1 / 43

BIOTECHNOL ÓGIA D MsC gyakorlat

BIOTECHNOL ÓGIA D MsC gyakorlat. Tervezési feladat. Del éciós mutagenezis a leolvasási keret sértése nélkül. Ar1. ori V. ori T. oriV : szűk gazdaspecificitás. Ar: antibiotikum rezisztencia. Ar1. ori V. ori T. vad típus. mutáns. poláris hatás ?. A FELADAT ÁLTALÁNOS MEGFOGALMAZÁSA.

fineen
Download Presentation

BIOTECHNOL ÓGIA D MsC gyakorlat

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. BIOTECHNOLÓGIA D MsC gyakorlat Tervezési feladat

  2. Deléciós mutagenezis a leolvasási keret sértése nélkül Ar1 oriV oriT oriV: szűk gazdaspecificitás Ar: antibiotikum rezisztencia Ar1 oriV oriT vad típus mutáns poláris hatás ?

  3. A FELADAT ÁLTALÁNOS MEGFOGALMAZÁSA • A LEOLVASÁSI KERET MEGSÉRTÉSE NÉLKÜL KI KELL ÜTNI EGY GÉNT EGY BAKTÉRIUMBAN • ÉS HELYETTE UGYANEBBEN A BAKTÉRIUMBAN KELL TERMELTETNI A KIÜTÖTT GÉN TERMÉKÉT FÚZIÓS FEHÉRJE FORMÁJÁBAN

  4. MEGOLDÁSI SÉMA • 1. A megadott célgént tartalmazó genomi lókusz letöltése, a célgén és a környező gének pozíciójának kijelölése • Eszköz: internet, adatbankok • pl. NCBI, Genbank • http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/gquery

  5. complement(1934864..1936042) Csak a 1 933 000 – 1 938 000 régió kell Ekkor a gén 3 043 bp-nál kezdődik és 1 485 bp-nál ér véget Complement!

  6. Deléciós mutagenezis a leolvasási keret sértése nélkül Ar1 oriV oriT oriV: szűk gazdaspecificitás Ar: antibiotikum rezisztencia Ar1 oriV oriT vad típus mutáns poláris hatás ?

  7. DE! A két szakasznak nagyjából egyforma hosszúnak kell lennie, Hogy azonos legyen a rekombinációs valószínűség 500-1000 bp 500-1000 bp

  8. A VEKTOR KIVÁLASZTÁSA • Szempontok: • Az adott feladathoz szabad-e, kell-e replikálódnia a vektornak a célsejtben • Olyan antibiotikum rezisztenciát hordozzon, mely antibiotikumra a sejt érzékeny • Milyen módon lehet bejuttatni a célsejtbe DNS-t

  9. TSZE PROKARIÓTA EXPRESSZIÓS VEKTOR ELEMEI SZF Fúziós partner GS  Pr -35 -10 SD kódoló szekvencia TT STOP kodon UAAU UGA UAG -10 -35 TTGACAN17TATAAT START kodon AUG GUG UUG 5’ UAAGGAGGN(3-11) AR ORI Pr: promóter TT: transzkripciós terminációs szignál, SZF: szabályozó fehérje,, TSZE: transzlációt szabályozó elemek, SD: Shine-Dalgarno szekvencia, AR: antibiotikum rezisztencia, ORI: replikációs origo GS: gazdasejt

More Related