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第三章 血型与输血( 2 )

第三章 血型与输血( 2 ). 魏彦刚 菏泽医学专科学校. 三、 Rh 血型系统. Rh 阳性: 含 D 抗原 的红细胞 Rh 阴性: 不含 D 抗原 的红细胞 汉族人中 Rh 阴性率 ﹤1%. (一) Rh 血型系统抗体. 1. Rh 抗体的产生 Rh 抗体绝大多数是通过 Rh 血型不合输血或妊娠产生的免疫性抗体, 这些抗体均为 IgG 2. Rh 抗体的种类 主要有 5 种,即抗 D 、抗 E 、抗 C 、抗 c 、抗 e ,最常见的是抗 D ,凡被检红细胞和抗 D 血清凝集者为 Rh 阳性,不凝集为 Rh 阴性 3. Rh 抗体的特性 为免疫性抗体 IgG.

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第三章 血型与输血( 2 )

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Presentation Transcript


  1. 第三章 血型与输血(2) 魏彦刚 菏泽医学专科学校

  2. 三、Rh血型系统 • Rh阳性:含D抗原的红细胞 • Rh阴性:不含D抗原的红细胞 • 汉族人中Rh阴性率﹤1%

  3. (一)Rh血型系统抗体 • 1. Rh抗体的产生Rh抗体绝大多数是通过Rh血型不合输血或妊娠产生的免疫性抗体,这些抗体均为IgG • 2. Rh抗体的种类主要有5种,即抗D、抗E、抗C、抗c、抗e,最常见的是抗D,凡被检红细胞和抗D血清凝集者为Rh阳性,不凝集为Rh阴性 • 3. Rh抗体的特性为免疫性抗体IgG

  4. (二)Rh血型鉴定方法及评价 • 1. 酶介质法 分为直接酶介质法、间接酶介质法 • 2. 抗球蛋白试验(Coombs test)分为直接抗球蛋白试验(DAT)和间接抗球蛋白试验(IAT) • 3. 凝聚胺试验(polybrene test) • 4. 人源盐水介质抗D试验 (临床应用广泛) • 5. 低离子强度(盐)溶液试验

  5. 1. 酶介质法 在酶处理下 IgG抗体可凝集RBC

  6. 阳性 阴性 1. 酶介质法 37 ℃  离心 看结果 37℃ 水浴30分钟

  7. 2.抗球蛋白(Coombs)试验 • DAT(直抗):直接检测红细胞表面有无不完全抗体吸附的试验。 • IAT(间抗):通过体外致敏红细胞,再检测红细胞上有无不完全抗体吸附的试验。

  8. IgM抗体凝集RBC示意图 在盐水介质中

  9. 在盐水介质中、 IgG抗体不凝集RBC

  10. 2.抗球蛋白试验 抗球蛋白

  11. 3.凝聚胺技术 原理 凝聚胺(Polybrene),一种高价阳离子季胺盐多聚物,溶解后能产生很多正电荷,可以中和红细胞表面的负电荷,使红细胞之间距离减少,能引起正常红细胞可逆性的非特异性凝集。如果是抗体致敏的红细胞被聚凝胺凝集,则凝集不可逆。

  12. 在凝聚胺处理下 IgG抗体可凝集RBC

  13. 4.人源盐水介质试验 临床应用广范 • 原理:加入蛋白变性剂,使IgG抗D抗体转变为类似大分子的“IgM”,在盐水中发生肉眼可见的凝集反应。

  14. 当溶液中缺少离子时,抗原抗体之间的静电作用力较强当溶液中缺少离子时,抗原抗体之间的静电作用力较强 当溶液中离子增多时,抗原抗体之间的静电作用力减弱 抗体 抗原 静电作用力 非离子 抗原 抗体 静电作用力 离子 5.LISS(低离子强度溶液)的原理

  15. (三)Rh血型鉴定的临床意义 • 1. 输血前的检查 • 2. 新生儿溶血病诊断 • 3. 协助治疗

  16. 医院坚持验血后输血 失血孕妇苦等6小时逝去 • 稀有血型孕妇董明霞在引产时出现大出血,家属要求先输血救命并愿意承担一切后果,但医院坚持严格按照法律规定输血。经过6个多小时的焦虑等待,这位山东济阳的孕妇终于9日下午在山东大学齐鲁医院含恨死去。(齐鲁晚报- 2008年10月10日)

  17. 血液中心冷冻库提供的4个单位(800ml)RH阴性O型血浆,每个单位按照常规最快也要3个小时才能解冻,且不能满足需要,只能临时从稀有血型志愿者中采集7个单位(1400ml)的血液,这样的血液又需要3个小时的检验,待其筹足之时,抢救的最佳时间已经过去

  18. 尽管病人家属要求先输血救命并愿意承担一切后果,但医院仍坚持严格按照法律规定等到血液检验完毕才能输血。经过6个多小时等待后,引产大出血的济阳患者董明霞最终于9日下午不幸去世

  19. 一个省会所在的大医院,为什么自己不备有RH阴性O型等稀有血浆?为什么不建立稀有血型志愿者队伍?在紧急情况下,为什么不及时组织稀有血志愿者紧急采集

  20. 四、红细胞血型系统交叉配血试验

  21. 交叉配血试验的原理 交叉配血试验中红细胞血型抗原与相应抗体的凝集反应,可用盐水配血试验、酶介质试验 、抗球蛋白试验、凝聚胺试验、低离子强度溶液试验及微柱凝胶试验进行观察。

  22. 患者 阳性 主侧 次侧 阴性 献血者 盐水介质配血方法 离心 看结果

  23. 交叉配血试验(盐水配血法) 原理 :完全抗体分子链较长,在电解质学液中,能克服红细胞表面电荷排斥力,与相对应的抗原结合,使红细胞凝集,从而发现配血不合,有对应抗原抗体存在。 方法: 1、自被检者静脉采血2~3ml,分离血清,并配制5%红细胞悬液。 2、主侧:病人血清+献血员红细胞 次侧:献血员血清+病人红细胞 混匀,1000转/分,然后观察结果。

  24. 报告方式: 交叉配合试验(**法) 受血者***(*)型血清+***(*)型红细胞不凝集,无溶血。 受血者***红细胞+***血清不凝集。无溶血 结果判断: 同型配血,主侧、次侧均不凝集,表示无配血禁忌,可以输血;异型配血时,主侧无凝集,无溶血,次侧凝集,但效价<1:64,无溶血,可以输给少量,如次侧不凝集时,应追查原因。

  25. 大量交叉配血 献血员之间应进行交叉配备 如:献1血清+献2红细胞 献1红细胞+献2血清

  26. 37 ℃  抗球蛋白配血方法 患者 主侧 37℃ 水浴30分钟 三洗 次侧 献血者

  27. 抗球蛋白试剂 上海市血液中心血 抗球蛋白方法配血方法 阳性 加抗球蛋白 离心 看结果 阴性

  28. 患者 主侧 次侧 酶 献血者 上海市血液中心血 酶介质配血方法 主次侧 均加酶

  29. 阳性 阴性 酶介质配血方法 37 ℃  离心 看结果 37℃ 水浴30分钟

  30. 凝聚胺技术 原理 凝聚胺(Polybrene),一种高价离子季胺盐多聚物,溶解后能产生很多正电荷,可以中和红细胞表面的负电荷,使红细胞之间距离减少,能引起正常红细胞可逆性的非特异性凝集。如果是抗体致敏的红细胞被聚凝胺凝集,则凝集不可逆。

  31. 患者 Polybrene 主侧 上海市血液中心血 次侧 献血者 聚凝胺(Polybrene)配血方法  室温放置 1 分钟 主次侧均 加聚凝胺

  32. 阳性 重悬液 上海市血液中心血 阴性 聚凝胺(Polybrene)配血方法 主次侧均 加重悬液 看结果 离心 聚凝胺引起红细胞非特异性凝集

  33. 基本操作方法 1、试管中加入待检血清或血浆1滴 2、加入用LIM溶液配置的2~3的红细胞悬液2~3滴 3、摇匀,室温放置1分钟(时间长,效果好) 4、加聚凝胺试剂1滴,混匀后3400rpm离心15秒 5、轻摇观察由聚凝胺引起的红细胞非特异性凝集,若未见红细胞凝集则需重做试验 6、加入1滴重悬液,轻摇观察结果 由聚凝胺引起的非特异性凝集应在1分钟内完全散开,若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会散开

  34. 微柱凝胶介质配血法 • 红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶介质中发生凝集发应

  35. 凝胶试验使用的试剂和器材

  36. 交叉配血试验的方法学评价 方法 优点 缺点 盐水配血试验简单、快速 检不出IgG型抗体 酶介质试验简便、经济 准确性、稳定性差 抗球蛋白试验最准确、可靠 复杂、费时、试剂贵 凝聚胺试验快速、准确 需特殊试剂及器材 微柱凝胶试验 灵敏 成本高

  37. 交叉配血的质量保证 ①检测前:标本、试剂及实验器材的要求 ②检测中:工作态度严谨,高度责任感 ③检测后:标本存放7天以上

  38. 交叉配血的临床意义 ① 保证输血安全 ② 发现亚型和不规则抗体

  39. 第五节 新生儿溶血病

  40. (一)ABO新生儿溶血病 是由于母婴血型不合,母体的IgG抗A(B)经过胎盘进入胎儿血循环破坏胎儿红细胞所引起。

  41. ABO溶血症 此种溶血症主要发生在母亲为O型,婴儿为A型或B型者。所以也叫ABO溶血症。 父母血型匹配,子女才能优生。 如果父母血型不匹配,子女很可能得母婴血型不合溶血症。

  42. (二) Rh血型引起的新生儿溶血

  43. 分娩 时胎儿 红细胞大量进入母体使母亲受到免疫

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