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Medical Microbiology 医 学 微 生 物 学. Department of Microbiology 微生物学教研室. Department of Microbiology, Harbin Medical University. Department of Microbiology, Harbin Medical University. 第一节 支原体 Mycoplasma 微生物学教研室. 问题. 什么是支原体? 支原体与细菌 L 型的异同点 ?. 支原体 ( Mycoplasma ). 无细胞壁 能通过滤菌器 能在培养基中生长繁殖
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Medical Microbiology 医 学 微 生 物 学 Department of Microbiology 微生物学教研室 Department of Microbiology, Harbin Medical University Department of Microbiology, Harbin Medical University
第一节 支原体 Mycoplasma 微生物学教研室
问题 • 什么是支原体? • 支原体与细菌L型的异同点?
支原体(Mycoplasma) • 无细胞壁 • 能通过滤菌器 • 能在培养基中生长繁殖 • 最小的原核细胞型微生物 • 含有DNA和RNA两种核酸
支原体科 • 支原体属 • 肺炎支原体 原发性非典型性肺炎 • 人型支原体 泌尿生殖道感染 • 脲原体属 • 解脲脲原体 泌尿生殖道感染
形态与结构 • 没有细胞壁 • 具高度多形态性 • 能通过除菌滤器 • Giemsa染色呈淡紫色
培养特性 • 需氧和兼性厌氧 • 22-24 ℃均能生长 • 营养要求较高 • 繁殖较慢 • 油煎蛋样的菌落
性状 支原体 细菌L型 细胞壁 无 无 通过滤菌器 能 能 对青霉素敏感性 不敏感 不敏感 来源 自然界、人与动物体内 在一定条件下诱导细菌形成 遗传性 与细菌无关 与原菌相同,去除诱导因素后,可回复为原菌 培养 含胆固醇培养基 大多需高渗培养 支原体与细菌L型的区别
支原体属 Mycoplasma
支原体属 支原体 致病性 肺炎支原体 原发性非典型肺炎 人型支原体 泌尿生殖道感染 生殖器支原体 泌尿生殖道感染 穿透支原体 多见于艾滋病 发酵支原体 泌尿生殖道感染
生物学性状 • 无细胞壁 • 二分裂方式繁殖 • 典型菌落呈油煎蛋样
抗原结构 来自细胞膜,胞膜外层蛋白质是主要抗原, 常用生长抑制试验(GIT)与代谢抑制试验 (MIT)鉴定。GIT是将吸有型特异性抗血清 的滤纸片置于接种有支原体的固体培养基上, 经孵育出现同型血清抑制该型支原体生长现 象。MIT是将支原体接种在含有抗血清培养 基中,若抗体与支原体型一致,则抑制该支 原体不能分解葡萄糖产酸。此两种方法可将 支原体分成若干血清型。
培养特性 以二分裂繁殖,繁殖较慢;生 长需要胆固醇;反复传代后呈“荷包蛋” 状菌落,可迅速溶解哺乳动物红细胞。 生化反应 肺炎支原体可根据是否能利用 葡萄糖、水解精氨酸和尿素来与其他支原 体进行鉴别。
5.抵抗力 1.对热的抵抗力一般与细菌相似。耐冷冻,-70℃或液氮可长期冻存, 4℃放置也不要超过3天。 2.支原体对干燥敏感,干燥的标本难以分离出支原体。没有细胞壁青霉素不敏感。
致病性 外源性感染 上呼吸道感染:感冒、咽炎、气管炎 支原体性肺炎 (Mycoplasmal pneumonia) (原发性非典型肺炎)—由肺炎支原体导致 (primary atypical pneumonia) 临床表现和胸部X线: 肺炎链球菌引起的典型肺炎不同 类似病毒性肺炎
世界各地,密集人群,儿童及青少年多见 秋冬季发病率高,每隔3~5年出现一次流行 飞沫传播 潜伏期2W~3W,感染起病缓慢 临床主要症状:发热(约39℃)、头痛、持续性顽固咳嗽、胸痛等。 病人带菌、排菌状态可持续6W~8W 肺外合并症(神经系统、消化系统及心脏等)发病率高,严重者可致死 致病性:粘附是先决条件 也和超敏反应有关(共同抗原)
所致疾病-支原体肺炎 • 临床表现 • 发热(约39℃)、头痛 • 持续性顽固咳嗽、胸痛等
致病性 : 、广泛分布于人、动物体内,对人致病的主要有: 肺炎支原体→原发性非典型肺炎。 溶脲脲原体 人型支原体 生殖器支原体 泌尿生殖道感染,不育症,似淋病,称为非淋球菌淋病。 单核巨噬细胞 粘附 穿透支原体 CD4T 免疫损伤 AIDS 侵入 红细胞
免疫性 抗体:多种(CF抗体、生长抑制抗体、 杀支原体抗体等) 呼吸道sIgA:有一定作用 非特异冷凝集素: 1.和自身免疫有关 2.患者阳性率为50%, 常用于辅助诊断。
微生物学检查法 病原分离 特异核酸的检测 血清学诊断 抗原检测 冷凝集试验
防治原则 • 对红霉素、四环素或螺旋霉素敏感 • 灭活或减毒活疫苗的应用效果尚不理想
其它支原体 寄生部位:鼻咽腔及泌尿生殖道粘膜 属于正常菌群,引起条件性感染 口腔支原体:慢性呼吸道感染 唾液支原体:齿槽溢脓 生殖支原体:生殖道、呼吸道和关节腔的炎症, 流产、早产和新生儿肺炎 发酵支原体:类风湿性关节炎 AIDS相关(分离率明显升高) 人型支原体:渗出性咽炎、非淋菌性尿道炎 (nongonococcal urithritis,NGU), 卵巢脓肿、 产褥败血症
脲原体属(Ureaplasma) 从支原体分出的独立的新属 正常菌群:绝大多数 有致病性:解脲脲原体 (U.urealyticum,Uu) 1954年从NGU患者的病灶处分离 类似肺炎支原体 能水解尿素
生物学性状 形态:圆形或球杆状 染色:革兰染色阴性 温度和酸碱度: 37℃, pH 6.0 菌落:很小(15μm~60μm,放大200倍), 称T株(Tiny colony strain) 敏感性: 敏感: 四环素、氯霉素、庆大霉素、 卡那霉素、0.05% 醋酸铊、 125μg/ml 5-碘-2’脱氧尿苷 不敏感:青霉素 生化特性:水解尿素产氨
致病性 存 在: 人和动物的口腔、呼吸道、 泌尿生殖道 血清型: 解脲脲原体(Uu)有14个血清型 传播途径: 性接触传播、母婴传播 所致疾病 (STD) 泌尿生殖道感染: NGU 、盆腔感染、宫颈 炎、阴道炎、输卵管炎、慢性前列腺 炎、附睾炎、男女不孕症、反复流产、 早产、死胎 新生儿疾病:呼吸道病变、肺炎、脑膜炎
引起男性不孕的原因: ① Uu吸附于精子表面, 使其运动受阻, 并蔽盖了精子识别卵细胞的部位 ② Uu产生神经氨酸样物质, 干扰精子与卵细胞结合。 ③ Uu与精子膜有共同抗原, 从而产生抗精子抗体
脲原体属 • 解脲脲原体(U. urealyticum) • 非淋菌性尿道炎(nongonococcal urethritis,NGU) • 性传播疾病
衣 原 体 衣原体是性传播疾病的病原体之一。
衣原体感染图像:衣原体的包涵体位于胞浆大空泡中。衣原体感染图像:衣原体的包涵体位于胞浆大空泡中。
衣原体(Chamydia) 特点:1.能通过细菌滤器,光镜下可观察 2.有独特发育周期 3.不能人工培养,不能独立生活, 为专性细胞内寄生 4.原核细胞型 和病毒的区别: ⑴ 有细胞结构 ⑵ 细胞壁类似G- ⑶ 两种类型的核酸(DNA和RNA) ⑷ 有核糖体 ⑸ 以二分裂方式繁殖,有独特的发育周期 ⑹ 对多种抗生素敏感(四环素和红霉素)
分 类 存在:人类、哺乳动物及禽类体内 分类依据:1.抗原构造 2.包涵体糖原的有无 3.对磺胺类药物的敏感性 分类(4个种): 1.沙眼衣原体(C. trachomatis)(人) 亚种(1)沙眼生物变种(Biovar trachoma) 14个血清型 (2)性病淋巴肉芽肿变种(Biovar lymphogranunloma venereum,LGV) 4个血清型 (3)鼠生物变种(Biovar mouse) 2.鹦鹉热衣原体(C. psittaci) (人) 3.肺炎衣原体(C. pneumonia) (人) 4.家畜衣原体(C.pecorum)
生物学性状 生活周期包括原体和始体两阶段 光镜下:两种形态: 原体(elementary body) 始体(initial body) 原体定义(elementary body) 1.形状:球形,0.2~0.4μm 电镜下:核质致密和少量核糖体 细胞壁坚韧 存在于细胞外 2.功能:(1)有很强的感染性(吸附) (2)发育成始体:吸附->被吞噬-> 胞膜在原体周围形成空泡-> 原体在空泡中增大->始体
一、生物学性状 1.发育周期与形态染色 在宿主细胞内繁殖过程,可见到两种形态: (1)原体(elementary body,EB) 较小,圆形或卵圆形, 有胞壁和致密类核结构, Giemsa染色呈紫色, 是成熟衣原体在细胞外 存在形式,无繁殖能 力,具有高度传染性。 EB EB
始体定义(initial body) 1.形状:球形,较原体大(0.8~1.5μm), 无致密核质,有纤细网状结构--- 也称为网状体(reticulate body) 2.发育周期:原体->->始体->空泡内-> 二分裂->子代原体->包涵体(inclusion body)->原体成熟->释放->再感染 (24~48h) (无细胞外周期) 3.是繁殖型,无感染性 染色: 1.Macchiavello染色法或Giemsa染色法 原体:红色或紫色 始体:深蓝色 2.碘染色法:沙眼衣原体原体:褐色 (因包涵体含糖原)
(2)始体(initial body)较大,疏松的圆形或卵圆形, Giemsa染色呈蓝色,无胞壁,无核质,内部呈网状结构,存在于细胞内,二分裂繁殖,发育成许多原体,释出胞外再感染新的易感细胞。
衣原体形成的包涵体 是在易感细胞内繁殖的始体和子代原体的空泡(吞噬体),成熟的包涵体含大量的原体。
沙眼衣原体的始体可融合成一个包涵体, 鹦鹉热衣原体不融合形成多房性包涵体。 包涵体含糖原,可被碘液染为棕褐色
培 养 方法:1.鸡胚卵黄囊 2.各种传代细胞 (Hela细胞,McCog细胞) 3.动物实验:某些可感染小鼠 培养时间:48~72h后 观察:包涵体 原体颗粒 始体颗粒
抗原构造 1.属特异性抗原 成分:脂多糖 方法:CF试验和IF法 2.种特异性抗原 成分:外膜蛋白(MOMP) 方法:IF法和中和试验(NT) 3.血清型特异性抗原 成分:MOMP 方法:单克隆抗体微量免疫试验 血清型:(1)沙眼生物变种:14个 (A-K、Ba、Da,Ia) (2)LGV: 4个(L1、L2、L2a和L3 )
抵抗力 热:敏感,60℃10min或37℃48h 寒冷:-50℃数年 化学消毒剂:0.5%石炭酸,24h 75%乙醇,半分钟 抗生素:利福平、四环素、红霉素、 磺胺敏感 青霉素:不敏感
致病机理 致病物质:内毒素相似的物质 致病机理:1.抑制细胞代谢,使细胞溶解 2.引起超敏反应 3.形成肉芽肿 传播途径:眼-眼 眼-手-眼 性接触传播 产道感染 呼吸道感染 (不通过节肢动物传播)
所致疾病 1.沙眼(trachoma) (慢性传染性角结膜炎) 病原体:沙眼衣原体生物变种的A、B、Ba、C血清型 传播途径:眼—眼,眼—手—眼 慢性炎症,可致盲 汤飞凡等(1956年,鸡胚接种法) 2.包涵体结膜炎(inclusion conjunctivitis) 病原体:沙眼生物变种中除A和C以外 好发人群:新生儿(产道感染)(母婴间) 成人(接触)