560 likes | 1.05k Views
Biotechnol ógia. Anaerob biotechnol ógia Immobilizálás. Anaerob biotechnológia. Aerob - Anaerob. Aerob Obligát anaerob Fakultatív aerob Mikroaerofil Aerorezisztens. Aerob - Anaerob. Cukorból Piroszőlősavig egyezik Anaerob : szerves savak Aerob : CO 2 + ATP. Szén - kén körforgás.
E N D
Biotechnológia Anaerob biotechnológia Immobilizálás
Aerob - Anaerob • Aerob • Obligát anaerob • Fakultatív aerob • Mikroaerofil • Aerorezisztens
Aerob - Anaerob • Cukorból • Piroszőlősavig egyezik • Anaerob: szerves savak • Aerob: CO2+ ATP
REDUKCIÓ Oxidálószer + e-→ termék Elektron akceptor = Oxidációs szám csökken Oxidáció Redukálószer → termék + e- Elektron donor = Oxidációs szám nő Redox folyamat
Redox pár • Nernst egyenlet • -60 mV/pH e- • -30 mV/pH 2e- • E ≤ -300 mV
Anaerob anyagcsere • Fermentáció • Terméke • piroszőlősav • szerves sav, pl. acetát, laktát • energia, oxidált koenzim • Anaerob légzés
Anaerob anyagcsere • Fermentáció • Anaerob légzés • Nitrát redukció, denitrifikálás • Szulfát vagy kén redukció • Metanogenezis • glükóz + 3NO3- + 3H2O → 6HCO3- + 3NH4+, ΔG0' = -1796 kJ • glükóz + 3SO42- + 3H+→ 6HCO3- + 3SH-, ΔG0' = -453 kJ • glükóz + 12S + 12H2O → 6HCO3- + 12HS- + 18H+, ΔG0' = -333 kJ • AEROB ΔG0' = -2844kJ
Anaerob körülmények biztosítása • Anaerob munkahely • Kontrollált anaerob környezet • Szabad kézzel lehet dolgozni • Steril • Zsiliprendszer
Anaerob tenyésztés sajátosságai • Hosszú “lag” fázis • A rendszer anaerobbá válik • Sejtszám nem nő • Redox potenciál csökken
Anaerob tenyésztés sajátosságai • Anaerob baktérium spórájából nem fejlődik aktív sejt -120 mV redox potenciál alatt • CRP = culture redox potential ≠ belső redox potenciál
Anaerob tenyésztés sajátosságai • Kevert kultúrák • Szintrópia • Két mikróba egymás működését segíti, kölcsönös előnyöket biztosítva a partnereknek
"S" törzs: 2 CH3CH2OH + 2 H2O = 2 CH3COO- + 2 H+ + 4 H2 ΔGo' = +19 kJ / 2 mol EtOH „H" törzs: CO2 + 4 H2 = CH4 + 2 H2O ΔGo' = -131 kJ / mol CH4 Szintrópia – fajok közötti H2 átadás • Methanobacillus omelianskii • Etanolból ecetsav anaerob úton • Termodinamikailag nem megy • Szintrópia Együttes reakció: 2 CH3CH2OH + CO2 = 2 CH3COO- + 2 H+Δ Go' = -112 kJ / mol CH4
Listeria monocytogenes • Gram + • Emberben 10% előfordul tünet nélkül • Súlyos idegrendszeri gyulladásokat okoz • Monocitákat, makrofágokat, leukocitákat támad • Sejtbe bejut • Vérrel fertőz
Staphylococcus • Gram +, sokan ártalmatlanok • Bőrön, nyálkahártyákon • S. aureus - patogén
Immobilizálási technikák: prokarióta • Bezárás
Immobilizálási technikák: prokarióta • Felületi adszorpció
Immobilizálási technikák: prokarióta • Keresztkötés
Immobilizálási technikák: prokarióta • Makropórusos hordozó
Immobilizálási technikák: prokarióta • Szűrés
Immobilizálási technikák: prokarióta • Felületi kitapadás
Immobilizálási technikák: prokarióta • Természetes aggregátumok
Immobilizálási technikák: eukarióta • Roller bottle
Immobilizálási technikák: eukarióta • Sima felületű mikrohordozó
Immobilizáló mátrixok • Alginát • D-mannuronsav • L-güluronsav • Zegzugos kopolimer • Kétértékű kation: Ca2+ • Keresztkötés • Ionos kötés • Gyenge • Koncentráció függő • Pórusméret: 1-15 μ
Immobilizáló mátrixok • Alginát • D-mannuronsav • L-güluronsav • Zegzugos kopolimer • Kétértékű kation: Ca2+ • Keresztkötés • Ionos kötés • Gyenge • Koncentráció függő • Pórusméret: 1-15 μ
Alginát immobilizálás • Na-alginát • Viszkózus folyadék • Sejtekkel keverés • Cseppek • 50 mM CaCl2 oldatba • 0,5-2 mm átmérő • Biológiailag lebontható • Szárítva tárolható
Immobilizáló mátrixok • Pektin • D-galakturonsav • Ca2+ só • Mechanikai stabilitás nagy • Keresztkötő szer kell • Glutáraldehid • Polietilénimin
Immobilizáló mátrixok • Pektin • Növényi sejtfal alkotó • Különböző mértékben észterezett • GRAS • probiotikum
Immobilizáló mátrixok • Controlled pore glass • Kétféle üveg keverék • Borát + szilikát • Egyiket kioldják • Térhálós szerkezet • Mechanikai stabilitás • Sterilezhető • Felület derivatizálható • Sejt, molekula megkötés • kromatográfia
Immobilizáló mátrixok • Controlled pore rubber • Kétféle gumi keverék • Egyiket kioldják • Térhálós szerkezet • Mechanikai stabilitás • Sterilezhető • Sejt, molekula megkötés
Immobilizáló mátrixok • Poliuretán • Izocianát + alkohol + katalizátor • Adalékokkal sokféle • Forma • Keménység • Víznél könnyebb • Aerob mikrobáknak • Biológiailag NEM lebontható
Immobilizáló mátrixok • Poliuretán • Nagy, inert felület • Levegő szűrő biofilterekben
Biotechnológia • Pezsgőgyártás • Üvegbe félig érlelt bor + cukor + élesztő • Parafadugó • 1-3 év érlelés után élesztő eltávolítás forgatással • Nyak fagyasztása • Élesztő “kilövés” • Helyére aroma + konyak • CO2 serkenti az EtOH felszívódását (!)
Biotechnológia • Pezsgőgyártás • Élesztő alginátban • “kabátolás” • Kitin, kitozán • Érlelés = szabadon lebegő élesztő • Ülepítés gyorsan, hatékonyan
Biotechnológia • Pezsgőgyártás • Élesztő alginátban • “kabátolás” • Ülepítés gyorsan, hatékonyan • 25% pezsgő megtakarítás • Munkaerő megtakarítás
Biotechnológia • Apró magvak + alginát • Könnyebb vetni • Répa, fehérrépa • Tápanyag, csírázást segítő anyagok, patogének elleni védekezés • P. fluorescens
Ivóvíz tisztítás • Globális probléma • Emberiség száma nő • Emberi eredetű szennyezés nő • Iható víz mennyisége csökken
Ivóvíz tisztítás • Nitrogén felhalmozódás • NH4+, NO3-
Szennyvíztisztítás • Kommunális, ipari • Nitrogén: ammónia, nitrát • Aerob – anaerob kezelés
Szennyvíztisztítás • Kommunális, ipari • Nitrogén: ammónia, nitrát • Aerob – anaerob kezelés • Tiszta víz • Energia • Kezelt iszap = Szerves trágya
Ivóvíz denitrifikálása • Nitrát – nitrit átalakulás a bélcsatornában • Fakultatív anaerobok • Részleges redukció • NO2- hemoglobinhoz kötődik irreverzibilisen • “Kék csecsemő” • Agyi krónikus hypoxia • Emésztőtraktus tumor
Ivóvíz denitrifikálása • Nitrát redukció fokozatosan
Ivóvíz denitrifikálása • Gélcső reaktor • Nitrifikál • Nitrosomonas europaea • Denitrifikál • Paracoccus denitrificans • Energia: EtOH • Térben elválasztva