1 / 21

A DNS „ujjlenyomat” vizsgálat

A DNS „ujjlenyomat” vizsgálat. A munkacsoportok kémcsövei. Suspect 1 – 5 Tubes contain 10 µl of DNA sample. 70 µl Enzyme mix. 10 µl CS DNA. 0,24 g Agarose. 80 µl Loadingbuffer. 10 µl Marker. 1. A minták előkészítése. Figyelem !.

koto
Download Presentation

A DNS „ujjlenyomat” vizsgálat

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. A DNS „ujjlenyomat” vizsgálat DNA-Fingerprint

  2. A munkacsoportok kémcsövei DNA-Fingerprint

  3. Suspect 1 – 5 Tubes contain 10 µl of DNA sample 70 µl Enzyme mix 10 µl CS DNA 0,24 g Agarose 80 µl Loadingbuffer 10 µl Marker DNA-Fingerprint

  4. 1. A minták előkészítése DNA-Fingerprint

  5. Figyelem! • Minden pipettázáshoz használjunk új pipetta csúcsot a szennyeződés elkerülésére. • Mindegyik csövet zárjuk le és legkevesebb 30 mp-ig keverjük (rázzuk). • . DNA-Fingerprint

  6. 1. A DNS minták csövei CS S 1 S 2 S 3 S 4 S 5 DNA 10µl 10µl 10µl 10µl 10µl 10µl DNA-Fingerprint

  7. 1.1 Pipettázzunk 10 ul enzimkeveréket mindegyik csőbe CS S 1 S 2 S 3 S 4 S 5 DNA 10µl 10µl 10µl 10µl 10µl 10µl Enzyme- 10µl 10µl 10µl 10µl 10µl 10µl (ENZ) DNA-Fingerprint

  8. 2. A minták fermentálása Tegyük a csöveket a vízfürdő állványbaés inkubáljuk 20 percig 37 °C-os vízfürdőben. DNA-Fingerprint

  9. 3. Készítsük elő a gélelektroforézist DNA-Fingerprint

  10. 3.1 Készítsük el az elektroforézis kamrát Comb Metalrods Sledge Helyezzük bele a kamrába a szánt, a fém pálcákat(elektródákat) és a fésűt. DNA-Fingerprint

  11. 3.2Készítsük el a géleket (0,8%) • Adjunk 0,24 g agarózhoz + 30 ml TAE-puffert egy 250 ml-es Erlenmeyer lombikba. • Melegítsük az Erlenmeyer lombikot rövid ideig a mikrohullámú sütőben, keverjük meg és melegítsük újra rövid ideig. DNA-Fingerprint

  12. 3.3 A kamra feltöltése a géllel Öntsük az 55 °C-os gélta géltartóba. Figyelem: • Ellenőrízzük a hőmérsékletet a kézfejünk hátával. • Ne mozgassuk a gélt amíg nem szilárdul meg. DNA-Fingerprint

  13. 3.4 Az elektroforéziskamra elkészítése • Miután a gél megszilár-dult , tegyük fel az elektroforéziskamra elektródáit. • Töltsük fel a kamrát 270 ml TAE-pufferrel, hogy elfedje a gélt. • Távolítsuk el a fésűt. DNA-Fingerprint

  14. 4. A DNS jelölő elkészítése • Pipettázzunk 10 µl töltő puffert (LB) intoa10 µl DNS-jelölőbe(M). DNA-Fingerprint

  15. 5.10 µl töltő puffer hozzáadás Pipettázzunk 10 –t a töltő pufferből a CS-be és az S1 –S5 csövekbe. 10 µl 10 µl 10 µl DNA-Fingerprint

  16. 6. A mélyedések feltöltése A bal sáv szabad Pipettázzunk 20 µl-tminden mintábólés 20 µl-t a DNSjelölőből (marker) (M) a résekbe. Emlékezz a sorrendre! Sávok:töltsd balról jobbra DNA-Fingerprint

  17. 6. A mélyedések feltöltése Figyelem: A géltasakot nem szabad átszúrni. DNA-Fingerprint

  18. 7. GélElektroforézis ( 120 V-talkb. 30 min) Állítsuk le az elektroforézist amikor a kék sáv a gél vége előtt 1 cm-nél tart. DNA-Fingerprint

  19. 8. A DNS festése • Helyezzük át a gélt a festő edénybe és fedjük fe 60 ml festő oldattal 2 percig. • Öntsük vissza a festő oldatot az Erlenmeyer lombikba. DNA-Fingerprint

  20. CSS1S2S3S4S5 M 9. A gél kiértékelése Melyik gyanúsított az elkövető? DNA-Fingerprint

  21. 9. Eredmény DNA-Fingerprint

More Related