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Biotecnologia da reprodução animal. Professor Associado II, MsC.Dr. Haroldo Francisco Lobato Ribeiro. Manejo reprodutivo. Monta natural ou controlada. Inseminação Artificial Congelação do sêmen . Inseminação Artificial em tempo fixo. Grupo Ovsynch (n=100). GnRH. GnRH. IATF. PGF 2 .
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Biotecnologia da reproduçãoanimal Professor Associado II, MsC.Dr. Haroldo Francisco Lobato Ribeiro
Manejo reprodutivo Monta natural ou controlada Inseminação Artificial Congelação do sêmen
Grupo Ovsynch (n=100) GnRH GnRH IATF PGF2 48h 16h D7 D10 D0 D9 Grupo CRESTAR (n=103) IATF BE (1mg) VE + NOR CRESTAR® 30h 24h D0 D9 D10 D11 Grupo CIDR (n=100) IATF BE (1mg) PGF2 BE (2mg) CIDR 30h 24h D0 D8 D9 D10
D0 D5 D8 D9 D10 D16 D6 D7 D1 P4 BE IA SOV Lavagem PGF2 PGF2 Retirar P4 + PGF2 CIO Inovulação CIO LEGENDA: BE – Benzoato de Estradiol (3ml). SOV – Superovulação com FSH (8 Doses decrescentes pela manhã e pela tarde iniciando na tarde do D5). PGF2 - Prostaglandina (2ml). IA – Duas inseminações após o cio com intervalo de 12 e 24h. Ações na Doadora Ações nas Receptoras • Protocolo Hormonal
SEXAGEM DE ESPERMATOZÓIDES • Cristal ondula e quebra a corrente em microgotas (aprox. 90.000 microgotas p/ segundo); • Um raio laser incide luz UV sobre os sptz; • Os sptz X fluorecem c/ 4% + intensidade que os Y; • Computador analisa a fluorescência detectora e faz a separação dos sptz com X, Y ou duvidosos; • Se aplica uma carga negativa ou positiva ou nenhumas nas microgotas; • As microgotas carregadas são derivadas pelas continuamente polarizadas; • As amostras são separadas em recipientes. • Citometria de Fluxo 1. Fonte: Site Abspecplan
SEXAGEM FETAL Imagem ultra-sonográfica de macho com 71 dias
Colheita dos ovócitos por punção folicular Maturação in vitro Capacitação dos espermatozóides Fertilização in vitro Cultura in vitro Avaliação dos embriões Congelação do embriões Transferência para as receptoras
DNA extraido Nelore Coleta de sangue Fonte: news.bbc.co.uk/gif Punção da veia jugular Frascos com EDTA Extração do DNA Extração do DNA Fenol Clorofórmio PCR Fonte: Rodrigues, 2006
12-CONCLUSÃO • Dentro do contexto atual da globalização e de uma moeda estável no país. A pecuária regional não tem outra alternativa se não adotar e esgotar o potencial das biotecnias da reprodução e da inseminação artificial que eu considero como o milagre (custos X benefícios) desta atividade para almejar um futuro promissor. • A medicina preventiva em reprodução animal é sem sombra de dúvida o instrumento único para alcançar este sucesso. • A assistência preventiva na reprodução sustenta-se em visitas periódicas e a manutenção de adequados registros com dados necessários e fidedignos com prévia eliminação das causas de infertilidade e aproveitando o máximo potencial biológico do rebanho. • A importância econômica de um bom manejo reflete-se em bons índices reprodutivos alcançados que implicam num ótimo aproveitamento dos recursos disponíveis e conseqüentemente uma boa utilidade econômica (custos / benefícios).