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Canaletas 1 & 2 visíveis (seria pellet e raw extract ?)

Luz normal. 50 kDa. Bate com banda no SDS PAGE?. Membrana grupo 2/3 (marcada). Canaletas 1 & 2 visíveis (seria pellet e raw extract ?). quimioluminescência. P S F E PM P S F E. Grupos 4,5. Grupos 2,3.

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Canaletas 1 & 2 visíveis (seria pellet e raw extract ?)

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Presentation Transcript

  1. Luz normal 50 kDa Bate com banda no SDS PAGE? Membrana grupo 2/3 (marcada) Canaletas 1 & 2 visíveis (seria pellet e rawextract?) quimioluminescência

  2. P S F E PM P S F E Grupos 4,5 Grupos 2,3 P, fração pellet, S, sobrenadante clarificado, F, sobrenadante após coluna , E, eluição fração 2 de 5

  3. Resultado PCR amplificaçãoarginase PM 1 2 3 4 5 2300 2100 ? Duasbandas? 570 Primer-dimer 107

  4. Teste realtimePCR-oligosarginase (amplicon de 80 nt) PM: pcDNA3 Rsa1/Bgl2-EcoR1 digest PM 1 2 neg 1: ~0,2 uggDNA 3D7 2: 0,1 ugcDNA 14 h trofozoitas Neg: controle sem template 926 487 255 170/157 107 55

  5. Resultados arginasetranscriptso-o

  6. Resultados crús

  7. Melting curve – curva de dissociação

  8. 12 MiniprepspASK/IBA3 arginase H218A, digestão com Nae3 PM * 1 2 3 4 5 6 7 8 4500 2418 1688 926 487 9 10 11 12 PM Gel de TAE agarose 1% PM: digestão pcDNA3 Rsa1/EcoR1-Bgl2 *É um dos plasmídeos sem enzima de restrição Nae3 Note que o tampão HB1 acidentalmente não continhaRNAse A.

  9. Não tenho foto de um gel dos clones pASK/IBA3 com arginasewildtypeclonado

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