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Produtos Naturais e o Controle do Barbeiro Rhodnius prolixus , vetor da Doença de Chagas. Colaboradores: Marise Maleck de Oliveira Cabral Elói de Souza Garcia Patrícia Azambuja. Alphonse Kelecom Departamento de Biologia Geral Universidade Federal Fluminense - Niterói, RJ.
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Produtos Naturais e o Controle do Barbeiro Rhodnius prolixus,vetor da Doença de Chagas Colaboradores: • Marise Maleck de Oliveira Cabral • Elói de Souza Garcia • Patrícia Azambuja Alphonse Kelecom Departamento de Biologia Geral Universidade Federal Fluminense - Niterói, RJ
O parasita, Trypanosoma cruzi, no tubodigestivo do barbeiro, Rhodnius prolixus
Estágios de muda de ninfas de Rhodnius prolixus A-E : ninfas de 1º - 5º estágio
Mamadeira para alimentação do barbeiro membrana de látex saída de água sanguehumano entrada de água a ~37ºC
Testes com ninfas de Rhodnius prolixus Ninfas de 4º estágio • lotes de 25-30 animais • mantidos em jejum por um período de 25-30 dias • alimentados uma única vez ad libidum • pesados antes e depois do repasto • mantidos a 28ºC durante 3-4 semanas • lote controle: sangue com EtOH-salina (1:4) • testes: sangue contendo 1-500 mg/ml da amostra testada
O objetivo original Azadirachtina A : toxicidade, fagoinibição, deformação das pupas, atraso no desenvolvimento do inseto (DE50 25mg/ml) anti-muda (DE50 40 ng/ml)
Produtos Naturais de Melia(ceae) Flanonóides Antraquinonas Cumarinas escopoletina nimbaflavona Diterpenos Esteróides Limonóides nimosona azedarachol meliantriol
Estudo fitoquímico de Melia azedarach(Meliaceae) • Extração de sementes de M. azedarach com MeOH (rdt.: 12%) • extrato apresenta atividades fagoinibidora e anti-ecdise • purificação guiada por bioensaio • partição MeOH(5% aquoso) versus n-hexano • fração hexânica : inativa • evapora-se o MeOH e a fase aquosa é extraída com EtOAc • fase EtOAc contém toda a atividade • filtração em gel de sílica e ensaio biológico
Efeito de uma fração do extrato de Melia azedarach, contendo azadirachtina A, sobre a ecdise de larvas de 4º estágio de Rhodnius prolixus • controle - 10 mg/ml - 25 mg/ml azadirachtina A
Isolamento de cinamodiol triterpeno inédito da série do eufano • particularidades: • posição da lactona (21-16) • hidroxila em C-12 • hidroxila b em C-3 • Atividade biológica em • Rhodnius prolixus : • provoca ligeiro atraso da muda • inibe a ecdise em 27% na conc. de 10 mg/ml cinamodiol
Isolamento de quatro lignanas 1 2 , 2 bis-epi-pinoresinol , 3 hemicetal , 4 diácido 3 4 1 pinoresinol
Atividades biológicas de pinoresinolem Rhodnius prolixus 1. Toxicidade tratamento contínuo Fagorrepelência via repasto sangüíneo
Atividades biológicas de pinoresinolem Rhodnius prolixus 2. Anti-ecdise Tratamento contínuoRepasto sangüíneo Legenda: controle ; pinoresinol : 1 , 10, 50, 100 & 500mg/ml
Atividades de lignanas em insetos matairesinol: • inseticida • exerce ação sinergística • eudesmina: • fagorrepelente • sesamina: • inibe o crescimento e • mimetiza o hormônio juvenil
Ação de lignanas e neolignanasem Rhodnius prolixus podofilotoxina burchelina em 10 mg/ml • não é fagorrepelente • atrasa a muda em 6 dias • inibe a ecdise em 50% • altamente tóxica • inibe a diurese em ~90% • não é fagorrepelente • atrasa ligeiramente a muda • não inibe a ecdise • não é tóxica • inibe a diurese em até 80%
Análise em CG-EM da hemolinfa de Rhodnius prolixus tratado com 100 mg/ml de burchelina 1a : cromatograma (CG) da hemolinfa coletada 30 min após o repasto 1b : cromatograma (GC) da hemolinfa coletada 1 hora após o repasto
Identificação dos produtos de degradação da burchelina (1) na hemolinfa de Rhodnius prolixus
Mecanismo provável da degradação da burchelina a degradação ocorre principalmente a nível do anel furânico
Preparação de derivados do álcool piperonílico Agradeço pela sua atenção CNPq, DAAD, FAPERJ