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OPTION EQUINE II – SYSTEME DIGESTIF

OPTION EQUINE II – SYSTEME DIGESTIF. 1 - PATHOLOGIES BACTERIENNES 2 – APPROCHE DIAGNOSTIQUE Annick Linden Service de Bactériologie Dpt. des Maladies Infectieuses et Parasitaires. DIARRHEE : CAUSES BACTERIENNES 1. Nv-né 2. Poulain 3. Adulte 4. Diarrhées induites par les ATB.

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OPTION EQUINE II – SYSTEME DIGESTIF

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  1. OPTION EQUINEII – SYSTEME DIGESTIF 1 - PATHOLOGIES BACTERIENNES 2 – APPROCHE DIAGNOSTIQUE Annick Linden Service de Bactériologie Dpt. des Maladies Infectieuses et Parasitaires

  2. DIARRHEE : CAUSES BACTERIENNES 1. Nv-né 2. Poulain 3. Adulte 4. Diarrhées induites par les ATB

  3. DIARRHEE : CAUSES BACTERIENNES 1. Nv-né - E coli, Actinob. sp, Salm : contexte septicémique - Clostridium sp 2. Poulain - Salmonella sp - Clostridium sp - Rhodococcus equi - E coli - Campylobacter - Streptococcus durans - Bacteroides fragilis 3. Adulte - Salmonella sp - Clostridiose - Colitis "X" - Potomac Horse Fever 4. Diarrhées induites par les ATB

  4. CAUSES INFECTIEUSES RESPONSABLES DE MORT BRUTALE (< 24 H) CHEZ LE CHEVAL Shaker-foal syndrome Clostridium botulinum (type B) Hépatite chez le poulain Clostridium piliforme (Tyzzer’s disease) Septicémies néonatales Actinobacillus equuli E coli, Salmonella sp Septicémies chez l’adulte Bacillus anthracis, … Entérotoxémies Clostr perfringens, difficile, sordellii Myopathies d’origine clostridienne Clostr septicum, chauvoei, novyi,perf, Colite aiguë et csq Neo risticii, Salmonella sp Colitis « X » Clostridium sp Hémorragie poches gutturales Mycose

  5. DIARRHEE : CAUSES BACTERIENNES Nv-né - Septicémie : E coli, Actinob. sp, Salm - Clostridium sp 1 – Actinobacillus equuli " Maladie du poulain triste " (avt : Shigellose du poulain) Changements récents dans la taxonomie Actinobacillus equuli subsp equuli Actinobacillus equuli subsp haemolyticus (taxon 11 de Bisgaard) Coccobacilles Gram nég, aéro-anaérobies coloration bipolaire, immobiles, non sporulés gélose au sang, 5 % CO2 A equuli equuli : col visqueuses, adhérentes, non hémo A equuli haemolyticus : hémolytiques

  6. Actinobacillus equuli equuli Bactéries commensales muqeuses (Resp et Dig) des chevaux ---- Pathogènes opportunistes Souches flore normale = Souches isolées de lésions A. equuli equuli : Cv (poulain, adulte), porc A. equuli haemolyticus : que chez les chevaux (poulain, adulte) Actinobacillus sp

  7. Contexte de septicémie : transfert immunité passive ? • Début brusque : 24-48 H • Poulain fort abattu, refuse de têter • Fièvre n’est pas constante • Diarrhée et troubles respiratoires • Articulations douloureuses • Arthrites fréquentes si survie • Tableau parfois discret (cfr MIGA) : diagnostic précoce difficile Septicémies néonatales chez le poulain : Actinobacillus sp est une cause de mortalité fréquente Actinobacillus sp

  8. DIAGNOSTIC ANTE MORTEM Diagnostic précoce = ttm précoce = meilleur pronostic Clinique « Score septique » : WBC, fibrinogène, glycémie, IgG Hémocultures : OK en théorie mais : matériel adéquat plusieurs hémocultures nécessaires/24h risque de faux négatifs interprétation des résultats 24 - 48H pour avoir les résultats DIAGNOSTIC POST MORTEM Lésions macro Prélèvements de choix : reins, poumons Diagnostic précis : confusion possible avec Pasteurella Actinobacillus sp

  9. Traitement (Actinobacillus sp) Péni-Genta TMP/S Céphalosporines III G Etude en Suède 97 % des souches Act sensibles à TMP/S 92 % Ampi 90 % Péni 85 % Genta 49 % Strepto Prévention Pas de vaccins commerciaux Mesures d'hygiène (accouchement), colostrum ! Actinobacillus sp

  10. DIARRHEE : CAUSES BACTERIENNES 1. Nv-né - E coli, Actinob. sp, Salm : contexte septicémique - Clostridium sp 2. Poulain - Salmonella sp - Clostridium sp - Rhodococcus equi - E coli - Campylobacter - Streptococcus durans - Bacteroides fragilis 3. Adulte - Salmonella sp * - Clostridiose * - Colitite "X" - Potomac Horse Fever * Diarrhées induites par les ATB

  11. Sphère Digestive 2 - Clostridium sp • Clostridium tetani • Clostridium botulinum • Clostridium perfringens • Clostridium sordellii • Clostridium difficile • Clostridium cadaveris

  12. Clostridium perfringens Bâtonnets réguliers Gram +, anaérobies, sporulés • Toxines majeures a b1 b2 e i • Toxines mineures

  13. CLOSTRIDIUM PERFRINGENS Photos

  14. CLOSTRIDIUM PERFRINGENS Photos

  15. Clostridium perfringens Poulain : toxinotypes B et C Adulte : toxinotype A

  16. 5 DIFFERENT TOXINOTYPES MAJOR TOXINS MINOR TOXINS SPORULATION PHASE VEGETATIVE PHASE

  17. TOXINS C. SEPTICUM C. SORDELLII C. DIFFICILE C. PERFRINGENS DIGESTIVE TRACT

  18. Clostridium sp chez le poulain • (1) C. perfringens Type B et C surtout (toxine b sensible à la trypsine) • Susceptibilité du nv-né (absence de protéases intestinales • et inhibiteur de trypsine dans colostrum) • Sporadique sauf exception • Poulain de 1 ou 2 jours • Soit mort brutale • Soit signes systémiques, diarrhée hémorragique et mort en 2 J • Diagnostic • lésionnel : entérite hémorragique nécrosante • bactériologique : aspect quantitatif ! • Traitement (cibler surtout déshydratation) • Si ATB: métronidazole (cfr législation), Péni • Probiotiques (compétition de flore : Clostr versus Lactobacillus sp)

  19. TOXINOTYPE C (a, b) IN NEWBORN ANIMALS Photos

  20. TOXINOTYPE C (a, b) IN NEWBORN ANIMALS ABSENCE O b TOXIN TRYPSIN SENSITIVE (anti-trypsin activity in colostrum) ABSENCE OF NORMAL INTESTINAL FLORA BRUTAL DIET CHANGES ARE RISK FACTORS

  21. TOXINOTYPE C : a, b+ MINOR TOXINS Photo ENTERITIS NECROTICANS IN HUMAN

  22. Clostridium sp chez le poulain (2) C. difficile chez des poulains avec/sans ATB poulains de 3 à 5 jours, cas mortels entérite hémorragique nécrosante mise en culture délicate, milieux spécifiques Larges bâtonnets à Gram +, anaérobies stricts, svt mobiles Spores subterminales, ovales et déformantes Bactérie ubiquitaire sols, eaux, flore intestinale, … milieu hospitalier : spores !! désinfectants à base d’hypochlorite TOXINES Toxine A (entérotoxine) : cfr diagnostic Toxine B (cytotoxine) Toxine binaire

  23. Clostridium sp chez le poulain (2) C. difficile • Nombreux poulains ( < 14 J) sont porteurs de Clostridium difficile !

  24. Clostridium sp chez l'adulte 1. Clostridiose intestinale Clostridium perfringens type A, C. difficile, C. cadaveris Dérive de flore – facteurs favorisants (alimentation, stress, ATB ..) Fièvre, anorexie, dépression, douleur abdo, diarrhée aiguë Entérite aiguë hémorragique segmentaire (cfr photo) Approche qualitative des Clostridies – recherche des toxines 2. 3.

  25. a TOXIN = PHOSPHOLIPASE C ATTACKS CELLS MEMBRANE CELL DEATH erythrocytes, platelets, leukocytes, endothelial and muscle cells, …

  26. a toxin Photos

  27. POUR INFO …… A NOVEL TOXIN : B2 TOXIN • NECROTIC ENTERITIS IN PIGLETS (GIBERT ET AL. 1997) b2 PURIFIED FROM C. PERF TYPE C Photos

  28. B2 TOXIN • PROTEIC MAJOR EXOTOXIN (265 Aa, 28 kDa) • LETHAL FOR MICE AND TOXIC FOR CELLS IN CULTURE • APPARENT PROTEIN INSTABILITY • Cpb2 GENE IS PLASMIDIC (MOBILITY) • C. PERF TYPE A (++), C, D, E, (B)

  29. Cpb2-POSITIVE STRAINS (C.PERF TYPEA) ASSOCIATED WITH ENTERITIS : • IN PIGLETS (GARMORY ET AL, 2000) • IN HORSES (HERHOLZ ET AL, 1999) • IN DOGS (THIEDE ET AL, 2001) • IN CATTLE • ….IN ELEPHANT (BACCIARNI ET AL, 2001) CAUSE-AND-EFFECT RELATIONSHIP ?? GENE IS PRESENT BUT TOXIN ??

  30. PIGS OK • HIGH LEVEL OF CPB2 + STRAINS IN NEONATAL PIGS WITH ENTERITIS (91.8% VERSUS 11.1 % FROM HEALTHY PIGS) • AND HIGH CORRELATION OF GENOTYPE WITH PHENOTYPE (> 96.9%)(BUESCHEL ET AL, 2003) HORSES • HIGH LEVEL OF CPB2 + STRAINS IN HORSES WITH TYPHLOCOLITIS (HERHOLZ ET AL, 1999) • GENOTYPE/PHENOTYPE ? IMMUNOHISTOCHEMISTRY NEEDS FURTHER INVESTIGATION (BACCIARINI ET AL, 2003)

  31. Clostridium sp chez l'adulte 1. Clostridiose intestinale Clostridium perfringens type A, C. difficile, C. cadaveris Dérive de flore – facteurs favorisants (alimentation, stress, ATB ..) Fièvre, anorexie, dépression, douleur abdo, diarrhée aiguë Entérite aiguë hémorragique segmentaire (cfr photo) Approche qualitative des Clostridies – recherche des toxines 2. Colite "X" Etiologie non déterminée Forte suspicion d'implication des Clostridies (entérotoxémie) Fort semblable au tableau de clostridiose mais évolution plus rapide Pronostic négatif 3. Clostridiose ATB – induite C. perfringens, C. difficile

  32. Clostridium sp chez l'adulte Cas particulier de Clostridium difficile Médecine humaine : principale cause de diarrhée post ATB infection nosocomiale (spores en milieu hospitalier !) Médecine équine : importance croissante de C. difficile ( diagn ++)

  33. Clostridium sp chez l'adulte • Clostridium difficile • Médecine équine : thèse V. Baverud (Suède, 2002) • (1) Colites aiguës et fatales chez cv adultes • groupes à risque : cv hospitalisés et traités ATB • juments dont poulains traités erythro/rif • (2) Exp. Erythromycine induit colite sévère avec prolifération de C.difficile • (3) Portage fréquent de C. difficile chez des poulains sains (<15J) • réservoirs ? • (4) Milieu ext : fermes d’élevage > centres d’entrainement

  34. Clostridium sp chez l'adulte Clostridiose ATB – induite Cas particulier de Clostridium difficile Clinique : coliques, diarrhée parfois hémorragique, déshydratation Diarrhée peut débuter pdt ATB ttm ou qques J après Prudence si cas de diarrhée : envrnmt contaminé +++ Lésions : entérite hémorragique nécrosante Diagnostic : prélèvements répétés de MF (1) Mise en culture rapide, milieu sélectif CCFA(Cycloserine Cefoxitin Fructose Agar) (2) Détection toxine : conserver MF à 4°C car dénaturation rapide kits commerciaux Traitement : Métronidazole reste ATB de choix

  35. Diagnostic • Clinique : Clostridies : diarrhée (+/-) toxémie • Bactériologique • Anaérobiose • Milieux sélectifs • Comptages !! • si post mortem : délai minimum entre mort de l'animal – prélèvement et mise en culture

  36. CLOSTRIDIUM PERF IN HORSESMANAGEMENT IMPROVEMENT SHIFT OF INTESTINAL FLORA RISK FACTORS

  37. DIARRHEE : CAUSES BACTERIENNES 1. Nv-né - E coli, Actinob. sp, Salm : contexte septicémique - Clostridium sp 2. Poulain - Salmonella sp - Clostridium sp - Rhodococcus equi - E coli - Campylobacter - Streptococcus durans - Bacteroides fragilis 3. Adulte - Salmonella sp - Clostridiose - Colitite "X" - Potomac Horse Fever 4. Diarrhées induites par les ATB

  38. 3 - Salmonella sp • Réceptivité : poulain nv-né, poulain sevré et adulte • Importance des facteurs favorisants • Infection nosocomiale • Certains sérovars prédominent dans un envrnmt donné • Problématique des porteurs asymptomatiques • Emergence rapide de souches ATBrésistantes • Résistance des Salmonella dans le milieu extérieur !! • CONDITIONS D'HYGIENE

  39. Salmonellose équine • Septicémie • Entérite aiguë • Entérite chronique

  40. Caractéristiques • Nomenclature des Salmonelles ! • Une seule espèce : Salmonella choleraesuis • 7 sous-espèces dont S. choleraesuis subsp choleraesuis • Nombreux sérovars ( > 2200) : Ag O, Ag H (et Ag Vi) • Sérovars les plus fréquents chez le cheval : • S. typhimurium, S. hadar, S. anatum, S. agona, S. newport, .. ( nomenclature en raccourci !) • Coccobacilles Gram nég, mobiles, Aérobie, cat +, O/F : F • Gassner +, fermentation lactose -, Ox - • Milieux d'enrichissement (tétrathionate), 42 °C • Tests d'agglutination rapide sur lame • Galeries biochimiques de confirmation, PCR

  41. Facteurs favorisants • Environnement contaminé sol ( 1 an), crottins séchés ( > 2,5 ans !), eau ( > 9 mois) • Dose infectante • Stress • ATB (dérive de flore) • Virulence de la souche • Statut immun à haut risque : Milieux hospitaliers !

  42. Clinique – forme gastro-intestinalecfr cours MIGA Souvent 1 à 2 jours avant diarrhée : Abattement – anorexie – et sy associés à l'endotoxémie Hyperthermie ++++ Episodes de coliques – constipation Diarrhée : profuse, liquide, malodorante, pfs hgique Déshydratation rapide Tableau variable depuis entérite légère à mortelle Diarrhée peut durer plusieurs semaines Passage à chronicité possible

  43. Lésions Ulcères gastriques (infarcti veineux – toxine) Typhlo-colite aiguë, hémorragique, pseudomembraneuse foyers nécrotiques foie – rate Infarcti niveau colon (cfr prolapsus rectal)

  44. Diagnostic • Clinique : CV diarrhée aiguë ou chronique : toujours effectuer une recherche Salmonella • Bactériologique ( ante mortem ) • Prélèvement précoce (Salm ++ avant diarrhée) • Prélever dans le rectum (raclage de muqueuse rectale) • Biopsie rectale possible si Mat féc négatives • Conserver au frigo – 2 à 3 jours OK • Multiplier les prélèvements ! • Ne jamais conclure sur base d'un seul résultat négatif • Prévenir le labo d'une demande Salmonella Conseillé : 5 prélèvements à 1 jour d'intervalle

  45. Diagnostic • Clinique • Bactériologique ( post mortem ) • Caecum, colon, iléon (contenu et contenant) • Ganglions mésentériques

  46. Traitement • Fluidothérapie = N°1 • ATBthérapie : controversée ! • AINS Si ATBthérapie décidée : TMP/S, Ampi, AG, Céph ATBrésistances fréquentes et émergence rapide (plasmides) toujours réaliser un ATBgramme cfr rapports du CERVA Pronostic

  47. Prévention et contrôle • Cv infectés en zone d'isolement • Conditions d'hygiène +++++ Bottes, tabliers, matériel, ...! Salmonella résistent à la dessication Nettoyer (eau chaude sous pression) aussi important que désinfecter (ammonium 4°, crésol), fumigation, Attention débris organiques dans pédiluves • Porteurs asymptomatiques (10 à 20 % des cv) • Excréteurs actifs (plusieurs semaines après guérison) conseillé : 5 cultures fécales négatives pour affirmer que le cv n'est plus excréteur actif

  48. DIARRHEE : CAUSES BACTERIENNES 1. Nv-né - E coli, Actinob. sp, Salm : contexte septicémique - Clostridium sp 2. Poulain - Salmonella sp - Clostridium sp - Rhodococcus equi - E coli - Campylobacter - Streptococcus durans - Bacteroides fragilis 3. Adulte - Salmonella sp - Clostridiose - Colitite "X" - Potomac Horse Fever 4. Diarrhées induites par les ATB

  49. 4 - Rhodococcus equi chez le poulain forme gastro-intestinale de rhodococcose associée ou non à la forme pulmonaire douleur abdominale, perte de poids, diarrhée isolement de Rh equi dans M féc : pas un indice de diagnostic déterminer virulence des souches (plasmide de virulence) cfr diagnostic et ttm de la forme pulmonaire 5 - E coli (cfr septicémie) 6 - Campylobacter : rôle controversé 7 - Streptococcus durans 8 - Bacteroides fragilis

  50. DIARRHEE : CAUSES BACTERIENNES 1. Nv-né - E coli, Actinob. sp, Salm : contexte septicémique - Clostridium sp 2. Poulain - Salmonella sp - Clostridium sp - Rhodococcus equi - E coli - Campylobacter - Streptococcus durans - Bacteroides fragilis 3. Adulte - Salmonella sp - Clostridiose - Colitite "X" - Potomac Horse Fever 4. Diarrhées induites par les ATB

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