371 likes | 922 Views
Dwi Handayani Ni Luh Sukeningsih. Uji antidiabetes secara in vivo. PENGERTIAN DIABETES. Diabetes melitus
E N D
Dwi Handayani Ni Luh Sukeningsih Ujiantidiabetes secara in vivo
PENGERTIAN DIABETES • Diabetes melitus • keadaanhiperglikemiakronikdisertaiberbagaikelainanmetabolikakibatgangguan hormonal, yang menimbulkanberbagaikomplikasikronikpadamata, ginjal, saraf, danpembuluhdarah, disertailesipadamembranbasalisdalampemeriksaandenganmikroskopelektron.
TIPE-TIPE DIABETES 1. Diabetes Melitustipe 1 ditandaidengankerusakansel beta pankreaskarenadestruksiautoimun 2. Diabetes Melitustipe 2 insulin mencukupi, namunterjadipengurangan intake glukosa 3. Diabetes Gestasional terjadipadawanitahamilakibatkadar estrogen danhormonpertumbuhanmeningkat.
DIABETES MELITUS TIPE 2 • Biasadisebutdengannon insulin dependent diabetes mellitus (NIDDM) Penyebabnya: • Kerusakangenetikreseptor insulin • Kerusakangenetikreseptor GLUT4 • Insensitivitasreseptorakibatrangsanganberkepanjangan
METODE PENGUJIAN DM • MetodeUji Diabetes Streptozotocin I • MetodeUji Diabetes Streptozotocin II • MetodeujiAloksan
MetodeUjiStreptozotosin I PRINSIP Induksipadahewanpercobaan, rute IP. IDDM disuntikkandengandosis 65 mg/kgBB. NIDDM disuntikkandengandosis 90 mg/kgBB, EKSTRAK Diberikanekstrak 250 mg/2 ml air.
Ada 4 prosedurpengujian Toleransiglukosasecara oral Perbedaanbebanglukosa oral (1,25-4,0 g/kgBB). Pengambilansampel 0-90 menit. Interval 15 menit Efekpadakadarglukosapuasa Diberikanmalamhari. Padamenitke 0, 60, dan 120. kontroldiberikan air. Efekpadakadarglukosadarahketikaekstrakdiberikansecarasimultandenganglukosa Ekstrakglukosa/tanpaglukosa. Padamenitke 0, 14, 45. kontroldiberikan 2 ml larglukosa. Efekkadarglukosadarahketikadiberikan 45 menitsebelumbebangllukosa. Ekstrakdiberikanpadatikuspuasamenitke 0, diberikanbebanglukosapadamenitke 45
Sampeldarahdikumpulkandenganmemotongekordengananastesiringan.Sampeldarahdikumpulkandenganmemotongekordengananastesiringan. • Serum dipisahkan: sentrifuge. • Kadar glukosadalam serum diamatipadahari yang samadenganmetoda GOD-PAP dengancaramengukurabsorbansidennganmenggunakanspektrofotometerλ 510 nm
MetodeUjiStreptozotosin II PRINSIP Induksipadahewanpercobaan, rute IP. Disuntikkansebanyak 60 mg/kgBBpadamencitbetinaWebstar(180-200 gram) EKSTRAK Diberikanekstrak 250 mg/2 ml air.
Ada 2 ujiaktivitas Aktivitaspadabinatangdenganglukosa normal • Metodeglukosaoksidaseoksigen • Metodeperfusiusus • Metodesediaandiafragmatikus • Metoekolagenase Aktivitasantidiabetik • Metodesterptozotosin • Metode insulin pankreas
METODE UJI ALOKSAN • Aloksanmerupakanbahankimia yang digunakanunrukmenginduksi diabetes padabinatangpercobaan. • Mekanisme: pembentukankhelatthdp Zn, interferensisel beta sertadeaminasi & dekarboksilasi AA. Makaakanmengiduksipengeluaran Ca2+ apoptosis
MetodeUjiAloksan PRINSIP Induksipadahewanpercobaan, Aloksanmonohidratrute SC. Hewan: tikusjantan albino (130-150 g) EKSTRAK Diberikanekstrak 200-250 mg/kgBB.
Tujuan Untukmengetahuiapakahsuatubahanmemilikiefekmenurunkanguladarahataumenghambatkenaikanguladarah
Ujipadahewancoba • Membandingkanantarkelompok yang mendapatbahanujidan yang tidakmendapatkanbahanuji • Yang tidakmendapatbahanujidisebutsebagaikontrol (pembanding) • Kontrolpositif (inert: air) • Kontrolnegatif (obatstandar: glibenklamid, metformin)
Hewancoba tikus yang umumdibuat model, kelinci • Induksi diabetes - aloksan (60-75 mg/kgbb) - streptozotosin (25-100 mg/kgbb) • Cara pemberian IV atau IP
INDUKSI DM PADA TIKUS 1. Tentukanjumlahtikussesuaikeperluan (usialebihdari 2 bulan, bb tidakberbeda 10% terhadap bb rata-rata) 2. Lakukanaklimatisasiselama minimal 7 hari, sejakperpindahankelaboratorium
3. Puasakantikusselama 16-17 jam, periksakadarguladarahnya, ambildarah vena ekorsebanyak 0,1 ml atausecukupnya 4. Suntikkanpenginduksi DM 5. tiga-empatharikemudianukurkadarguladarahnya (biasanyameningkat) 6. Tikustelah DM
7. Lakukanpengelompokkansecara random, jumlahkelompoksesuaidenganrancangan. Tiapkelompok minimal terdiridari 5 ekor. Sebaiknyadilakukanterhadapsatujeniskelamin, jantanataubetina (jangandicampur) 8. Bahanujidiberikan 1x/hari. 9. Pemeriksaanguladarahdilakukanpadahari ke-0, 3, 6, 9, 12, ambilsecara IV
Kadar guladarah yang diambilpada 5 hariterakhirdihitung, dandicarisdnya. • Padahariterakhirdarahdiambilmelaluimatauntukdisimpan.
Dikumpulkanmelalui vena matasetelah4 jam perlakuan Ujidenganreduksi Cu2+atau Fe(CN)63-