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Microbiologia de A a Z. REVISÃO - REFORÇO. MICROBIOLOGIA – BACTERIOLOGIA MICOLOGIA. Classificação Bacteriana Coloração de GRAM – Bactérias gram-positivas Bactérias gram-negativas Coloração ZN - Ziehl-Neelsen . BACTERIOLOGIA 1 - Pré-Analítico. Requisição médica (pedido):
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Microbiologia de A a Z REVISÃO - REFORÇO
MICROBIOLOGIA – BACTERIOLOGIAMICOLOGIA • Classificação Bacteriana • Coloração de GRAM – • Bactérias gram-positivas • Bactérias gram-negativas • Coloração ZN - Ziehl-Neelsen
BACTERIOLOGIA 1 - Pré-Analítico • Requisição médica (pedido): • Mais completo possível • Indicando qual amostra e de quais locais deve ser colhida • Indicando o uso prévio de medicações antibióticas, antifúngicas e antissépticas
Amostras ESTÉREIS: SANGUE LÍQUOR - LCR Líquido Pleural, Pericárdico, Peritonial Líquido Amniótico Líquido sinovial Medula óssea BIÓPSIAS Amostras c/ MICROBIOTA (colonizadas) URINA, FEZES, FERIDAS DE PELE OROFARINGE, ESCARRO E demais secreções respiratórioas SECREÇÕES GENITAIS (uretrais, vaginais) BACTERIOLOGIA – A – AMOSTRAS CLÍNICAS
BACTERIOLOGIA – A2- AMOSTRA • COLETA DE AMOSTRAS: • do local exato indicado pelo médico • Antes da instituição da Antibioticoterapia • transporte da amostra clínica • Meios de Stuart e Amies – • NÃO USAR SWAB
BACTERIOLOGIA – Analítico 1 • Preparação inicial da Amostra colhida • DEPENDE DA AMOSTRA E DO EXAME SOLICTADO • ESCARRO – descontaminar • LCR (CENTRIFUGAR) • Semeadura e Incubação • ESCOLHA DOS MEIOS PARA SEMEADURA • Classificação dos meios de cultura – tabelas • TEMPO E FORMA DE INCUBAÇÃO (aeróbios, jarra anaeróbio, microaerófilo (5% de CO2)) • Esfregaço • ESCOLHA DA COLORAÇÃO • Princípio de cada método de coloração
BACTERIOLOGIA - B – Bacterioscopia – Exame dos Esfregaços • características morfológicas: coco, bacilo, coco-bacilo • Características tintoriais: Gram postitivo, Gram negativo, BAAR positivo • Formas de agrupamento: pares, tétrades, cachos, cadeias, letras chinesa • freqüência (em cruzes + , ou descritivo
BACTERIOLOGIA - C1 Cultivo e Identificação • Identificação das Bactérias cultivadas: • características dos diferentes tipos de colônias nos diferentes meios • identificação presuntiva (provas metabólicas, pesquisa de certas enzimas sintetizadas pelas bactérias • Prova (teste) de suscetibilidade a antimicrobianos (Antibiograma , TSA) • Padronizado ANUALMENTE pelo CLSI – Clinical Laboratory Standarts Institute) para cada tipo de bactéria
Cocos Gram – Positivos 1 Staphylococcus: • Infecções Hospitalares – MRSA, ORSAS. aureus – surtos de infecção alimentar (maionese contaminada) • 1975: S. aureus: Meticilina Resistente (MRSA) ou Oxacilina Resistente (ORSA): Responsáveis por infecções graves tanto hospitalares quanto comunitárias – CA-MRSA • CATALASE (+) Identifica os Estafilococos • COAGULASE (+) Identifica o S. aureus • DNASE e NOVABIOCINA
Cocos Gram – Positivos 2:Streptococcus • S.pyogenes estreptococos beta-hemolítico do grupo A • infecções de orofaringe, Febre Reumática (ASLO), Glomerulonefrites, Escarlatina etc. • S.pneumoniae: ou pneumococco: • pneumonias comunitária, meningites • S viridans: - endocardite • S.agalactiae: infecção e septicemia neonatal • CATALASE (-) – caracteriza o gênero: • TIPO DE HEMÓLISE em AS e outros testes caracterízam as espécies • Interface com a farmacologia Estreptoquinase
Cocos Gram – Positivos 3:Enterococcus • Classificados anteriormente como os Estreptococos. • Importância clínica: VRE – Enterococo resistente a Vancomicina • E.faecalis e E.faecium e Enterococcus spp resistência a múltiplos antimicrobianos prevalência nas infecções hospitalares. • infecções do trato urinário, seguida pela infecção cirúrgica e bacteremias
COCOS GRAM - NEGATIVOS • Diplococos gram-negativos Neisserias • N. gonorrhoeae: DST – • N. meningitides: meningococo • Coco-bacilos gram-negativos: Haemophilus • Haemophilusinfluenzae(meningites) • Haemophilus ducreyi (lesão genital)
BABACILOS GRAM - NEGATIVOS • São divididos em duas categorias segundo a fermentação ou não de GLICOSE • FERMENTADORES DE GLICOSE • OXIDASE NEGATIVO – ENTEROBACTÉRIAS • OXIDASE POSITIVO - • Aeromonas, Pleisomonas, Vibrio, Campylobacter • NÃO FERMENTADORES DE GLICOSE • OXIDASE NEGATIVO: Acinetobacter, Burkolderia cepacia e Stenotrophomonas maltophila • OXIDASE POSITIVO - • Pseudomonas, Burkolderia ssp. Alcalígenes ssp
ENTEROBACTÉRIAS VIB(Very Important Bacteria) • Escherichia coli • responsável por 90 a 95% das infecções urinárias • Escherichia coli sorotipo O157:H7: colite hemorrágica, Síndrome Hemolítica Urêmica (SHU), falência renal aguda Púrpura Trombocitopênica Trombótica • nos Estados Unidos em 1982, isolada em hambúrgueres contaminados. ingestão de carne moída mal cozida • Proteus mirabilis • Também causa infecção urinária • Isolamento difícil pela produção de véu: CLED • Klebsiella pneumoniae: • infecção pulmonar e urinária • KPC – A SUPERBACTÉRIA DA VEZ
ENTEROBACTÉRIAS VIB(Very Important Bacteria) • Salmonella: Diarréia bacilar • Shigella : Disenteria bacilar • Serratia marcenscens santa que chora sangue • Outros bacilos gram negativos VIB • Pseudomonas • Burkolderia http://www.cve.saude.sp.gov.br/htm/hidrica/Ecolinet.htm
ESBL E KPC • Mecanismos de Resistência à Antimicrobianos (plasmídios, uso indiscriminado de antimicrobianos, seleção artificial) • TESTES de Avaliação de Resistência à Antimicrobianos (CLSI) • ESBL:Beta-Lactamase de espectro ampliado (ou estendido)Extended Spectrum Beta Lactamases • Klebisiella pneumoniae, E coli, Klebisiella oxytoca • KPC:Klebisiella pneumoniae produtora de enzima que degrada o carbapenen – carbapenenase (2005)
BACTERIOLOGIA - ENADE • Bacterias VIB (Very Importat Bacteria) • Mecanismos de resistência à agentes antimicrobianos • Uso indiscriminado dos antibióticos, dose insuficiente, tempo insuficiente • Infecções Hospitalares x Comunitárias • Aspectos epidemiológicos de cada VIB • Métodos de isolamento, e identificação (tabelas de meios, provas bioquímicas) • Controle da Transmissão
BACTERIOLOGIA & VIDA PROFISSIONAL • LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA = LABORATÓRIO HOSPITALAR • automação já existe mas é cara e limitada e está concentrada nos seguintes aspectos • INCUBAÇÃO DAS AMIOSTRAS (HEMOCULTURAS) • IDENTIFICAÇÃO E TSA • identificação “manual” requer experiência • ESTUDEM, ESTUDEM E SE ATUALIZEM: • Literatura recente: Livros dos últimos 3 anos, revistas científicas • CONGRESSOS no mínimo em anos alternados