Syntéza prekurzorov a N-arylaminooxazolkarboxamidových inhibítorov VEGFR2 TK

1. Syntéza prekurzorov a N-arylaminooxazolkarboxamidových inhibítorov VEGFR2 TK PRIF UK KOCH • Marek Ondruš • Školiteľ: Mgr. Juraj Dobiáš

2. Ciele práce • Spracovať vybranú literatúru ohľadom vlastností, biologickej funkcie TAM TK receptorov a vývoja inhibítorov pre RTK • Navrhnúť metodiku syntézy a pripraviť intermediáty, ako aj predpovedané inhibítory VEGFR2 receptorov TK

3. Prečo práve receptory TK? • TAM rodina TK receptorov: • nadmerná expresia  vznik • nádorových ochorení • tkanivová homeostáza (Mer) • proliferácia, migrácia (Axl) • agregácia krvných doštičiek (Tyro3) • súvis s CSCs • Axl, Mer, Tyro3 Apoptická bunka Fotoreceptoru Gla doména PtdSer EGF domény SHBG doména Ig domény FNIII domény Tyrozín kinázová doména Makrofágy Dendrické bunky Sertoliho bunky RPE bunky

4. VEGFR2 RTK: • produkcia VEGF • afinita VEGF k VEGFR2 receptorom EC buniek • proliferácia a migrácia http://www.joelertola.com/grfx/angio/edema.jpg (naposledy navštívené 28.5.2014)

5. „SBCP“ vrecko • ľahšia syntéza • väčšia selektivita • prídavné interakcie „SBCP“ = Salt Bridge Containing Pocket (Phe, Lyz, Asp)

7. I. SYNTÉZA

8. Mechanizmus vzniku amidov

9. 1H-NMR analýza Celkový výťažok I. syntézy: 14 %

10. II. SYNTÉZA

11. Problémová syntéza - Hypotézy • nízka nukleofilita anilínu • elektrónovo chudobné pyridínové jadrá (voľné elektrónové páry na atómoch N sa • nezapájajú do konjugácie, atómy dusíka pôsobia len svojim elektrónakceptórnym • efektom)  selektívna nitrácia • možné problémy s chelatáciou pri reakcii s Me3Al • stéricky brániace vodíky na α a ß uhlíkoch • znížená reaktivita kyseliny 4 zavedenie Boc skupiny na mostíkovú NH skupinu

12. III. SYNTÉZA

13. 1H-NMR analýza Celkový výťažok III. syntézy: 36 %

14. Záver • vypracovaná metodika prípravy amidov arylaminooxazolov z kyseliny 4 • v celkovo 16 syntetických krokoch sme pripravili prekurzor 6 a 2 potenciálne • inhibítory pre receptory VEGFR2 TK v celkových výťažkoch 14 a 36 % • inhibítory7 a 17 boli odoslané na biologické testovanie • kompletne fyzikálno-chemicky sme opísali 7nových látok • problémová syntéza inhibítora 13 je predmetom našej ďalšej práce

15. ĎAKUJEM ZA POZORNOSŤ

16. I. Otázka: Boli urobené iné experimenty na určenie multiplicity signálov? • 1D NMR spektroskopické metódy: • APT („Attached Proton Test“) – diferencuje uhlíkové jadrá s nepárnym počtom viazaných • vodíkov - CH a CH3 (pozitívny signál) a párnym počtom vodíkov C a CH2 (negatívny signál). • DEPT – („Distorsionless Enhancement by Polarization Transfer“) – diferencuje len medzi • CH, CH2 a CH3, quartérny nedokáže. • magnetizácia pri 135 °  pozitívny signál CH a CH3, negatívny signál CH2 • magnetizácia pri 90 °  pozitívny signál len CH • magnetizácia pri 45 °C  pozitívne signálny všetkých uhlíkových jadier

17. II. otázka: Aké metódy by ste mohli použiť na jednoznačné priradenie všetkých signálov v NMR? • NOESY – 2D NMR spektroskopia, vyžiarením NH vodíkov pozorované zvýšenie intenzity • signálov priestorovo blízkych vodíkových jadier vo vzdialenosti menšej ako 5Å. • NOE (1D NMR), ROESY (NOESY v rotujúcom režime).

18. III. otázka: Skúšali ste pomocou molekulového modelovania vypočítať elektrónové rozloženie HOMO orbitálu? Elektrónové rozloženieHOMO orbitálu: AM1/DFT-6-31G**

19. IV. Otázka: V akom výťažku ste získali vedľajší produkt 7.1 a prečo je zrejme preferovaný vznik tohto produktu? Mate nejaké zdôvodnenie, prečo sa podarilo získať produkt analogickej reakcie 15 až v 82 % výťažku?

20. Mechanizmus chránenia s Boc2O

21. Mechanizmus redukcie SnCl2: N2H4.H2O:

22. Mechanizmus odchránenia Boc

23. Mechanizmus nitrácie

24. Mechanizmus s Me3Al