1 / 23

DĚLICÍ METODY I. – úvod

DĚLICÍ METODY I. – úvod. Význam DM – výskyt studovaných látek ve směsích Podmínka studia : Získat čistou látku Ověřit její čistotu. Historie DM. Alchymisté: destilace, srážení, extrakce, krystalizace 20.století: LSC - chemie přírodních látek PC, IEC – chemie bílkovin

corin
Download Presentation

DĚLICÍ METODY I. – úvod

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. DĚLICÍ METODY I. – úvod Význam DM– výskyt studovaných látek ve směsích Podmínka studia: • Získat čistou látku • Ověřit její čistotu

  2. Historie DM Alchymisté: destilace, srážení, extrakce, krystalizace 20.století: LSC - chemie přírodních látek PC, IEC – chemie bílkovin AC – jednostupňová operace → antigeny Empirie → racionální přístup

  3. Podle vlastností b.v.- destilace, lyofilizace Rozpustnost – krystalizace, srážení, extrakce KD – extrakce, LLC,GLC KHA, KBOH – IEC μ – Elfo V – centrifugace, GPC, dialýza, UF Podle fází V jedné fázi – Elfo, dialýza Mezi dvěma fázemi – chromatografie, krystalizace, destilace Klasifikace DM Podmínka dělení: rozdíl aspoň v jedné fyzikální či chemické vlastnosti

  4. Volba DM Šetrnost x účinnost x ekonomika Dělení není ani teoreticky 100% ← K Hodnocení dělení: • Stupeň čistoty • Výtěžek [%] DĚLICÍ METODY

  5. Typicky vícestupňový postup čištění proteinu

  6. 1. NALEZENÍ ZDROJE Ekonomické hledisko: • Co nejlevnější zdroj • Co největší obsah

  7. 2. UVOLNĚNÍ Z TKÁNĚ desintegrace, destrukce • MECHANICKY – mlýny, kuchyňský masový mlýnek • HOMOGENIZACE – s pufrem, mixer • LYSE BUNĚK OSMOTICKÝM TLAKEM • CHEMICKY – louh, enzymy: lysozym, celulasa, • RŮZNÉ – ultrazvuk „acetonový prášek“ Homogenizátor Pottera a Elvehjema

  8. Metody desintegrace buněk

  9. 3. EXTRAKCEl, s l () Teorie extrakce→ výpočet výtěžku → LC – mnohonásobná kontinuální extrakce Volba rozpouštědla: • Maximální cA SIMILIA SIMILIBUS SOLVENTUR ll • Minimální vzájemná rozpustnost kapalin – eluotropická řada εr , maximálníΔεr • Maximální D • Maximální Δρ (ne emulze), minimální η, inertnost

  10. 3.1. EXTRAKCE Z KAPALINY Rozdělovací konstantaRozdělovací koeficient KD= (aA)org./(aA)H2OD = (cA)org./(cA)H2O E(výtěžek %)≈ D, Vorg./VH2O, n

  11. 3.1.1 METODY • Vytřepávání – dělička (3x) • Roztřepávání, protiproudé rozdělování

  12. Protiproudé rozdělování - Craigování Průmyslové použití • Rychlé, • Bezodpadové • Malá spotřeba rozpouštědel • Matematické zpracování ↓ optimalizace procesu antibiotika, cholesterol z lanolinu

  13. Izolace surového methyloxytocinu (SPOFA) Přístroj: QUICKFIT & QUARTZ 100 jednotek 0,05% AcOH v sec.BuOH

  14. 3.2. EXTRAKCE Z PEVNÉ LÁTKY Soxhletův extraktor za horka kontinuální

  15. Moderní Soxhlet • SOXTEC Tecator – nepřímé vyhřívání cirkulujícím olejem • ROVNOVÁŽNÝ EXTRAKTOR Tecator – mechanicky pro tepelně a světelně citlivé látky • SOXWAVE Prolabo • Fokusovaná mikrovlnná • technologie • Automatické • Úspora času,rozpouštědel, nákladů • Šetrné SOXTEC

  16. 4. SRÁŽENÍs c 4.1.1 VYSOLOVÁNÍ Rozpustnost cystinu x I – iontová síla IEB (NH4)2SO4, Na2SO4, Na3PO4 vsolování vysolování

  17. Výhody Vysoká x , nezávislá na T Malý denaturační vliv Vysoká dělící schopnost frakční vysolování laciné Použití NK (30% (NH4)2SO4) BÍLKOVINY (30 – 75%) př. penicilinasa (60l →2,4kg, 4x specifická aktivita) Mastné kyseliny Sulfonové kyseliny Použití vysolování (NH4)2SO4

  18. 4.1.2 SRÁŽENÍ ORG. KAPALINOU Vytěsnění organickými rozpouštědly mísitelnými s vodou Zmenšení solvatačního obalu Aceton, EtOH, MeOH, py, pro bílkoviny polyethylenglykol

  19. 4.2. SRÁŽENÍ ZMĚNOU pH • Bílkoviny  IEB (kasein z mléka) • Adenin  Ade2S + NaOH

  20. 4.3. TVORBOU NEROZPUSTNÝCH KOMPLEXŮ NK (PO4-) + SEPTONEX streptomycin sulfát Denaturace těžkými kovy – Hg2+, Pb2+, Cd2+ 4.4. TEPELNÉ SRÁŽENÍ Pro termostabilní enzymy – př. kvasničná ADH

More Related