1 / 14

Proteinograma: una herramienta de diagnóstico

Proteinograma: una herramienta de diagnóstico. Sección Inmunología. Instituto de Investigaciones Médicas “Alfredo Lanari ”. Proteinograma:

lionel
Download Presentation

Proteinograma: una herramienta de diagnóstico

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Proteinograma: una herramienta de diagnóstico Sección Inmunología. Instituto de Investigaciones Médicas “Alfredo Lanari”

  2. Proteinograma: • Cuatificación de Proteínas Totales y sus fracciones con métodos instrumentales adecuados (densitometría, colorimetría, nefelometría, turbidimetría) • Separación de las proteínas presentes en sangre y orina y su análisis cualitativo, para la detección de anormalidades proteicas. Proteínas: Conformadas por: C – H – O – N – S, que forman aminoácidos Estructura: los aminoácidos forman péptidos formando largas cadenas que se pliegan entre sí dando forma a las estructuras proteicas complejas. • Propiedades físicas: • Movilidad electroforética • Punto isoeléctrico • Peso molecular • Coeficiente de difusión • Viscosidad • Coeficiente de extinción • Propiedades químicas: • Estructura química • Precipitación Método de elección para el estudio de las proteínas: electroforesis sobre sostén.

  3. Instrumental: • Sostén o soporte: acetato de celulosa; agar/agarosa; gel; poliacrilamida, etc. • Buffer: soluciones iónicas de pH alcalino. Buffer Veronal sódico/Michaelis. • Voltaje: otorgado mediante fuente de energía. Voltaje 220 V; ≈ 7mA por tira. • Material a separar: suero fresco o congelado a -20ºC; orina de 24 hs; LCR.

  4. ¿Suero o plasma? Plasma: encontramos proteínas como el fibrinógeno, la protrombina, el factor V y el factor VIII. Corren electroforéticamente en la fracción Gama del proteinograma. Se puede confundir con componente monoclonal. Suero: las proteínas anteriormente mencionadas son consumidas en la formación del coágulo. No existen interferencias. Orina de 24 hs: concentrada de acuerdo a la proteinuria del paciente.

  5. Fracciones de un proteinograma: • Albúmina: • Valor normal: 3.0 - 5.0 g/l. • Indicadora del estado nutricional del paciente. • Fracción Alfa 1 (α1) • α1 antitripsina • α1 antiquimiotripsina • α1 glucoproteína ácida • α1 fetoproteína • Fracción Alfa 2 (α2) • Haptoglobina • Ceruloplasmina • α2 macroglobulina • Lipoproteinas • Fracción Beta (β) • Transferrina • β2 microglobulina • Componentes C3; C4 y C5 del complemento • Fracción Gamma (γ) • Inmunoglobulinas IgG; IgA; IgM, IgD, IgE + ALBÚMINA ALFA 1 (α1) ALFA 2 (α2) BETA (β) GAMMA -

  6. Corrida electroforética NORMAL:

  7. Corrida electroforética NORMAL:

  8. Aumento policlonal de las Inmunoglobulinas:varios clones de Linfocitos B se activan frente a un estímulo, generando un aumento difuso de las inmunoglobulinas. • Hepatopatías agudas (Cirrosis biliar primaria; Hepatitis Autoinmune) • Infecciones crónicas (Tuberculosis; HIV; parasitosis; malaria) • Enfermedades autoinmunes (Lupus Eritematoso sistémico; Artritis • Reumatoidea; Síndrome de Sjögren, Polimiositis)

  9. Aumento monoclonal de las Inmunoglobulinas:un único clon de Linfocitos B y con una especificidad única, genera un único tipo de Inmunoglobulina en forma de banda homogénea. • ¿ Cómo estudiar una banda monoclonal? • Dosaje de Proteínas Totales y Albúmina • Dosaje de Inmunoglobulinas • Determinar “identidad estructural” de la banda • Tipo de cadena pesada: IgG; IgA; IgM; IgD • Tipo de cadena liviana: Kappa o Lambda

  10. Métodos de identificación: • Inmunoelectroforesis en suero y orina de 24 hs. • Inmunofijación en suero. EventualementeInmunofijación en orina • Difusión simple en orina de 24 hs. Inmunoelectroforesis: Electroforesis en agar o gel Aplicación de antisuero mono o poli específico Difusión por 24 hs. Lavado 24 hs Revelado Inmunofijación: Electroforesis en gel Aplicación de antisuero monoespecífico Difusión 15 min. Lavado y revelado

  11. Aumento biclonal de las Inmunoglobulinas:dos clones de linfocitos B con especificidad única o diferente, generan dos bandas homogéneas. Suero: doble banda en zona de Beta y Gamma lenta. Orina de 24 hs concentrada: Albúmina Inmunofijación en suero: doble especificidad: IgG e IgA, cadena liviana Kappa.

  12. Disminución de las Inmunoglobulinas Hipogamma común variable del adulto: Mieloma micromolecular Suero: disminución de las Inmunoglobulinas y banda en zona de Gamma rápida. Orina de 24 hs: banda en zona de Gama rápida. Inmunofijación en suero: banda de cadena liviana Lambda IgA Difusión simple de orina: cadena liviana Lambda. IgG IgM Kappa Lambda

  13. Cuidemos a nuestro Hogar haciendo una adecuada recolección de los residuos peligrosos.

  14. Muchas gracias Sección Inmunología

More Related