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Prática em citometria de fluxo com hemócitos de bivalves

Prática em citometria de fluxo com hemócitos de bivalves. Danielle Ferraz Mello. O que é citometria de fluxo?. Técnica utilizada para contar, examinar e classificar partículas microscópicas suspensas em um meio líquido em fluxo; Permite a análise de vários parâmetros simultaneamente.

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Prática em citometria de fluxo com hemócitos de bivalves

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Presentation Transcript

  1. Prática em citometria de fluxo com hemócitos de bivalves Danielle Ferraz Mello

  2. O que é citometria de fluxo? • Técnica utilizada para contar, examinar e classificar partículas microscópicas suspensas em um meio líquido em fluxo; • Permite a análise de vários parâmetros simultaneamente.

  3. Como funciona? • Um feixe de luz (normalmente laser) de um único comprimento de onda (cor) é direcionado a um meio líquido em fluxo; • Detectores vão receber a luz que atravessou (Forwardscatter ou FSC) e a luz que foi desviada (Sidescatter ou SSC) pela partícula ou célula.

  4. Citômetro de fluxo • Instrumento capaz de analisar várias parâmetros de várias partículas por segundo; • Alguns podem ainda ativamente separar e isolar partículas com propriedades específicas. • Principais componentes: • Laser ou fonte de luz; • Fluxo de células; • Detector e conversor de sistema analógico para digital; • Computador para análise dos sinais.

  5. Citômetro de fluxo

  6. Gráficos gerados: dotplot

  7. Gráficos gerados:dotplot

  8. Gráficos gerados: histogramas

  9. Aplicações • Hematologia; • Cancerologia; • Imunologia;  • Ciclo celular; • Oceanografia; • Muitas e muitas outras!!

  10. Hemócitos • São as células imunocompetentes que fazem parte do sistema imune dos invertebrados; • Granulares e hialinos. 10 µm

  11. Hemócitos

  12. Vamos à prática!!!

  13. Resultados • Gráfico hemolinfa Crassostrea gigas - DANI

  14. Resultados • Gráfico hemolinfa Crassostrea gigas - PATRÍCIA

  15. Resultados • Gráfico hemolinfa Crassostrea gigas - CILEIDE

  16. Resultados • Gráfico hemolinfa Crassostrea gigas - POOL

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