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Tema 26. Transducción. Transferencia génica en bacterias. conjugación. transformación. transducción. Transferencia génica en bacterias. 26. Transducci ón. • Bacteriófagos: - ciclo de vida: l ítico y lisogénico - tipos: virulento y atemperado
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Transferencia génica en bacterias conjugación transformación transducción Transferencia génica en bacterias
26. Transducción • Bacteriófagos: - ciclo de vida: lítico y lisogénico - tipos: virulento y atemperado • Transducción: descubrimiento y el proceso • Transducción generalizada - mapas genéticos por transducción • Transducción especializada o restringida
* * * * curación Inducción Ciclo lítico Ciclo lisogénico Profago (integrado o plásmido) inmunidad fagos virulentos fagos atemperados
Fago l Fago l • Otros fagos atemperados: • P1 de E. coli (plásmido) • - P22 de Salmonella (se integra)
Transducción Salmonella y P22 Zinder y Lederberg, 1951 (P. Nobel 1958) 1/105
1/105 1/105
formación de una partícula transductante Fago defectivo o transductante (1/105 -1/104) Transducción
transducción generalizada P1 de E. coli y P22 de Salmonella
transducción generalizada Transductantes Cotransducción: cuando ambos genes van en el segmento de DNA que incorpora el fago. Un fago transductante lleva aprox. un 2-2,5% del genoma de la bacteria (ej: P1 lleva aprox. 1,5 min del cromosoma de E. coli).
análisis de ligamiento mediante experimentos de transducción thr azi leu frec. cotransducción: 2,5% 50% P1 (leu+ thr+ aziR) -> leu - thr- aziS frecuencias de cotransducción
análisis de ligamiento mediante experimentos de transducción P1 (A+ B+ C+) -> A- B- C- 1. Orden Si tan juntos que siempre cotransducen juntos, la categoría menos frecuente será aquella que no haya incorporado el marcador central 2. Distancia Inversa a la frecuencia relativa de cotransducción Selección en MM+B+C -> todos los transductantes A+ A+B+C+ 50 A+B+C- 75 frecuencia de cotransducción A-B: 50+75 / 426 = 0,29 A+B-C+ 1 frecuencia de cotransducción A-C: 50+1 / 426 = 0,12 A+B-C- 300
mapa genético de la región purB-cysB de E. coli frecuencias de cotransducción con P1
Tamaño del fago m bio+ entre los gal+ entre los frecuencia de donante receptor transduc. gal+ transduc. bio+ cotransducción gal+ bio+ – – 416/939 233/470 0,47 gal+ m bio+ – m – 128/3280 18/633 0,037 100(1- 0,47 ) = 22,25 kb 100(1- 0,037 ) = 66,67 kb 66,67 - 22,25 = 44,42 kb (m = 48,5 kb) 3 d = L (1 – x ) 3 3 distancia física a partir de frecuencias de cotransducción d: distancia a calcular L: longitud (absoluta -en kb- o relativa) del genoma del fago que se usa en la transducción x: frecuencia de cotransducción similar al problema 8.23
transducción especializada o restringida Proceso: análogo a la sexducción (F’) Utilidad: no útil para cartografiar, sí para transferir genes
fago no transductante fago transductante pero defectivo )
problemas capítulo 8 problemas: 14-24 aprox. 1h de clase