1 / 22

8. laboratorijas darbs. DNS gelelektroforēze.

Studiju kurss Ievads molekulārajā un šūnas bioloģijā. Bloks Dzīvības ķīmija , molekulārā bioloģija. 8. laboratorijas darbs. DNS gelelektroforēze. Reinis Rutkis Māris Lazdiņš LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra. Gelelektroforēzes iekārta. Gelelektroforēzes iekārta.

dayton
Download Presentation

8. laboratorijas darbs. DNS gelelektroforēze.

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Studiju kurssIevads molekulārajā un šūnas bioloģijā Bloks Dzīvības ķīmija, molekulārā bioloģija 8. laboratorijas darbs. DNS gelelektroforēze. Reinis Rutkis Māris Lazdiņš LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  2. Gelelektroforēzes iekārta LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  3. Gelelektroforēzes iekārta LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  4. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  5. Kas ir elektroforēze? Elektroforēzes pamatā ir lādētu daļiņu pārvietošanās elektriskajā laukā. + + + Katods Anods LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  6. O O O O P O P O - O O - DNS pavediena uzbūves shema Fosfodiestera saite Purīnu vai pirimidīnu bāze Pentoze vides pH ~ 8 negatīvs lādiņš LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  7. Elektroforēze  - potenciālu starpība starp elektrodiem (V) l – attālums starp elektrodiem  lq E – elektriskā lauka intensitāte (stiprums) =/l (V/cm) F =EqF=ma a=F/m=Eq/m + + LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  8. Elektroforēze Ja tas notiktu vakuumā, lādētās molekulas paātrinātos un ātri sasniegtu elektrodus. Vidē, kurā parasti veic elektroforēzi, - viskozitātes dēļ, - dēļ daudzām sadursmēm starp molekulām LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  9. Elektroforēze daļiņu kustība ir apgrūtināta, - tā notiek lēnāk, - ir vairāk atkarīga no - daļiņas lieluma un - ģeometriskās formas. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  10. Elektroforēzes vēsture + Pirmās elektroforēzes tika veiktas U veida caurulēs, cukuru šķīdumos. Pētāmo vielu sadalījuma atšifrēšana bija sarežģīta un sadalījums nestabils. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  11. Elektroforēzes vēsture Metodi 1937. gadā ieviesa zviedru ķīmiķis Arne Tiselius. (1902 - 1971) Panākumi tika atzinīgi novērtēti. 1948. gadā saņem Nobela prēmiju. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  12. Elektroforēzes vēsture Lai būtu vieglāk saglabāt vielu sadalījumu, sāka lietot nesējus: - papīru un - cietes gēlus. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  13. Elektroforēzes vēsture Taču arī šie nesēji deva diezgan nekvalitatīvu ainu. Vēlāk kā optimālākie nesēji izrādījās: - agarozes un - poliakrilamīda gēli. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  14. Elektroforēze nesējos LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  15. Elektroforeze nesējos Zonālā ierobežojošā (restriktīvā) elektroforēze LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  16. Gelektroforēze Agarozes gels Lietojams molekulām, kuru izmēri ir lielāki par 10 nm. Lieto 2-0,5% . 1% poru izmērs 150 nm. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  17. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  18. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  19. Nukleotūdu (bāzu) pāri - bp. (Base pairs) fosfāts 1 4 bp gara DNS molekula (fragments) 2 3 4 hidroksils LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  20. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  21. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  22. Pie darba ? LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

More Related