves + lemezes = ciszternák • a sejtmagmembrán külső lemezének folytatása • két típus: durva felszínű ER (riboszómák) • sima felszínű ER
s-ER (sima felszínű ER) • szerkezet: csöves • funkció: • szintézis: phospholipidek, cholesterin, • ceramid • szintézis: szteroidok • Ca2+ tárolása és szabályozás • méregtelenítés – cyt P450
Palade, G.E. 1974 A dER felszínéhez kapcsolódó riboszómák pancreas exocrin sejtjében (TEM)
mRNS peptid poliriboszóma
A riboszóma molekuláris felépítése rRNS 60S rRNS + peptidek
? A riboszóma valódi szerkezete
t-RNS aminosav aktiváló enzim riboszóma antikodon kodon
Nirenberg, M.W. Khorana, H.G. 1968
A peptid kötés kialakítása peptide bond peptidyl transferase
Csatorna képződése a riboszómális komplexben (1)
Az SFR (SRP) szerkezete • általános • 300 bázisnyi RNS • 6 protein • P54 - szignál peptid • P9, P14 – riboszóma • kötés • P68, P72 – peptid • mozgatása
Riboszóma-translocon-ER membrán kapcsolódása
Translocon komplex • TRAM – (= translocating chain-associated • membrane protein) köti a szignál • szekvenciát • Sec61p – a translocon csatorna fő összetevője; • a gyűrű-alakú struktúra felépítője • Sec 61 b és Sec 61g kötődik a Sec 61p-hez • és így alakul ki a Sec 61 komplex • A Sec 61 komplex kötődik a riboszómához, • részt vesz a transzmembrane • transzferben
A GDP/GTP ciklus és a GTP hidrolízise – A szerkretorikus protein kapcsolódása a transloconhoz
A dER-en szintetizálódó, integrans membránproteinek elhelyezkedése a membránban
Az inzulin receptor szintézise és inzerciója az ER membránba • N-terminus az ER lumen felé • C-terminus a citoszól felé • A szignál szekvencia levágódik • Stop-transzfer membrán-kihorgonyzó • szignál
C-terminus ER lumen felé • N-terminus a citoszól felé • Nincs N-terminális ER szignál szekvencia • az el nem távolított integral szignál • membrán kihorgonyzóként működik Asialoglikoprotein receptor szntézise és inzerciója az ER membránba
A több transzmembrán, a-helikális szegmenttel rendelkező proteinek szintézise és inzerciója • - El nem távolított szignál membrán kihorgonyzóként működik • - Stop-transzfer membránkihorgonyzó szekvenciák • El nem távolított szignál membrán kihorgonyzóként működik • stb.
Poszt-transzlációs modifikációk • Proteolítikus bontás • Glikoziláció • Aciláció • Metiláció • Foszforiláció • Szulfatálás • Preniláció • C-vitamin függő modifikációk • K-vitamin függő modifikációk • Szelenoproteinek
Proteolítikus bontás • Szignál peptid eltávolítása • preproproteinek • preproteinek • Szignál peptidáz
Glikoproteinek Jellegzetes cukrok: glukóz, galaktóz, mannóz, fukóz, GalNAc, GlcNAc, NANA O-glikozidos kötés – Ser, Thr hidroxil csoportjai, hidr-Lys N-glickozidos kötés – konszenzus szekvencia N-X-S(T) (DE nem P) Major N-kötött csoportok: magas mannóz tartalmú típus, hibrid típus, komplex típus (szialsav)
dER N-kötődés a GlcNAc-hoz dER O-kötődés a GalNAc-hoz Glikoziláció
O-kötött cukrok: Cukrok kötve - UDP, GDP (mannose), CMP (NANA) glycosprotein glycosylttransferase N-kötött cukrok: Egy lipid összekötőt (dolichol phosphate)feltételez