Download
1 / 25
250 likes | 501 Views
Immunoglobulines. immunochemie. Deze periode. Immunochemie Boek biomedische kennis in het MLO H7-8 Basis: afweer en immuniteit H 3-3-5 immuno chemische technieken Biologie voor het MLO H 8.5 Afweerreacties. Afweer. Binnendringen van micro-organismen pathogenen -> infectieziekten
E N D
Immunoglobulines immunochemie
Deze periode.. Immunochemie • Boek biomedische kennis in het MLO • H7-8 Basis: afweer en immuniteit • H 3-3-5 immuno chemische technieken • Biologie voor het MLO • H 8.5 Afweerreacties
Afweer • Binnendringen van micro-organismen • pathogenen -> infectieziekten • Kolonisatieresistentie van het lichaam (eerste verdediging) • Mechanische barrière • Biologie barrière • Chemische barrière • Immuunsysteem in actie! (tweede verdediging)
Weerstand van imuunsysteem Algemene weerstand Specifieke weerstand Specifieke weerstand Lichaamsvreemde stoffen virussen, bacteriën “Immuniteit” Cellulair afweer- virussen en lichaamsvreemde weefsels (T-lymfocyten) Humorale afweer- vorming antistoffen als reactie op antigenen (B-lymfocyten) • Algemene weerstand • alle micro-organismen • Leukocyten (witte bloedcellen) • Fagocytose (opeten van indringers) • Neutrofiele Granulocyten en Monocyten in het bloed • Macrofagen in de weefsels
Humorale afweer http://www.bioplek.org/animaties/afweer/Blymfocyten.html
Humorale (Specifieke) afweer • Antigeen (Ag) • Zorgt voor herkenning Lichaamsvreemde stof • Virussen, bacteriën • Antistof (Ab) • immunoglobuline • specifiek 1 Ab op 1 Ag • Polyklonale antistoffen • Monoklonale antistoffen • Binding, Ag-Ab complex • gemaakt door B-cellen http://www.schooltv.nl/beeldbank/clippopup/20051109_immuumsysteem02
immunoglobulines Opdracht: Beantwoord de volgende vragen .. • Wat is een immunoglobuline (Ig) en hoe werkt het? • Hoe zijn ze opgebouwd? (biomolecuul, Fab, Fc, lichte keten, zware keten, etc.) • Welke klassen (typen) zijn er in Ig en wat is het verschil? • Welk type wordt bij allergische reacties aangemaakt? En de andere types? • Ig kunnen worden gezuiverd en worden gebruikt voor verschillende doeleinden/toepassingen. Welke? +/- 15 min
Principe: Eenmonoklonaleantilichaambindt met de stof (antigeen) waartegenhijgericht is. Alsdezestofaanwezig is in een monster zalereen binding optreden. Bijsommigetechniekenwordtdeze binding zichtbaargemaakt door middel van een label Hogeconcentratie – vormingneerslag en vertroebeling (Precipitatie reacties ) Lagereconcentraties – samenklonteren van antigenen en cellen (agglutinatiereacties) Erg lageconcentraties- labelen van antigenenvbFluoriscerend, radioactiefenzymen, luminescentie (Elisa – Enzym LinkedImunnosorbentAssay,Fluorescentie microscoop analyse) Immunochemische technieken
Agglutininen - antilichamen (antistoffen) Agglutinogenen- antigenen agglutinatie Wat is agglutinatie? een verschijnsel wat optreedt wanneer antilichamen reageren met antigenen op het celmembraan waardoor er een binding en vervolgens een samenklontering plaatsvindt
Agglutinatie reacties Toepassingen • Bloedgroep bepalingen • Bloed transfusies • Antigeen bepalingen • Zwangerschap – rhesus+ baby • Detectie antilichamen - ziekte beeld • Identificatie bacteriën en schimmels
Bloed transfusies Opdracht!! Zie stencils. Compatibiliteit agglutinatie test
Waaromkan je somsweleenbepaaldebloedgroepontvangen maar nietdoneren? Bloed transfusies Universele bloeddonor = ? Universele bloedontvanger= ?
Immunochemische technieken • Precipitatie tests • Agglutinatie tests • Immunoassay - ELISA
Immuno assay • 3 belangrijke onderdelen • Binding van de te bepalen stof met een specifieke antistof (immunoglobuline) • Zeer gevoelige detectiemethode • Verwijdering overmaat antistof en overmaat label
Productie antilichamen • Polyklonaleantilchamen • Kanafkomstigzjn van dier of mens • Mens of dierkrijgtinjectiemetantigeen van ziekteverwekker (immunoniseren) • meerderemonoklonaleantichamen met 1 specfiteit • Maar zijnnietallemaalgelijk (gericht op verschillendedelen van het molecuul (ziekteverwekker) • Kwaliteit is niet constant – geen 1 dier of mensreageerthetzelfde • ProductieMonoklonaleantilichamen • Muisinjecteren met antigeen van ziekteverwekker (immunoniseren) • Celoogstenuit de milt van eenmuis • Fusie met Tumor cellen (snellereceldeling) vormthybrdecel • Selectie van 1 hybridecel • Kloon (celkweek van 1 hybridecel) • productie van onbeperktantilichaam Oefening: • http://biologiepagina.nl/Oefeningen/Monoklonaleantistof/monoklonaleantistof.htm
ELISA test • Enzym LinkedImmunoSorbent Assay • Immunochemische test • Binding tussen antigenen en antilichamen • Primaire en secundaire antilichamen • Rol Enzym zorgt voor kleurreactie -> detectie • Opbouw van de test kan variëren –twee typen
Soorten ELISA’s • Indirect ELISA • Plaat: Antigeen • antilichaam • directe ELISA (sandwich) • plaat: primaire antilichaam • Antigeen • Secundaire antilichaam
Toepassingen ELISA • HIV Testen • Detectie op HIV virus antigenen • Zwangerschapstesten • Detectie op zwangerschaps hormoon (hCG) • Medicijnen • Bv. residuen van dierbehandelingsmiddelen, • (milieu) contaminanten, • pesticiden • Allergieën • (allergene) eiwitten in voedselproductieketens. Bijvoorbeeld in hazelnoten. • Plant pathologie • Bloembollen keuringsdienst • virustoetsen
Opdracht Leg uit hoe je met een ELISA test illegaal drugs gebruik kan detecteren van ten minstens 15 verschillende drugs? Welk type ELISA test zou je gebruiken? Hoe zou je ELISA test inrichten (op de microtiterplaat)?
