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Debaryomyces hansenii COMO MODELO: Debaryomyces hansenii es una levadura capaz de crecer en ambientes tan distintos como el queso, el yogur, o el agua de mar, de donde fue aislada originalmente. . ¿Qué es una levadura?. ¿QUÉ ES UNA LEVADURA?
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DebaryomyceshanseniiCOMO MODELO: Debaryomyceshansenii es una levadura capaz de crecer en ambientes tan distintos como el queso, el yogur, o el agua de mar, de donde fue aislada originalmente.
¿Qué es una levadura? ¿QUÉ ES UNA LEVADURA? • Es una célula eucarionte del grupo de los hongos microscópicos unicelulares su importancia, entre otras, radica en su capacidad para realizar la fermentación de diversos cuerpos orgánicos, principalmente los azúcares, produciendo distintas sustancias. • Una de las levaduras más conocidas es Saccharomycescerevisiae. Esta levadura tiene la facultad de crecer en forma anaerobiarealizando la fermentación alcohólica. • Por esta razón se emplea en muchos procesos de fermentaciónindustrialcomo en la formación de cerveza, vino, miel,aguol, pan, antibióticos, etc.
Nuestro grupo está interesado en entender los mecanismos moleculares que le permiten adaptarse a esta variedad de ambientes. Trabajamos fundamentalmente en: la capacidad de esta levadura para proliferar en medios salados. hemos determinado, en medios salinos, que la actividad de algunas enzimas es muy elevada, como la catalasa (que descompone al peróxido de hidrógeno en H2O + O2) y la glutamato deshidrogenasa (que es la enzima que toma amonio y 2-oxoglutarato para obtener glutamato). en condiciones salinas muestra una actividad killer, esto es, tiene la capacidad de impedir la proliferación de otras especies a través de la secreción de una toxina. En esta plática, les muestro algunos datos obtenidos en el laboratorio.
Efecto de la presencia de NaCl sobre la actividad específica de la GDH dependiente de NADP 1 Las células fueron cultivadas en MM2 conteniendo sulfato de amonio, glutamato o asparagina como únicas fuentes de nitrógeno. 2 Los valores son el promedio de tres experimentos independientes. N.D. No detectable
FUERZA IÓNICA SOBRE D. hansenii Efecto de la fuerza iónica en preparaciones de la enzima pura GDH-dependiente de NADP de S. cerevisiae y de D. hansenii. Se muestra la sensibilidad de las enzimas de las dos especies de levadura a concentraciones crecientes de (A) NaCl y (B) KCl. ■, Gdh1p de S. cerevisiae;, Gdh3p de S. cerevisiae; , Gdhp de D. hansenii.
YPE-NaClexp (E) YPD-NaClsta (S) YPD-NaClexp (E) YPE-NaClsta (S) YPE exp(E) Eritrocito Humano YPD sta(S) YPD exp(E) YPE sta(S) Zimograma de D. hanseniicrecida en las fases exponencial (E) y estacionaria (S) en YPD y YPE en presencia y ausencia de 1 M-NaCl.
En las cajas de agar se siembra un césped con la cepa sensible y sobre éste se inocula A) una estría de células de Debaryomyces hansenii ó B) una gota del medio en donde fue crecida la levadura, libre de células.Los resultados nos permitieron establecer que la cepa exhibe el fenotipo “killer”, excretando la toxina al ser cultivada en presencia de NaCl (0.1 a 1.0 M) a 25-30ºC en agar, y en medio líquido en presencia de NaCl (0.5 a 1.0 M) a 20ºC. ACTIVIDAD KILLER DE D. hanseniiSOBRE S. cereviseae A B
COLABORADORES:Dra. Claudia SegalM en C Beatriz RodarteDr. René CárdenasyDra. Luisa Alba LoisDepartamento de Biología CelularFacultad de CienciasUNAM UNIVERSIDAD DE CHILE 17 ENERO, 2014