240 likes | 405 Views
Kultury rostlinných explantátů. definice historie základní metodické postupy a pojmy typy explantátů problematika zajištění jejich sterility. definice. Explantát = izolovaná životaschopná část rostlinného organizmu, která se pěstuje v podmínkách in vitro Ex plantare
E N D
Kultury rostlinných explantátů definice historie základní metodické postupy a pojmy typy explantátů problematika zajištění jejich sterility
definice Explantát = izolovaná životaschopná část rostlinného organizmu, která se pěstuje v podmínkách in vitro Ex plantare (Řetovský F., Petrů E.: Rostlinné explantáty, 1956, ČSAV Praha) Rostlinné pletivo X pojem „tkáň“ je vyhražen pro živočichy
(pre)historie • 1838 Schleiden M. J. totipotence buněk Arch. Anat., Physiol. U. wiss. Med. (J. Muller), 1838: 137-176; Schwann T., W. Engelman, No. 176 (1910) www.univ-jena.de/biologie/plantphys/
(pre)historie • 1882 Sachs J. „Rostliny syntetizují látky, které formují orgány a jsou polárně transportovány“ Arch. Bot. Inst. Wurzburg, 2: 453 & 689.
I. Fáze historie explantátových kultur (1900-1960) • 1902 Haberlandt G. První, i když neúspěšná kultivace izolovaných pletiv jednoděložných rostlin Sitzungsber Akad. Wiss. Wien, Math.-Naturwiss. Kl., 111: 69-92.
I. Fáze historie • 1922 Knudson L. Asymbiotické klíčení semen orchidejí Bot. Gaz., 73: 1-25. • 1925 Symbiotické klíčení semen orchidejí Bot. Gaz., 29: 345-379.
historie • 1934 Kogl F. et al. Identifikace prvního rostlinného hormonu, IAA, ovlivňujícího růst buněk Z. Physiol. Chem., 228: 90-103 White P. Využití kvasničního extraktu pro kultivaci tabáku a rajčete Plant Physiol., 9: 585-600
historie • 1939 Gautheret R. J. 1.úspěšná dlouhodobá kultivace kambiálních pletiv mrkve a tabáku C. R. Acad. Sci. (Paris), 208: 118-120; Nobecourt P.,C. R. Soc. Biol. (Paris), 130: 1270-1271.White P. R.,Am. J. Bot., 26: 59-64. cbnbp.mnhn.fr/cbnbp/
historie • 1941 Overbeek J. van et al. Kokosové mléko poprvé použito pro podporu růstu a vývoje nezralých embryí Datura Science, 94: 350-351.
historie • 1944 • In vitro kultura tabáku, využitá ke studiu formování adventivních prýtůSkoog F. Am. J. Bot., 31: 19-24
historie • 1955 Objev struktury a syntézy kinetinu Miller et al. J. Am. Chem. Soc., 77: 1392 & 2662-2663. Obr. z článku: Richard Amasino 1955: Kinetin Arrives. The 50th Anniversary of a New Plant Hormone Plant Physiology 138:1177-1184 (2005) Vlevo C. Miller, vpravo F.Strong F. Skoog F. Okumura a M. von Saltza University of Wisconsin
historie 1956 Řetovský F., Petrů E.: Rostlinné explantáty, ČSAV Praha
historie • 1957 Objevena závislost formování kořenů a prýtů na poměru auxinu a cytokininu Skoog F. and Miller C. O. In vitro Symp. Soc. Exp. Biol., No. 11: 118-131.
historie 1958 Reinert J. and Steward F. C. Formování pro-embryí v kalusové a buněčné suspenzní kultuře mrkve Naturwiss., 45: 344-345.
historie • 1960 Morel G. Vegetativní množení orchidejí meristémovou kulturou. Am. Orchid Soc. Bull., 29: 495-497.
historie 1962 Murashige T. and Skoog F. Definování základního média MS. Physiol. Plant., 15: 473-497.
II. Fáze historie explantátových kultur (prašníkové a protoplastové kultury) • 1967 Bourgin J. P. and Nitsch J. P. Získání haploidních rostlin z pylových zrn tabáku Ann. Physiol. Veg., 9: 377-382 & 10: 69-81.
II. Fáze historie explantátových kultur (prašníkové a protoplastové kultury) • 1963T. Yamada a kol. - Tradescantia reflexa (haploidy) • 1966-1964S. Guha, S.C. Maheswari - Datura, diploidizace kolchicin • 1969 J. P. Nitsch a kol. – Nicotiana - androgeneze
II. Fáze historie • 1970 Power J. B. et al. Protoplast fusion. Nature, 225: 1016-1018. • 1978 Melchers G. et al. Somatická hybridizace rajčete a bramboru Carlsburg Res. Comm., 43: 203-218.
III. Fáze historie • 1984 Transformace protoplastů plasmidovou DNA a regenerace transformovaných rostlin Paszkowski J. et al. EMBO J., 3: 2717-2722. • 1985 Transformace listových disků pomocí Agrobacterium tumefaciens a regenerace transformovaných rostlin Horsch R. B. et al., Science, 227: 1229-1231 Vývoj systému přenosu genů pomocí Ti plasmidu Fraley R. T. et al., Bio/Technol., 3: 629-635.
III. Fáze historie….. • 1985 Přenos genů elektroporací Fromm M. E., P. N. A. S. (USA), 82: 5824-5828. Využití kultur transformovaných A.rhizogenes ke zvýšení produkce alkaloidů Flores H. E. and Filner P., Primary & Secondary Metabolism of Plant Cell Cultures. Springer Verlag, (Eds. Neumann K. H., Barz W. and Reinhard E.): 174-186. • 1986 Transformaceprotoplastů tabáku mikroinjekcí DNA Crossway A. et al., Mol. Gen. Genet., 202: 179-185.1987 Využití bombardování mikroprojektily pro genetickou transformaci Klein T. M. et al., Nature, 327: 70-73. Další vývoj se přesouvá do molekulárně genetické oblasti
Základní metodické postupy a pojmy • Meristémové kultury • Kalusové kultury • Somatická embryogeneze • Embryokultury • Prašníkové a mikrosporové kultury • Protoplastové kultury a fúze + buněčné inženýrství (jen mitochondrie) • Genetické manipulace - transformace
Problematika zajištění sterility • Laboratoře • Práce (laminární boxy – flow boxy) • Nástroje (horkovzdušná sušárna) • Média (autokláv, filtrace) • Explantáty (povrchová sterilizace)