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Staphylococcus aureus

Staphylococcus aureus. Laboratorio de Microbiología de Alimentos. Staphylococcus aureus. Dos Métodos. Sólido > 100 S. aureus /g Líquido < 100 S. aureus /g. Baird-Parker Agar. Cloruro de Litio – Selectivo S. aureus can tolerate Glicina – Selectivo S. aureus puede tolerarlo

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Presentation Transcript

  1. Staphylococcus aureus Laboratorio de Microbiología de Alimentos

  2. Staphylococcus aureus

  3. Dos Métodos • Sólido • > 100 S. aureus/g • Líquido • < 100 S. aureus/g

  4. Baird-Parker Agar • Cloruro de Litio – Selectivo • S. aureus can tolerate • Glicina – Selectivo • S. aureus puede tolerarlo • Tellurite – Selectivo and Diferencial • Reducción a telurio (negro) • Yema de huevo – Diferencial • S. aureus Rompe la yema de huevo y deja zona clara

  5. Método Sólido - Placas • Debe utilizarse la técnica de esparcido • NO puede ponerse 1 ml en la placa • No se absorverá en el medio • DEBE distribuirse 1 ml en 3 placas 0.3 0.3 0.4

  6. Método Sólido • Incube Invertido a 35 C por 45-48 h • Cuente las placas con 20-200 colonias • Colonias Grandes • Colonia típica • Gris/Negra, suave, circular, convéxa y húmeda • 2-3 mm díametro • Zona clara alrededor de la colonia

  7. Método Líquido - MPN • Medio • 10% NaCl Trypticase Soy Broth • Utilice 3 Tubos MPN • Incube a 35 C por 48 h • Transfiera los positivos (loop) a Baird-Parker Agar • Positivos – TSA Agar y Prueba de Catalasa

  8. Prueba de Coagulasa • Determina si Staph aglutina plasma • SIEMPRE • UILICE UN CONTROL POSITIVO • Coagulasa es una enzima producida por S. aureus • Si 4+ - Probablemente sea S. aureus • 1+ to 3+ - Requiere más pruebas

  9. Otras Pruebas • Fermentación Anaeróbica de Mannitol y Glucosa • Fermentación de carbohidratos con media conteniendo 0.5% mannitol/glucosa (dos tubos separados) • Producción de ácid, NO gas – Positivo para S. aureus • Prueba de Catalasa • Tome de “slant” de medio no-selectivo (TSA) • Ponga el cultivo en laminilla • Producción de burbújas - Positivo

  10. Otras Pruebas • Sensitividad Lisostafin • Lisostafin es una enzima producida por OTRAS Staph que causa lisis de S. aureus • Lysostafin se anade a amortiguador de fosfato salina • Incubar 2 horas a 35 C • Positivo – Tubo claro (lisis) • Negativo - Turbio

  11. Otras Pruebas • Prueba de termostabilidad Nucleasaa Test • Enzima Producida por S. aureus • Estable al calor • Degrada DNA • Hierva un cultivo en BHI por 10 min • Estriado en Toluinine Blue – Deoxynucleic Acid Agar • Incube por 24 h a 35 C • DNA +Dye – Azul (negativo) • No DNA – Rosado (positivo)

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