המעבדה!!!

1. המעבדה!!! חומרים להכנה לבחינת המעבדה. על בסיס בעיה 4 תשס"ב אילנה אדר דצמבר 2011

2. בזמן העבודה עצמה: • לקרוא את השורות הפותחות המסבירות במה עוסקת המעבדה • לקרוא לאט ולנסות להבין מה עושים • לסמן  על מה שנעשה • לנסות לראות תמונה כוללת • לעצור להסתכלות על טבלת הניסוי

3. הפתיח למעבדה: "בחלק זה של הבחינה תבדוק את השפעת רמת החומציות (pH) על פעילות האנזים קטלאז. להזכירך, האנזים קטלאז מפרק מי-חמצן למים ולחמצן. החמצן הנפלט מצטבר כבועות: "קצף". ההנחה היא שככל שנפלט יותר חמצן מצטבר יותר קצף."

4. מתוך הפתיח ניתן להבין את : נושא הניסוי המשתנים: התלוי (פעילות האנזים) המשתנה הבלתי תלוי (PH) את דרך מדידית המשתנה התלוי (גובה הקצף)

5. בנה טבלה וסכם בה את מערך הניסוי ואת תוצאותיו. תן כותרת לטבלה. הטבלה הנתונה של ההוראות:

6. מה חסר? איך כותבים כותרת: הכותרת מגדירה את מה שנבדק. פעילות קטלאז מתפו"א בדרגות שונות של pH (אפשר להיעזר בשורות הפותחות את הניסוי)

7. מה רושמים בטבלה? לטבלה נכניס כל מה שיש במבחנות: גורמים הייחודיים לכל טיפול (משתנה תלוי) וגורמים קבועים שזהים בכל הטיפולים. הקורא את הטבלה יכול לחזור ולהכין את הניסוי יש לרשום יחידות בכותרות העמודות יש להשאיר עמודה לתוצאות הניסוי

8. תיאור גרפי • כותרת הגרף - כוללת את התהליך הביולוגי (פעילות האנזים במקרה זה) • הכותרת מביעה את היחס בין משתנה תלוי לבלתי תלוי • בגרף עצמו - הגורם הבלתי תלוי- תמיד בציר הX • את הגורם התלוי "תולים" על ציר Y • לכל גורם כותבים את השם והיחידות • ציר Y יהיה מה שנבדק בניסוי (המייצג את התהליך הביולוגי הנבדק)

9. איזה גרף לעשות? כאשר המשתנה הבלתי תלוי (ציר X) הוא משתנה רציף- יש לעשות גרף רציף.(עקום) כאשר המשתנה הבלתי תוי בדיד (לא רציף) יש לעשות רק גרף עמודות כשאין די מדידות או שהמרחקים בין הנקודות מאד גדולים - אפשר לעשות עמודות גם במשתנה בלתי תלוי רציף - אך יש לנמק זאת!!!

10. פעילות קטלאז מפקעות תפו"א בדרגות שונות של PH שימו לב :בכותרת הטבלה: התהליך הנבדק (פעילות אנזים). כותרת ציר Y - מה שנבדק בפעל (גובה קצף)

11. תיאור גרף תיאור אינו הסבר. הוא מתאר במילים מה רואים. אם יש מספרים בצירים יש להשתמש בנקודות קיצון בתיאור הגרף. מתיאור הגרף ניתן לדמיין איך ניראה הגרף ב- pH 3.5 פעילות קטלאז מתפו"א אפסית. היא עולה בתחילה בהדרגה ואח"כ בצורה חדה יותר, עם עלית ה- pH עד pH 8. הפעילות יורדת באופן חד בין pH 8 ל- pH 9. מעבר לכך לא נבדק. מכאן שה-pH המיטבי לפעילות קטלאז [מתפו"א] הוא בסביבות pH 8.

12. הסבר הסבר מדוע יש קשר בין רמת ה-pH לבין רמת פעילות האנזים? כאן נדרש ידע ביולוגי בסיסי. פעילות האנזים מותנית במבנהו המרחבי. ה-pH משפיע על המבנה המרחבי(השלישוני) של האנזים, ולפיכך על פעילותו. או רמותpH קיצוניות גורמות לדנטורציה של חלבונים.

13. ידע כללי האם היית מצפה לאותו pH אופטימלי, אילו היית בודק את פעילותו של אנזים אחר? נמק. לכל אנזים PH אופטימאלי אחר.

14. תיכנון ניסוי • עליך לתכנן ניסוי (דומה לזה שערכת), כדי לקבוע מהו ה-pH המיטבי של האנזים – הפעם ברמת דיוק של 0.1 יחידות pH (כלומר: להבחין בין עשירית יחידות pH, למשל 5.6; 5.7 וכו'). • שאלה 40: בניסוי תוכל להשתמש רק ב- 10 מבחנות. באיזה טווח pH תבחר לבצע את הניסוי? נמק על סמך תוצאות הניסוי שערכת.

15. 41. מהו המשתנה הבלתי תלוי בניסוי המתוכנן? • 42. מהו המשתנה התלוי בניסוי המתוכנן? • 43. ציין 2 גורמים שחשוב לשמרם קבועים בניסוי המתוכנן.

16. בלתי תלוי - דרגת PH תלוי: פעילות האנזים גורמים קבועים: גורמים שנשארים יציבים בכל הטיפולים. (סוג ריכוז וכמות המיצוי (האנזים), טמפ. משך הבדיקה.. צריך לדעת להסביר מדוע אלו צריכים להיות קבועים. הסבר "שזה משפיע" אינו מתקבל. יש להסביר את השפעת הגורם: אנזים הוא חלבון. פעילותו של אנזים מושפעת מהטמפ כי: קצב פגשת אנזים-סבסטרט עוה עם עליית הטמפ. וגם בטמפ גבוהות הוא עשוי לעבר דנטורציה. לכן יש לשמור על טמפ קבועה ואחידה

17. פעילות אנזים מפרק דופן בחיידקים, בריכוזי מלח שונים • קטע 4 - רקע: חומרים שונים המומסים בתמיסה מימית יוצרים תמיסה צלולה. תאים חיים, המעורבבים בתמיסה יוצרים תרחיף. תרחיף ובו תאים שלמים, חיים או מתים, יוצר תמיסה עכורה (בשל שבירת קרני האור על דפנות או קרומי התאים שבנוזל). • חיידקים הם תאים בעלי דופן וקרום. בהיותם מורחפים בנוזל, הנוזל עכור. • הניסוי: • לשלוש מבחנות הוכנסו הרכבים שונים של חיידקים וחומר X. • מבחנה א' - במים מזוקקים הורחפו חיידקים ונוצר נוזל עכור. • מבחנה ב' - לתרחיף תאי חיידקים במים מזוקקים (עכור) הוסף חומר X – והנוזל נעשה צלול. • מבחנה ג' - לתרחיף תאי חיידקים במים מזוקקים (עכור) הוסף חומר X שהורתח קודם – והנוזל נשאר עכור.

18. שאלות: • מהו המשתנה הבלתי תלוי? כיצד הוא שונה? • מהו המשתנה התלוי? כיצד הוא נבדק? • מה מוסיפה מבחנה ג להבנת תפקידו של חומר X? • מהי הבקרה בניסוי מבחנות? מה היא בודקת? • הסבר את תוצאות הניסוי. • לניסוי הוסיפו מבחנה: • מבחנה ד - לתרחיף תאי חיידקים בתמיסת מלח 5% הוסף חומר X – התמיסה נשארה עכורה. • מהי מטרת הבדיקה? • הסבר מדוע הנוזל נשאר עכור במבחנה ד ומבחנה ב נעשתה צלולה? • תכנן ניסוי לבדיקת ריכוז המלחים בתאי החיידקים. השתמש בשיטה הנתונה בניסוי זה. • מה יהיה המשתנה הבלתי תלוי? כיצד תשנה אותו? • מהו המשתנה התלוי? כיצד תמדוד אותו? • איזו בקרה צריכה להיות בניסוי? מה היא תבדוק? • כתוב בקצרה את מהלך הניסוי והכן טבלה לאיסוף תוצאות.

19. שאלות: • מהו המשתנה הבלתי תלוי? כיצד הוא שונה? • מהו המשתנה התלוי? כיצד הוא נבדק? • מה מוסיפה מבחנה ג להבנת תפקידו של חומר X? • מהי הבקרה בניסוי מבחנות? מה היא בודקת? • הסבר את תוצאות הניסוי. • לניסוי הוסיפו מבחנה: • מבחנה ד - לתרחיף תאי חיידקים בתמיסת מלח 5% הוסף חומר X – התמיסה נשארה עכורה. • מהי מטרת הבדיקה? • הסבר מדוע הנוזל נשאר עכור במבחנה ד ומבחנה ב נעשתה צלולה? • תכנן ניסוי לבדיקת ריכוז המלחים בתאי החיידקים. השתמש בשיטה הנתונה בניסוי זה. • מה יהיה המשתנה הבלתי תלוי? כיצד תשנה אותו? • מהו המשתנה התלוי? כיצד תמדוד אותו? • איזו בקרה צריכה להיות בניסוי? מה היא תבדוק? • כתוב בקצרה את מהלך הניסוי והכן טבלה לאיסוף תוצאות.

20. מהלך הניסוי: • לקחו שלושה כלים, בכל כלי שמו 3 דסקיות עלים שקועות במים, שעברו טיפול בואקום. כל הדיסקיות שקעו לעומק של 30 ס"מ. • המים בתוך כל הכלים היו בכמות אחידה ובריכוז מומסים אחיד. • העמידו את הכלים במרחקים שונים • ממנורה דולקת : 30, 40 ו- 50 ס"מ. • כאשר הדליקו את האור במנורה נראו בועות גז סביב דסקיות העלים והן עלו למעלה. (בחזרה למצב של ציפה על פני המים). • הזמן מרגע הדלקת המנורה, עד לעליית הדסקית עד לפני המים, נמדד ונרשם בטבלה.

22. שאלות: • מהו התהליך הביולוגי שנמדד בניסוי? נמק. • מה גרם לעליית הדסקיות? פרט • מהו המשתנה הבלתי תלוי בניסוי זה? כיצד משנים אותו? • מהו המשתנה התלוי, וכיצד הוא נמדד? • האם יש בקרה בניסוי, מהי ומה חשיבותה נמק? • צייר עקום שיתאר את זמן עליית הדסקיות בתלות למרחק מהמנורה. (שימו לב: כותרת, יחידות לצירים) • מדוע שקעו דסקיות העלה כאשר הופעלה משאבת הואקום? • מה המסקנה הנובעת מהניסוי? הסבר.