Acido folico ed anomalie congenite: dalla ricerca alla prevenzione

1. Roma 27 Novembre 2003 Universita’ di Roma Tor Vergata Aula Bove’ Acido folico ed anomalie congenite: dalla ricerca alla prevenzione Lorenzo Botto Centers for Disease Control and Prevention (CDC) National Center on Birth Defects and Developmental Disabilities Atlanta, Georgia, USA

2. Speaker • Lorenzo Botto • Pediatria, Genetica Medica (Univ Cattolica, Roma) • Medicina Preventiva, Epidemiologia Genetica (Centers for Disease Control and Prevention - CDC, Atlanta) • Interessi: pediatria preventiva, genetica applicata alla clinica e public health

3. Messaggio Chiave • Prevenzione primaria delle anomalie congenite oggi • Possibile oggi • 0.4 mg di acido folico/giorno • Se assunto giornalmente e regolarmente durante il periodo pre e periconcezionale Prevenzione Primaria • Il controllo, o l’eliminazione, della causa o del fattore di rischio, prima o durante la gravidanza, • consente al neonato di nascere sano • senza il difetto congenito che altrimenti avrebbe avuto

4. Sintesi • Prevenzione primaria delle anomalie congenite oggi • Realizzabile ed in realizzazaione, con 0.4 mg di acido folico/giorno, pre e periconcezionale • Previene anomalie congenite in toto e difetti tubo neurale • Non solo spina bifida ed anencefalia • Evidenze: cosa si sa oggi • Temi di ricerca: cosa si vuol sapere ancora • Dalla Ricerca alla Pratica Clinica • Benefici ancora non pienamente sfruttati • In Italia 16 su 17 gravidanze non protette • Cosa possiamo fare noi medici: strategie e azioni

5. Parte 1: Acido FolicoCos’e’, cosa fa

6. Acido folico: funzionetrasporto carbonio singolo

7. 5,10 methylene Nucleotide tetrahydrofolate reductase biosynthesis MTHFR Cystathionine 5 methyl 5,10 methylene Cystathionine synthase tetrahydrofolate tetrahydrofolate plus vitamin B6 Homocysteine Methionine synthase plus vitamin B12, MSR S-adenosyl tetrahydrofolate homocysteine Methionine Methyl Methylated transferases DNA, proteins lipids S-adenosyl Acido folico methionine (SAM) Recettori folato DNA, proteins, lipids • Funzioni multiple • Rete complessa geni, cofattori • Interazioni gene-gene/ambiente Carbonio

8. Più acido folico: 3 modalita’, idealmente integrate Dieta ricca di frutta e verdure [arancie; foglia verde (broccoli, spinaci), legumi (lenticchie, fagioli] Ma: difficile raggiungere e mantenere 0.4 mg/die, potenzialmente costoso Supplementazione : compresse con 0,4 mg di acido folico, solo o come multivitaminico Di provata efficacia, ma richiede abitudine e costanza, spesa personale Fortificazione: alimenti arricchiti con acido folico Raggiunge rapidamente l’intera popolazione, economico Ma richiede legislazione, e puo’ fornire meno di 0.4 mg

9. Parte 2anomalie congenite: frequenza ed impatto

10. Al mondo ogni giorno nascono 10,000+ bambiniaffetti da anomalie congenite, 3,000 con cardiopatia • Anomalie congenite • 1 su 30-40 nati • 20-30% morti infantili nei paesi sviluppati • Morbilita’, ospedalizzazioni, burden, costi • - Spina Bifida ed anencefalia: 1 su 1000-2000 nati • - Cardiopatie: 1 su 110 nati

11. Le cardiopatie congenite e difetti del tubo neurale sono le principali cause di morte infantile per anomalie congenite nel mondo Dati 1990-1994 da WHO: J Epidemiol Comm Health 2000;54(9):660-6

12. Parte 3Acido folico e malformazioni congenite

13. L’acido folico previene >50% dei difetti del tubo neurale (da solo o come multivitaminico) Studi clinici randomizzati Laurence '81 MRC '91 Czeizel '92 Studi clinici non randomizzati Smithells '80,'83 Vergel '90 Studi osservazionali Milunsky '89 Mulinare '88 • Efficace in trial e sul campo • background geografico, etnico • aree di alta e bassa incidenza • occorrenza e ricorrenza • trial clinici, osservazionali, interventi Mills '89 Bower '89 Werler '93 Shaw '95 Interventi di comunita’ Berry '99 0 0.5 1 1.5 2 2.5 Estimated Relative Risk and 95 % Confidence Intervals

14. Difetti del tubo neurale ed oltre • E’ dimostrato che l’acido folico previene spina bifida ed anencefalia • Ma previene anche altre malformazioni?

15. Figure I. Estimated relative risk for all major birth defects, with and without neural tube defects, associated with periconceptional multivitamin use, from Hungarian randomized clinical trial and Atlanta Birth Defects Case Control study. Multivitaminico con acido folico: riduzione del rischio complessivo di malformazioni (20-49%) All birth defects combined Excluding neural tube defects Odds ratio and 95% CI RCT=randomized clinical trial, CC=case control study Source: Botto et al. (2004) 125C: 12-21.

16. RCT ungherese: nel gruppo trattato con multivitaminico riduzione del 50% del rischio complessivo di anomalie congenite, anche una volta esclusi i difetti del tubo neurale (*p<0.05) 49%* 46%* Data: Czeizel et al.,Eur J Obst Gynecol Repr Biol 78 (1998) 151-161

17. Riduzione del rischio di tutte le malformazioni. Studio randomizzato ungherese. IC 95% non indicato se non statisticamente significativo

18. Labioschisi (9) Palatoschisi Acido folico/ MV e anomalie congenite • Cardiopatie (5) • Conotruncali • DIV • Altri ? Anencephalia Spina bifida Onfalocele (1) Tratto urinario (3) Difetti arti (4) Atresia anale (1)

19. Multivitaminico e labiopalatoschisi (CLP) U.S.-CA 1996 (HCC) Hungary 1998 (RCT) Hungary 1999 (PCC), high Czech rep. 1995 (CT), high California 1995 (PCC) U.S.-CA 1999 (HCC) Brazil 2001 (HCC) Maryland 2001 (HCC) Atlanta 2001 (PCC) Estimated relative risk and 95% CI RCT=randomized clinical trial, CT = non randomized clinical trial (recurrence) PCC=case control, pop based, HCC=case control, hosp based

20. Multivitaminico e palatoschisi (CP) Hungary 1998 (RCT) Hungary 1999 (PCC), high California 1995 (PCC) Maryland 2001 (HCC) Brazil 2001 (HCC) U.S.-CA 1996 (HCC) U.S.-CA 1999 (HCC) Atlanta 2001 (PCC) Estimated relative risk and 95% CI RCT=randomized clinical trial, CT = non randomized clinical trial (recurrence) PCC=case control, pop based, HCC=case control, hosp based

21. Multivitaminico (o acido folico*) ed altre anomalie Tratto urinario Onfalocele Atresia anorettale* Riduzione arti California 1995 (PCC) Wash 1995 (HCC) U.S.-CA 1999 (HCC) Hungary 1996 (RCT) U.S.-CA 1999 (HCC) Hungary 1996 (RCT) China 2001 (PHI) Atlanta 2002 (PCC) Atlanta 1997 (PCC) Estimated relative risk and 95% CI RCT=randomized clinical trial, PCC=case control, pop based, HCC=case control, hosp based, PHI= public health intervention

22. Multivitamici e Cardiopatie Congenite: Evidenzetrial clinico randomizzato, caso-controllo popolazione, base ospedaliera Conotruncali DIV CoA Tutte Czeizel ‘96 Werler ‘99 Werler ‘99 Scanlon ‘98 Botto 2000 Botto 2000 Botto 2000 Czeizel ‘98 Czeizel ’92, ‘98 Botto 2000 Shaw ‘95 Rischio Relativo e 95% CI -24% -58% (da 8 per 1,000 a 4 per 1,000)

23. Multivitamici e Cardiopatie Congenite: Evidenzetrial clinico randomizzato, caso-controllo popolazione, base ospedaliera Conotruncali DIV CoA Tutte Scanlon ‘98 Czeizel ‘96 Werler ‘99 Werler ‘99 Botto 2000 Botto 2000 Botto 2000 Czeizel ‘98 Botto 2000 Czeizel ‘98 Shaw ‘95 Rischio Relativo e 95% CI

24. Fonti possibili di variazione tra studi Disegno • Selezione dei casi, scelta dei controlli • tipo di multivitaminico, dose, durata e periodo uso Metodi • Classificazione: cardiaca, complessiva (isol./multiplo) • Eziologia: 22q11, trisomie, geni maggiori • Misclassificazione esposizione: diluisce effetto • Necessita’ di studi grandi, multicentrici • Caso-controllo (gene-ambiente), clinical trial

25. Sommario • Difetti del tubo neurale: evidenze ottime per acido folico • Ricerca clinica • Efficacia nella popolazione • Per altri anomalie congenite • Cuore, schisi, arti, renali, ma quadro complesso • Dati su multivitaminico piuttosto che acido folico

26. Parte 4Acido folico, micronutrienti e malformazioni congenitearee di ricerca relative a genetica ed interazioni gene ambiente

27. Sintesi • Rimangono domande per ricerca • Dose • aumentando dose si aumenta l’effetto o lo spettro di azione ? • Interazione/sinergie con altri fattori ambientali • Diminuisce non solo ‘rischio generale’ ma anche rischio legato a teratogeni specifici (eg.,infezioni)? • Interazioni gene-ambiente • effetto varia per genotipo?

28. Attenuazione di fattori di rischio ambientale? • Febbre, • Diabete… Vitamine, cofattori Source: Botto et al. Epidemiology, July 2002

29. Genetica dei polimorfismi comuni: MTHFR 677C->T: aumento 80% del rischio dei difetti del tubo neurale Am J Epi 2000 151(9):862-77 Botto & Yang Vollset & Botto, 2004 (case-subjects)

30. Il rischio per la popolazione e’ importante perche’ i polimorfismi sono comuni: frequenza di omozigoti 677C->T (MTHFR) Source: J Med Genet August 2003

31. Interazioni tra polimorfismi di diversi geni del ciclo folato-omocisteina: Gruppo a particolare rischio di spina bifida? AF- AF- Genotype Odds 95% CI Exp‡ Pop§ Frequency in MTHFR* CBS† Cases Controls Ratio (%) (%) Controls(%) + + 7 6 3.69 1.04 - 13.50 72.9 2.5 1.0 + - 45 91 1.57 1.02 - 2.38 36.1 8.0 15.6 - + 12 46 0.83 0.39 - 1.64 7.9 - - 139 440 Ref 75.5 Total 203 583 * MTHFR : +, two C677T alleles of MTHFR -, none or one C677T allele † CBS: +, one 844ins68 allele -, no 844ins68 allele ‡ AF-Exp (%): Attributable Fraction (percent) among cases with genotype § AF- Pop (%): Attributable Fraction (percent) among all cases in the population Source: De Franchis et al., 2002 Genet Med

32. Parte 5Tradurre le conoscenze scientifiche in pratica preventiva giornalieraStrategie ed impatto nel mondo ed in Italia

33. Aspetti Pratici • Donne in eta’ fertile: 0.4 mg/die acido folico da prima della gravidanza per prevenire I difetti del tubo neurale • Possibili benefici aggiuntivi: bambini nati sani invece che affetti da cardiopatia ed altre anomalie congenite gravi • Considerare uso di multivitaminico

34. Uso di Acido Folico Periconcezionale in Italia • Basso: 6-8% in sondaggi in Toscana ed Emilia-Romagna • 16 su 17 donne senza i benefici associated ad AF • ‘Non esplicitamente raccomandato dal mio medico’ ragione frequente del non uso • medico (specialista) considerato fonte piu’ autorevole di informazione • Opportunita’ per medici, individualmente e come associazione

35. Come aumentare l’uso di Acido Folico Periconcezionale in Italia? • Informare: utilizzare i contatti con le donne in eta’ fertile per informarle dei benefici dell’AF • Raccomandare: promuovere raccomandazioni da parte delle associazioni professionali e governative di salute pubblica - attuato in molti paesi, non in Italia

36. Come aumentare l’uso di Acido Folico Periconcezionale in Italia? • Fortificare: avviare e promuovere la discussione sulle modalita’ ed opportunita’ di fortificazione delle farine in Italia • Monitorare: promuovere e collaborare alla valutazione nel tempo delle attivita’ relativa ad AF ed al loro impatto nella popolazione

37. Esempio di raccomandazioni (USA) US Public Health Service, September, 1992 • All women of childbearing potential should consume 0.4 mg (400 micrograms) of folic acid daily Food & Nutrition Board of IOM, 1998 • Men (14 yr & older) 400 µg any source • Women (14 yr & older) 400 µg synthetic + food • Pregnancy 600 µg synthetic + food • Lactation 500 µg any source

38. Fortificazione nel mondo • Implementata: USA (dal 1998), Canada (dal 1998), Cile (dal 2000), Sud Africa (dal 2003) • Da implementare a breve: Argentina, Brasile e diversi paesi del Sud America • In discussione: in diversi paesi Europei • In Italia: nessuna discussione conosciuta ad alto livello

39. Approccio in altri paesi include la mobilitazione delle associazioni professionali. Esempio dell’American Academy of Pediatrics, Policy Statement on Folic Acid (1999) • “La American Academy of Pediatrics promuove la […] raccomandazione che tutte le donne in grado di concepire consumino 400 µg (0.4 mg) di acido folico al giorno per prevenire i difetti del tubo neurale” • “La Academy nota che la prevenzione dei difetti del tubo neurale dipende da una campagna urgente ed efficace per colmare questa lacuna (gap) preventiva” Pediatrics 1999 (104) 2: 325-327 www.aap.org/policy/re9834.html

40. Altro esempio di approccio: mobilitazione di partners pubblici e privati, accademici e public health nella National Council on Folic Acid American Academy of Family Physicians American Academy of Pediatrics American College of Obstetricians and Gynecologists American College of Physicians--American Society for Internal Medicine American Dietetic Association American Medical Women’s Association American Nurses Association Association of Maternal and Child Health Programs American Pharmaceutical Association Association of State and Territorial Health Officials Association of State and Territorial Public Health Nutrition Directors Association of Women’s Health, Obstetric and Neonatal Nurses Centers for Disease Control and Prevention Maternal and Child Health Bureau, HRSA March of Dimes Birth Defects Foundation National Coalition of Hispanic Health and Human Services Organizations National Healthy Mothers, Healthy Babies Coalition Pan American Health Organization Robert Wood Johnson Foundation Spina Bifida Association of America Obbiettivi: Informazione, formazione

41. Conclusioni: l’implementazione della prevenzione via acido folico puo’ avere benefici considerevoli, come evidente dalla stima del numero di casi di anomalie congenite potenzialmente prevenibili ogni giorno nel mondo con acido folico periconcezionale (range calcolato dai valori di rischio relativo pubblicati) 2,100 to 5,200 700 to 1700 0 to 150 50 to 150 600 to 1200 750 to 2100 Source: Botto et al. (2004) 125C: 12-21.

42. Ringraziamenti • Prof Stefano Cianfarani e Prof Domenico Del Principe per il gentile invito e l’ospitalita’ • Studenti e specializzandi per il feedback