1 / 7

test na schopnost fagocytů odpovídat na chemotaktické stimuly /CHTS/

forest
Download Presentation

test na schopnost fagocytů odpovídat na chemotaktické stimuly /CHTS/

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Metody Fagocytózy- vyšetření zahrnuje:krevní diferenciál - % zastoupení LEUizolace LEUstanovení funkce LEU4 skupiny testů na fagocytózu:test na schopnost fagocytů odpovídat na chemotaktické stimuly /CHTS/testy na sílu ADHEZE a INGESCEtesty na mikrobicidní aktivitu LEUtesty na metabolickou aktivitu LEU

  2. test na schopnost fagocytů odpovídat na chemotaktické stimuly /CHTS/ • test migrace pod agarózou- postup:nalití agaru na misku a vyřezání otvorů • plnění otvorů látkami • kultivace, usmrcení BB, barvení • odstranění agaru, mikroskopování • princip  • CHEMOTAKTICKÝ STIMUL • vnitřní – produkty vlastních BB – komplement, imunokomplex, IL, prostaglandiny • vnější – produkty ze stěn mikrobů – lipopolysacharid, GLP, manan • CHEMOTAKTICKÝ INDEX: • aktivní pohyb • difuze • CHI = A/B 1 CHTS LEU Fyziol. roztok

  3. testy na sílu ADHEZE a INGESCE A)test s metakrylátovými částicemi LEU (popř. krev) +  MSHP /inertní metakrylátové částice/ • na na povrchové receptory fagocytu se naváží MSHP necháme kultivovat, barvíme • počítá se:fagocytární index(FI) a procenta fagocytózy(%F) • FI = počet fagocytovaných částic na povrchu, uvnitř/ lomeno počtem fagocytujících BB • %F = počet fagocytujících BB / celkový počet BB x 100

  4. B) test s kadmium-albuminovými částicemi • počítá se:fagocytární index(FI) a procenta fagocytózy(%F) • FI = počet fagocytovaných částic na povrchu, uvnitř/ lomeno počtem fagocytujících BB • %F = počet fagocytujících BB / celkový počet BB x 100

  5. hodnocení: •  bakterie se vysejí na plotny •  spektrofotometricky, úbytek zákalu • Testy na mikrobicidní aktivitu LEU test na počet přeživších bakterií • kultivace KANDIDATIVNÍ test – test na počet přeživších kvasinek LEU+Candida úbytek kvasinek, Trypanová modř - mn. přeživších buněk mikroskop

  6. Testy na metabolickou aktivitu LEU, NBT test redukce • hodnocení: - pod vlivem CHTS při kultivaci dojde k fagocytóze, jejíž součástí je oxidativní vzplanutí • Redukce vlivem oxidačních pochodů v buňce. NBT nitroblue tetrazolium chlorid bezbarvý se změní na modrý formazán – stanovení SPEKTROFOTOMETREM • Touto metodou se prokazuje hlavně schopnost fagocytů tvořit kyslíkové radikály aktivací NADPH oxidázy

  7. luminometr • CHEMILUMINISCENČNÍ test • pro kvantitativní hodnocení oxidativního vzplanutí plus luminol NADPH oxidáza O2 + el O2- . radikál, anion Dalšími reakcemi vznik kyslíkových radikálů Vznikají elektronově excitované stavy, které emitují fotony.Emitované fotony zachycovány tzv. luminoforem (luminol, izoluminol nebo lucigenin), spontánní a aktivovaná CL (pomocí zymozanu), luminometr VYUŽITÍ v praxi : zjištění :nedostatečnosti či poruch jednotlivých fází fagocytózy aktivity fagocytů u pacientů s opakovanými infekcemi, opakovanou léčbou antibiotiky, nádorovým onemocněním, artritidou či revmatoidními onemocněními, při zátěžových situacích

More Related