Lucila Babio, Lucía De Stefano, Jessica Solano

1. Regulación de la secreción de ecdisteroides del órgano Y por la hormona inhibidora de la muda en el cangrejo americano Procambarus clarkii Lucila Babio, Lucía De Stefano, Jessica Solano

2. SISTEMA ENDÓCRINO Sistema de coordinación. Recibe señales, procesa la información recibida y elabora la respuesta adecuada que deben realizar los órganos receptores de las hormonas. Invertebrados mayormente hormonas secretadas por células nerviosas estímulo crecimiento, maduración sexual, pigmentación… Crustáceos muda control hormonal Lateral a las mandíbulas órgano Y ecdisteroides pedúnculo ocular órgano X MIH (hormona inhibidora de la muda)

3. ÓRGANO X MIH Período entre mudas _ ÓRGANO Y Período pre-muda ECDISTEROIDE HIPÓTESIS MUDA

4. OBJETIVO Demostrar si MIH funciona como un regulador fisiológico de la muda in vivo METODOLOGÍA Machos adultos de P. clarkii (cangrejo americano) Determinación de MIH en hemolinfa durante el ciclo de muda (TF-FIA) Examen de efectos de la inyección de MIH en la actividad secretoria del órgano Y, el nivel de ecdisteroides en hemolinfa y el intervalo de muda.

5. Niveles de MIH en hemolinfa durante la intermuda NO hay cambios significativos en los niveles diurnos y nocturnos de MIH NO hay ritmo diurno de secreción Hemolinfa se recolectará durante el día Fig.1. Cambios de Prc-MIH en hemolinfa en la intermuda bajo fotoperíodo de 12 hs L - 12 hs O. En Carcinusmaenasse observaron cambios diurnos en la cantidad de MIH presente en la hemolinfa durante el estadio de intermuda.

6. Comparación niveles de MIH y ecdisteroides en hemolinfa durante el ciclo de muda. Fig.2. Cambios en los niveles de Prc-MIH (A) y de ecdisteroides (B) en hemolinfa durante el ciclo de muda. Estadio pre-muda media: Prc-MIH ecdisteroides Hipótesis: MIH regula negativamente la secreción de ecdisteroides contradicción

7. Cambios en la sensibilidad del órgano Y frente a MIH in vitro La sensibilidad del órgano Y cambia según los estadios de muda. Fig.3. Cambio en la sensibilidad del órgano Y debido a Prc-MIH durante el ciclo de muda.

8. Efectos de la inyección de MIH en la muda NS S S NS Avala lo obtenido anteriormente La sensibilidad del órgano Y cambia según el estadio del ciclo de muda

9. Efectos de la inyección de MIH en la muda Fig.4. Efecto de la inyección de Prc-MIH en la secreción de ecdisteroides (A) y su concentración en la hemolinfa (B). • Prc-MIH inhibe la secreción de ecdisteroides del órgano Y tanto in vivo como in vitro • El efecto inhibitorio de Prc-MIH en el órgano Y es reversible

10. Recopilando… • Intermuda[Prc-MIH] Órgano Y inhibido por Prc-MIH • Pre-muda temprana[Prc-MIH], órgano Y liberado, [Ecdisteroides] • Pre-muda media[Prc-MIH] pero [Ecdisteroides] • Efecto NO inhibitorio de la Prc-MIH sobre Órgano Y • Pre-muda tardía [Prc-MIH] [ecdisteroides] • Pero no hay respuesta inhibitoria ¿Feedback ̶ ? • Post-muda[Prc-MIH] Órgano Y vuelve a estar inhibido

11. Discusiones • Los niveles de Prc-MIH en hemolinfa sólo decrecen en la pre-muda temprana. Contrario a la hipótesis, donde se espera que las concentraciones de MIH y ecdisteroides estén inversamente relacionadas • Durante los estadios de pre-muda media y tardía a pesar de haberse encontrado Prc-MIH en la hemolinfa, no ejerce inhibición sobre el órgano Y.

12. El ciclo de muda puede ser regulado no sólo por la concentración de MIH en la hemolinfa, sino también por la sensibilidad del órgano Y a la MIH. ¿Cambios en la sensibilidad del órgano Y a la MIH debido a cambios en las señales de transducción intracelulares de ese mismo órgano? ENTONCES… Puede decirse que el ciclo de muda es regulado por un sistema más complejo que el asumido hasta entonces, que se enfocaba en los cambios de síntesis y secreción de la MIH.

15. ¡¡GRACIAS!!