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Introducción a la Célula Microscopía

Introducción a la Célula Microscopía. JA Cardé, PhD UPR-Aguadilla. Objetivos. Repasar las partes que componen el microscopio y sus funciones. Conocer los diferentes microscopios utilizados para estudiar la célula.

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Introducción a la Célula Microscopía

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Presentation Transcript

  1. Introducción a la CélulaMicroscopía JA Cardé, PhD UPR-Aguadilla

  2. Objetivos • Repasar las partes que componen el microscopio y sus funciones. • Conocer los diferentes microscopios utilizados para estudiar la célula. • Establecer la importancia que posee el uso del microscopio en el estudio de la célula a distintos niveles. • Practicar en el uso y manejor el correcto del microscopio.

  3. El Microscopio

  4. Terminología • magnificación • resolución • apertura numérica • índice de refracción • inversión • profundidad • contraste • parfocal

  5. Resolución = 0.6 x largo de onda ____________________ Apertura Numérica (NA)

  6. Apertura Numérica

  7. Indice de refracción

  8. 01_06_What can we see.jpg Resolución: distancia mínima entre dos puntos a la que son distinguidos como dos puntos Cuál microscopio tendrá una mejor resolucion: uno con 200nm o uno con 0.2 nm?

  9. 01_09_Scale.jpg

  10. Tipos de Microscopios • Tipo Uso / Imagen • campo brillante : tejido, células, microorganismos vivos o fijos. Imagen: gris o negro con fondo blanco. Comunes, baja resolución • campo oscuro : especímenes sin tinción. Imagen: fondo oscuro imagen brillante • invertidos: morfología de cultivos vivos, Imagen: gris cultivo de tejido • contraste de fase: especímenes vivos, no tinción, Imagen: grises;

  11. -1000X • r: 0.2um • 3 factores • luz enfocada por condensador • buena preparación para que la luz pase • conjunto de lentes y buen enfoque

  12. 01_04_Early microscopes.jpg

  13. 01_07_Internal structures.jpg

  14. 01_05_Cells form tissues.jpg

  15. Tipos de Microscopios • Tipo Uso / Imagen • fluorescencia: estructuras discretas, fluorocromos, UV • confocal: organelos, citoesqueleto, macromoleculas, laser, imagen fluorescente, alta resolución • TEM: estructuras internas celulares, imagen blanco/negro 2D, alta resolución • SEM: estructuras externas, image, 3D, alta resolución

  16. 01_17_Mitochondria.jpg

  17. 01_27_cytoskeleton.jpg Citoesqueleto • -Unico de eucariotas • Actina, tubulina • Dirigen y Guian los Movimientos celulares

  18. 01_08_TEM.jpg

  19. 01_11_E. Coli.jpg

  20. 01_14_Yeasts.jpg

  21. 01_15_Nucleus.jpg

  22. 01_16_Chromosomes.jpg

  23. 01_18_folds mito.jpg

  24. 01_20_Chloroplasts.jpg

  25. 01_22_ER.jpg

  26. 01_23_Golgi apparatus.jpg

  27. 01_28_Microtubules.jpg - Abonan al concepto de un citop dinamico!!

  28. 01_30_protozoan eats.jpg

  29. Organismos Modelos

  30. Ocular Cuerpo tubular Brazo Revolver Pinzas Objetivos Carro mecanico Laminilla Platina Macro Condensador/Diafragma Lampara Micro Nivel Base

  31. Visualización Célula Microscopios Laminillas Cubreobjetos Cubeta o bandeja de tinción Agujas Pinzas Escalpelo Pinzas Acetocarmín y Azul de metileno Goteros Cebolla Palillos de dientes Agua

  32. Protocolo • Separar una de las hojas internas de la cebolla y desprender la tenue membrana que está adherida por su cara inferior cóncava. • Depositar el fragmento de membrana en una laminilla con unas gotas de agua. Pon el porta sobre bandeja de tinción para que caiga en ella el agua y los colorantes. • Escurrir el agua, añadir una gotas de Acetocarmín sobre la membrana y dejar actuar durante 5 minutos aproximadamente. • ¡No debe secarse la epidermis por falta de colorante o por evaporación del mismo!

  33. Protocolo… • Con el cuentagotas bañar la epidermis con agua abundante hasta que no suelte colorante. • Colocar sobre la preparación un cubreobjetos evitando que se formen burbujas y llevarla al microscopio. • Observa la preparación a distintos aumentos, empezando por el más bajo. (10x y 40x) • Identifica las distintas células del tejido epidérmico y las de las hojas del bulbo de cebolla si estuviera disponible

  34. Cebolla nativa (150x) Cebolla azul metilen (150x).

  35. Núcleo (600x) Retículo Endoplásmico (600x)

  36. Células Epiteliales Bucales • Raspa suavemente el interior de la mejilla con un palillo (siempre por la parte roma, procurando no cortarse). • Coloca la mucosa blanca que se obtiene en el portaobjetos, añade una gota de agua. • Realiza una extensión (frotis) deslizando el borde de un porta sobre el que tiene la muestra.

  37. Protocolo… • Coloca el porta en la placa de Petri, añade unas gotas de colorante sobre la muestra y déjalo actuar durante cinco minutos. • Lava con cuidado el exceso de colorante y sécalo con un poco de papel de filtro. • Añade una gota de agua a la muestra. • Coloca el cubreobjeto apoyándolo por un lado y dejándolo caer para que no queden burbujas. • Observa la preparación al microscopio, utilizando varios objetivos, realiza un dibujo detallado de las células e indica el aumento del mismo.

  38. Células epitelio bucal con azul de metileno

  39. Resultados y Discusión • Prepara en tu libreta dibujos de las células sin tinción y con tinción en distintos aumentos. • Rotula e identifica las partes de la célula en los dibujos. • Busca en internet las estructuras principales de la célula con su nombre y función. • Compara y contrasta células animales con vegetales. • A que se podría deber que el núcleo adquiera mas intensidad de color? • Que mas se observo ademas de células de mucosa bucal?

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