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Hépatites A, l’intérêt de la PCR

Hépatites A, l’intérêt de la PCR. Les 8éme Journées de RHEVIR 23/09/05 . BENOIT PONSEILLÉ. Hépatites A, l’intérêt de la PCR. Les 8éme Journées de RHEVIR 23/09/05 . BENOIT PONSEILLÉ. Introduction. 1 ère cause d’hépatite aiguë chez l’enfant Pays sous développé

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Hépatites A, l’intérêt de la PCR

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  1. Hépatites A, l’intérêt de la PCR Les 8éme Journées de RHEVIR 23/09/05 BENOIT PONSEILLÉ

  2. Hépatites A, l’intérêt de la PCR Les 8éme Journées de RHEVIR 23/09/05 BENOIT PONSEILLÉ

  3. Introduction • 1ère cause d’hépatite aiguë chez l’enfant • Pays sous développé • Pays industrialisé • Transmission: • oro-fécale +++ • parentérale (facteur VIII) • Virus ARN simple brin • Virus nu résistant ++

  4. Moyens diagnostics • Diagnostic indirect ++ • Sérologie : ELISA • Diagnostic direct • Culture • Antigénémie • Recherche du génome par PCR IgM= Hépatite aigue

  5. Reverse transcription PCR ( RT-PCR) PCR quantitative en temps réel Technique d’amplification génomique: PCR • Faible variabilité génomique entre les souches • Virus à ARN • Nécessité de quantification de la virémie

  6. Technique d’amplification génomique: PCR • RT- PCR qualitative ciblé sur 3 régions différentes (VP3/VP1;VP1/VP2;VTR) • Technique « maison » • Très sensible et spécifique • Pas de quantification

  7. Technique d’amplification génomique: PCR • RT PCR kit light cycler • Kit commercial • facile d’utilisation • Permet quantification gamme d étalonnage

  8. Intérêt de la PCR • Diagnostic • Précocité du diagnostic • Virémie présente: • 30 jours avant survenue des symptômes • en moyenne 10 jours avant l’apparition des IgM. • 80% PCR HAV + 14 jours avant le pic ALT • Virémie persiste 70 jours

  9. Intérêt de la PCR - Contagiosité • Charge virale moyenne retrouvée: • Sanguine: 10.5 cp/ml • Selles : 10.9 cp/ml • Salive : 10.3 cp/ml • Urines : pas excrétion urinaire • Voie sanguine 10.4 + infectieux que voie fécale • PCR HAV + dans les selles • 49 jours en moyenne • 21 jours après début symptômes

  10. Intérêt de la PCR • Quantification charge virale sérique (CHU Lapeyronie, service virologie)

  11. Encéphalopathie +V effondré+ virémie indétectable Intérêt de la PCR • Pronostic • Pas corrélation entre charge virale/ durée virémie et gravité • Cas à part: Hépatite fulminante • Virémie indétectable ou effondrée • Faible virémie = marqueur fortement associé à une défaillance hépatique ( réponse immunitaire) • Aide au choix de la transplantation;

  12. Intérêt de la PCR • Epidemiologique • Séquencage du virus amplifié génotype des virus Génotype Ia et Ib les plus fréquents • Différenciation cas isolé – début d’épidémie - Impact du génotype • aucun sur la charge virale et virulence • Virémie plus longue en cas de Génotype Ia

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