1 / 91

Poruchy metabolismu AMK

Poruchy metabolismu AMK. Struktura semináře. DMP Obecné mechanismy u aminoacidopathií Poruchy metabolismu síry jako model Vybrané DMP aminokyselin vč. poruch cyklu močoviny Shrnutí. Struktura semináře. DMP Obecné mechanismy u aminoacidopathií Výskyt aminoacidopathií v ČR

chavez
Download Presentation

Poruchy metabolismu AMK

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Poruchy metabolismu AMK

  2. Struktura semináře • DMP • Obecné mechanismy u aminoacidopathií • Poruchy metabolismu síry jako model • Vybrané DMP aminokyselin vč. poruch cyklu močoviny • Shrnutí

  3. Struktura semináře • DMP • Obecné mechanismy u aminoacidopathií • Výskyt aminoacidopathií v ČR • Poruchy metabolismu síry jako model • Vybrané DMP aminokyselin • Shrnutí

  4. DMP- příčiny a důsledky Substrát produkt

  5. Zastoupení DMP v ČR (1994-1998) incidence pro ČR 1:1270 70 různých nosologických jednotek

  6. DMP- diagnostika Substrát produkt

  7. Shrnutí-vyš.metody u DMP • DMP- cca 500 nemocí • Diagnostika možná jen laboratorně • Metabolit-enzym-DNA • Metabolity: techniky monoanalytové a profilové • Novorozenecký screening DMP • Potvrzení diagnosy enzymologicky • DNA analysa pro genetické poradenství

  8. Léčba DMP-kauzální

  9. Léčba DMP-patogenetická energie produkt Substrát vedlejší produkt

  10. Dědičné metabolické poruchy (DMP) • cca 500 nosologických jednotek • enzymopathie nebo poruchy transporterů • obvykle AR dědičnost • incidence minimállně 1:1000 • heterozygotie pro DMP minimálně 1:15 • klinický obraz: všechny orgány • klinický obraz: libovolný věk • diagnostika: neonatální x selektivní screening • část nemocí léčitelná • prenatální diagnostika obvykle možná

  11. Struktura semináře • DMP • Obecné mechanismy u aminoacidopathií • Poruchy metabolismu síry jako model • Vybrané DMP aminokyselin • Shrnutí

  12. Struktura AMK ?

  13. Aminoacidopathie-základní pathogenetické mechanismy • Akumulace samotné AMK • Akumulace amoniaku • Akumulace uhlíkové kostry- org.kyseliny • Nedostatek produktu

  14. Struktura semináře • DMP • Obecné mechanismy u aminoacidopathií • Poruchy metabolismu síry jako model • Vybrané DMP aminokyselin • Shrnutí

  15. Sloučeniny síry v přírodě Země Litosféra obshauje 0.04% S Anorganické sloučeniny sulfan Fe-S clusters sulfity, sulfáty,pyrosulfáty, thiocyanáaty aj Organické sloučeniny aminokyseliny: Cys, Hcy, Tau, S-sulfo-AA, SAM, SAH peptidy/proteiny:GSH, S-S vazby Cyklus síry v přírodě

  16. methionin FH4 AdoMet methylenFH4 AdoHcy methylFH4 homocystein Hcy: 10-20 umol/kg/hod 2.5-5 g/den cystathionin cystein glutathion

  17. Homocystein v krvi ~12 umol/l

  18. Klasifikace hyperhomocysteinemie (Kang, 1992) 15 30 100 tHcy, mikromol/l

  19. Těžká hyperhomocysteinemie 15 30 100 tHcy, mikromol/l

  20. methionin 1A FH4 1B S-adenosylmethionin 5 methylenFH4 7 B12 S-adenosylhomocystein 8 6 B2 2 methylFH4 homocystein 3 B6 cystathionin B6 4 cystein glutathion

  21. Homocystinurie z deficitu CBS-úrovně studia Klinická Biochemická Mutace a jejich dopad na RNA a protein Populační

  22. Homocystinurie z deficitu CBS Výskyt 1:100.000 až 1:330.000 AR způsob přenosu, 130 různých mutací Nástup nemoci v dětství Klinické postižení: pojivo cévní systém CNS Prenatální diagnostika

  23. Pacienti s deficitem CBS

  24. Dislokace čoček 50% 10 let Mudd, 1985

  25. Thromboembolie 50% 29 let Mudd, 1985

  26. Patofysiologie Met AdoHcy Ado Hcy H2S homocysteová kys. Cystathionin Cys GSH Tau

  27. Metabolity transsulfurační cesty

  28. Metabolity methioninového cyklu

  29. Metabolity C1 poolu

  30. NH2 HEMECOREPLPCa/CaM COOH/AdoMet Gen pro CBS

  31. Mutace v genu pro CBS

  32. Stabilita transkriptů NONSENSE MEDIATED DECAY: přirozený, vysoce regulovaný proces, který vede k degradaci mRNA molekul obsahujících předčasný stopkodón • 50 - 55 nt od poslední hranice exon/exon

  33. genomováDNA Panel A T C mRNA Panel B T C Analysa mRNA u pacientů M 1 2 3 4 C/C T/T C/T M Nonsense mediated decay je jednou z molekulových příčin homocystinurie

  34. Vlastnosti mutantního enzymu • 13 fibroblastových kultur: CBS jen jako agregát • 5 mutací agreguje rovněž v E. coli • mutanty neobsahují hem • exprese v CHO buňkách prokazuje také agregaci • ztráta hemu a agregace mutantních polypeptidů je běžným pathogenetickým mechanismem u homocystinurie

  35. Aggregát Tetramer FibroblastyWestern blot, nativní PAGE Misgfolding a agregace mutantní CBS je jedním z molekulových mechanismů u deficitu CBS

  36. Western blot, SDS-PAGE Exprese mutant v E.coli Janošík et al, Am J Hum Genet 2001

  37. Western blot/nativní PAGE a barvení na hem Exprese mutant v E.coli Janošík et al, Am J Hum Genet 2001

  38. Vliv chaperonů

  39. Skutečný výskyt deficitu CBS • Hypothesa: Je homocystinurie častejší než je její udávaný výskyt ? • Metoda testování hypothesy: • diagnostikovaní pacienti X • očekávaný výskyt (dle prevalence mutací)

  40. q2 q q

  41. Incidence homocystinurie v ČR Pozorovaná Očekávaná ~1:15.000 1:349.000 Závěr: v ČR pravděpodobně není správně diagnostikována většina pacientů s homocystinurií

  42. Struktura semináře • DMP • Obecné mechanismy u aminoacidopathií • Poruchy metabolismu síry jako model • Vybrané DMP aminokyselin vč. poruch cyklu močoviny • Shrnutí

  43. Přehled aminoacidopathií • Aromatické AMK • Větvené AMK • Sirné AMK-již probráno • Jiné AMK • Poruchy cyklu močoviny

  44. Metabolismus aromatických AMK

  45. PAH

  46. BH4 jako kofaktor PAH

  47. HPA/PKU

More Related