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Influência do genótipo no potencial regenerativo de feijão-caupi cultivado in vitro. Dra. Laureen Michelle Houllou-Kido Lab. Genética Molecular - UFPE. Cultura de tecidos no gênero Vigna. V. radiata, V. mungo, V. vexillata, V. sinensis, etc Tecidos vegetais Cotilédones Eixo embrionário
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Influência do genótipo no potencial regenerativo de feijão-caupi cultivado in vitro Dra. Laureen Michelle Houllou-Kido Lab. Genética Molecular - UFPE
Cultura de tecidos no gênero Vigna • V. radiata, V. mungo, V. vexillata, V. sinensis, etc • Tecidos vegetais • Cotilédones • Eixo embrionário • Ápices caulinares • Folhas jovens • Recalcitrância
Dados gerais • Quantidade de fitorregulador (BAP, TDZ) • 2 a 35 mg.L-1 • Percentual de regeneração • De 1 a 52% • Número de plantas por explante • De 1 a 12 / explante
Cultivares testadas • IPA 206 • IPA 207 • IT 85F • BR 14 Mulato • Guariba
Indução de regeneração • Fitorregulador: • BAP ou TDZ (sugestão – tratamento durante 15 dias com 15 mg.L-1 de BAP com posterior transferência para meio zero) • β-arabinogalactan (efeito estimulatório da regeneração via cotilédone)
Necessidade de fitorregulador • IPA 206 e IPA 207 • Regeneração ocorre na ausência de fitorregulador • BAP acelera o processo regenerativo e estimula a regeneração. • Demais cultivares testadas • Necessitam de um estímulo (BAP) para iniciar a regeneração
Hipóteses: • Diferença nas quantidades endógenas de fitorregulador • Diferença na quantidade dos receptores na membrana celular (Células responsivas)
Características indicadoras de potencial regenerativo • Intumescimento do tecido • Alteração da coloração • Parcial ou total
Regeneração via cotilédones • Início • Com aproximadamente três semanas • Região do explante • Área em que foi retirado o embrião
Regeneração via cotilédones IT85F IPA 206
Diferentes momentos da regeneração in vitro de feijão-caupi a partir de cotilédones
Cotilédone Organogênese direta
Regeneração via cotilédones • Associada a restos da epiderme do embrião • Observada, na maioria dos casos, em apenas um dos cotilédones
Regeneração via eixo embrionário • Início • Com aproximadamente quatro semanas • Região do explante • Próxima a região do meristema apical (polaridade da regeneração)
Meristemas Organogênese direta IPA206
Indução de calos organogênicos • Ambos explantes respondem ao 2,4 –D • Resposta também é cultivar específica • Coloração esverdeada do calo indica potencial regenerativo • Efeito do NaCl
Indução de calos IPA 206
Aclimatação • Baixa taxa de sobrevivência (20%) • Alternativa • alteração do hormônio para indução do desenvolvimento do sistema radicular • Alteração do substrato utilizado na aclimatação
Desenvolvimento in vivo das plantas regeneradas • Todas as plantas produziram flores e sementes (não afetou a fertilidade) • Variação somaclonal – Novas características (porte, precocidade) • Características variantes são herdáveis (S2).
Agradecimento • UFPE • EMBRAPA • IPA • UPE • FACEPE • BNB • FINEP