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Identificação clássica e molecular de fungos endofÃticos isolados de plantas de milho ( Zea mays L.) e padronização do Banco biológico do LabMicro-DPAT Joyce Ana Teixeira (PIBIC / UFPR-TN) Profª Drª Patricia do Rocio Dalzoto.
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Identificação clássica e molecular de fungos endofíticos isolados de plantas de milho (Zeamays L.) e padronização do Banco biológico do LabMicro-DPATJoyce Ana Teixeira (PIBIC / UFPR-TN)ProfªDrªPatriciado Rocio Dalzoto A cultura de milho representa grande parte da produção de grãos no país, sendo o estado do Paraná o líder. Para que novas alternativas de combate à pragas sejam possíveis, o presente trabalho objetiva a caracterização da micro biota fúngica das plantas de milho através do isolamento e identificação dos isolados por meio de macro e micromorfologia, quantificando a ocorrência dos gêneros encontrados, além da utilização de seqüenciamento de regiões ITS do rDNA. Todo esse processo ainda é incluído na padronização do banco biológico do LabMicro-DPAT. Foram obtidos 328 isolados fúngicos, resultando num percentual de infecção de 65,5%, o que é um número influenciável por fatores ambientais. Usando as características da colônia (cores, textura – Figura 01), os isolados foram separados em 58 grupos que, posteriormente, foram identificados a nível de gênero com base na literatura (HOOG, G.S., 2000 e BARNETT, H. L., 1972), analisando as lâminas dos microcultivos em microscopia óptica. O isolamento dos fungos endofíticos requer a desinfeccção superficial das folhas (ARAÚJO, W.L., etal) para assegurar que não sejam isolados fungos epifíticos. A identificação dos isolados a nível de gênero foi obtida através do método do microcultivo (KERN; BLEVINS, 1999) e observação da morfologia da colônia e assegurada pelo seqüenciamento de regiões específicas de DNA, que ainda encontra-se na fase de extração do material genético (VICENTE, 2000) . Figura 01: Características macromorfológicas (verso e reverso, respectivamente) dos isolados pertencentes aos grupos 30 (A), 47 (B) e 54 (C) após crescimento em meio BDA por 7 dias a 27oC.Fonte: O autor (2013). Em comparação com trabalhos anteriores, pode-se relacionar os percentuais de infecção com a sazonalidade.Foram obtidos 58 grupos de acordo com as características das colônias.Foram identificados, 7 gêneros através da identificação clássica, são eles: Alternariasp, Curvulariasp, Nigrosporasp, Trichodermasp, Drechslerasp, Pestalotiopsissp e Myceliasterilia. ARAÚJO, W.L.; AZEVEDO, J.L.; LIMA, A.O.S.; MARCOM J.; KUKLINSKY-SOBRAL, J.; LACAVA, P.T.Manual: Isolamento de Microrganismos Endofíticos. 1. ed. Piracicaba: CALQ., 2002. BARNETT, H. L.; HUNTER, B. B. Illustrated genera of imperfect fungi. 3.ed. New York: MacMillan,1972. 241p. HOOG, G.S., GUARRO, J., GENÉ, J., FIGUEIRAS M.J.. Utrech: Centraalbureauvoorschimmelcultures. Atlas of clinical fungi.2ª edição, 2000. KERN, M.E.; BLEVIS, K.S.Microbiologia Médica. Segunda edição. São Paulo: Editora Premier, 1999.